神经内分泌癌靶向治疗制造技术

大部分神经内分泌(NE)癌过度表达生长抑素受体(SSTRs)。本文公开了用作NE癌靶向治疗剂的抗SSTR2单克隆抗体和抗体药物缀合物(ADC)。还公开了编码所公开抗体的分离核酸，以及含有可操作地连接至表达控制序列的此分离核酸的核酸载体。还公开了用这些载体转染的细胞和这些细胞用以产生所公开的重组抗体的用途。还公开了一种治疗受试者的神经内分泌(NE)癌的方法，其包含向所述受试者施用有效量的与抗癌剂结合的所公开抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】神经内分泌癌靶向治疗相关申请的交叉引用本申请要求于2018年10月8日提交的美国临时申请第62/742,567号的权益，所述临时申请以全文引用的方式并入本文中。序列表本申请包含作为ASCII.txt文件名称为“222104_2890_Sequence_Listing_ST25”创建于2019年10月8日、以电子形式提交的序列表。所述序列表的内容以全文引用的方式并入本文中。
技术介绍
神经内分泌(NE)癌，如类癌、胰岛细胞瘤和甲状腺髓样癌(MTC)经常转移至肝脏(AdlerJT等人,肿瘤学家(Oncologist.)200813(7):779-93；PinchotSN等人,研究性药物的现代观点(CurrOpinInvestigDrugs.)20089(6):576-82；ChenH等人,美国外科医学杂志(JAmCollSurg.)1998187(1):88-92；ChenH等人,胃肠外科杂志(JGastrointestSurg.)19982(2):151-5；ChenH等人,外科肿瘤学杂志(JSurgOncol.)200897(3):203-4)。它们是流行性第二高的GI恶性肿瘤(YaoJC等人,临床肿瘤学杂志(JClinOncol.)200826(18):3063-72)。90％的胰腺类癌患者和50％的胰岛细胞瘤患者发展出孤立性肝转移(HillerN等人,腹部影像(AbdomImaging.)199823(2):188-90；BrownKT等人,血管与介入放射学杂志(JVascIntervRadiol.)199910(4):397-403；PinchotSN等人.肿瘤学家200813(12):1255-69；IsozakiT等人,内科医学(InternMed.)199938(1):17-21)。具有未经治疗的孤立性神经内分泌肝转移的患者具有<30％的5年存活概率。据报道，在美国有超过100,000名与NE癌共存的患者，每年有16,000例新诊断，且估计有超过200,000例未诊断病例(ChenH等人,美国外科医学杂志1998187(1):88-92；NortonJA.临床胃肠病学最佳实践与研究(BestPractResClinGastroenterol.)200519(4):577-8)。因此，有必要开发治疗NE癌的新型治疗。对于具有局部肿瘤的早期疾病，单独手术切除通常是可以治愈的，但是40-95％的NE癌患者在最初诊断时是转移性的(ShibaS等人,胰腺病学(Pancreatology).201616(1):99-105)，且广泛的转移使得完全切除无法实现。考虑到NE癌对肝的高度侵犯，许多患者不适合手术介入，且NE癌切除后往往在外科床内就会复发。其它形式的治疗，包括化疗栓塞术、放射栓塞术、射频消融、冷冻消融和化疗(即mTOR抑制剂“依维莫司(everolimus)”和多激酶抑制剂“舒尼替尼(sunitinib)”)，显示出有限的疗效且引起重度全身性毒性(BrownKT等人,血管与介入放射学杂志199910(4):397-403；IsozakiT等人,内科医学199938(1):17-21；ErikssonB等人,神经内分泌学(Neuroendocrinology)200887(1):8-19；LalA等人,肿瘤学现代观点(CurrOpinOncol.)200618(1):9-15；LehnertT.器官移植(Transplantation)199866(10):1307-12；ZhangR等人,内分泌学(Endocrinology)1999140(5):2152-8；BoudreauxJP等人,外科学年鉴(AnnSurg.)2005241(6):839-45；NguyenC等人,核医学杂志(JNuclMed.)200445(10):1660-8；FiorentiniG等人,化疗杂志(JChemother.)200416(3):293-7；ZuetenhorstJM等人,内分泌相关癌症(EndocrRelatCancer.)200411(3):553-61)。因此，除手术以外，不存在针对转移性NE癌的治愈性治疗。此外，由于这些肿瘤的特征为激素分泌过多，因此NE癌肝转移患者常伴有虚弱症状，如无法控制的腹泻、潮红、皮疹和心力衰竭(BrownKT等人,血管与介入放射学杂志199910(4):397-403；MillerCA等人,北美肿瘤外科临床(SurgOncolClinNAm.)19987(4):863-79)。因此，NE癌患者往往具有较差的生活质量，此凸显出迫切需要开发新的治疗策略以减少NE恶性肿瘤的进展。
技术实现思路
大部分神经内分泌(NE)癌过度表达生长抑素受体(SSTR)，其中SSTR2亚型主要发现于70-100％的NE肿瘤(NET)中的细胞表面上。更确切地说，NET中的SSTR2的表面表达水平比正常细胞中的SSTR2的表面表达水平高大约20倍。因此，本文公开了用作NE癌靶向治疗剂的抗SSTR2单克隆抗体(mAb，IgG)和抗体药物缀合物(ADC)。在一些实施例中，所公开的mAb下调致癌信号传导路径，减少激素积聚和相关类癌心脏衰竭，且增加T细胞的细胞因子产生。更重要的是，mAb证实对过度表达SSTR2的NET有高特异性、强结合和有效的药物递送能力。这样，所公开的ADC具有SSTR2靶向mAb和由mAb递送的强力药物的整合临床益处，从而可克服传统化疗中所观察到的非特异性结合和重度全身性毒性。所公开的抗SSTR2单克隆抗体是使用从人类SSTR2的第2和第4细胞外结构域克隆的两种肽产生的。还公开了一种特异性结合SSTR2的抗体片段。例如，抗体可以是特异性结合SSTR2的抗体的Fab或单链可变片段(scFv)。本文还公开了至少包含所公开的抗体的抗原结合区的重组、人源化和/或嵌合抗体。在一些实施例中，抗SSTR2区(例如scFv)可包含具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变重(VH)结构域和具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变轻(VL)结构域。在一些实施例中，VH结构域的CDR1序列包含氨基酸序列DYHLN(SEQIDNO:1)DYHMN(SEQIDNO:26)；VH结构域的CDR2序列包含氨基酸序列IRNKRYGYRTEYSASVKG(SEQIDNO:2)或LIRNKANGYRTEYSASVKG(SEQIDNO:27)；VH结构域的CDR3序列包含氨基酸序列DFYDPFAY(SEQIDNO:3)；VL的CDR1序列包含氨基酸序列RSSQSLVHSNGNTYLH(SEQIDNO:4)；VL结构域的CDR2序列包含氨基酸序列KVSNRFS(SEQIDNO:5)；且VL结构域的CDR3序列包含氨基酸序列SQSTHVPFT(SEQIDNO:6)或SQSTRVPFT(SEQIDNO:28)。在一些实施例中，抗SSTR2VH结构域包含氨基酸序列：EVKLVESGGGLVQPGGSLRLSCATSGFTFTDYHLNWVRQPPGKALEWLALIRNKRYGYRTEYSASVKGRFTISRDNSQS本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种选择性结合肿瘤细胞上的SSTR2细胞外表位的分离抗体，其特征在于：包含具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变重(V

