一种凝结芽孢杆菌的计数检测方法技术

本发明专利技术涉及一种凝结芽孢杆菌的计数检测方法，包含以下步骤：(S1)以无菌操作进行待测样品的如下操作：稀释、热激活、超声分散、均质后得到样品稀释液；(S2)对样品稀释液进行连续梯度稀释，直至样品稀释液预估含菌量为10‑300CFU/mL后结束稀释；(S3)取适宜稀释梯度的样品在pH在5.0‑5.5的BC培养基中培养后，进行凝结芽孢杆菌菌落计数。此方法可广泛适用于不同凝结芽孢杆菌菌株的检测，并且计数结果准确、平均误差小、检测周期仅需26‑30小时即可得出结果。

【技术实现步骤摘要】
一种凝结芽孢杆菌的计数检测方法
本专利技术涉及微生物检测
，具体涉及凝结芽孢杆菌菌液或菌粉中凝结芽孢杆菌营养体和芽孢的检测方法。
技术介绍
凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)是目前全球范围内获得各国政府在食品、饲料中添加许可的唯一一种芽孢乳酸菌。其主要有益生功能是在肠道代谢过程中产乳酸，对促进消化吸收，维持肠道菌群平衡有着非常重要的功效。同时，因为其芽孢具有耐高温、耐酸碱、耐胆盐等优良的抗逆性能，大大拓展了益生菌在食品行业中的应用范围，近年来凝结芽孢杆菌被众多食品、饲料企业所关注，并已有不少添加凝结芽孢杆菌产品上市销售。由于凝结芽孢杆菌相较于其他传统益生菌而言，被研究和应用的时间较短，国家标准中还没有发布其统一的检测方法，各单位的检测方法往往只适用于自身研究的菌株。细菌计数检测是一项系统性的工作，凝结芽孢杆菌在代谢过程中分泌的多糖和糖蛋白会导致菌体之间出现强粘结状态，一般的处理方式难以使其分散。所以凝结芽孢杆菌计数检测时的预处理方式、分散方式、培养基组分、培养条件中的任何一步都有可能使计数结果出现不准确、平均误差过本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种凝结芽孢杆菌的计数检测方法，包括以下步骤：/n(S1)以无菌操作进行待测样品的如下操作：稀释、热激活、超声分散、均质后得到样品稀释液；/n(S2)对样品稀释液进行连续梯度稀释，直至样品稀释液预估含菌量为10-300CFU/mL后结束稀释；/n(S3)取适宜稀释梯度的样品在pH在5.0-5.5的BC培养基中培养后，进行凝结芽孢杆菌菌落计数。/n

【技术特征摘要】
1.一种凝结芽孢杆菌的计数检测方法，包括以下步骤：
(S1)以无菌操作进行待测样品的如下操作：稀释、热激活、超声分散、均质后得到样品稀释液；
(S2)对样品稀释液进行连续梯度稀释，直至样品稀释液预估含菌量为10-300CFU/mL后结束稀释；
(S3)取适宜稀释梯度的样品在pH在5.0-5.5的BC培养基中培养后，进行凝结芽孢杆菌菌落计数。


2.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌的计数检测方法，其特征在于，步骤(S1)所述稀释是稀释至10-1000倍，优选稀释100-200倍。


3.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌的计数检测方法，其特征在于，所述稀释采用无菌稀释液进行，所述无