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181008 US 62/742,5671.一种选择性结合肿瘤细胞上的SSTR2细胞外表位的分离抗体，其特征在于：包含具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变重(VH)结构域和具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变轻(VL)结构域，其中所述VH结构域的所述CDR1序列包含氨基酸序列SEQIDNO:1或SEQIDNO:26；所述VH结构域的所述CDR2序列包含氨基酸序列SEQIDNO:2或SEQIDNO:27；所述VH结构域的所述CDR3序列包含氨基酸序列SEQIDNO:3；所述VL的所述CDR1序列包含氨基酸序列SEQIDNO:4；所述VL结构域的所述CDR2序列包含氨基酸序列SEQIDNO:5；且所述VL结构域的所述CDR3序列包含氨基酸序列SEQIDNO:6或SEQIDNO:28。


2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：抗SSTR2VH结构域包含氨基酸序列SEQIDNO:7或SEQIDNO:18。


3.根据权利要求1或2所述的抗体，其特征在于：抗SSTR2VH结构域包含氨基酸序列SEQIDNO:8或SEQIDNO:19。


4.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于：包含氨基酸序列S...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓光，周彔方，区健发，司英男，蕾娜塔·雅斯库拉斯图尔，赫伯特·陈，杰森·D·惠特，张建宜，
申请(专利权)人：UAB研究基金会，
类型：发明
国别省市：美国;US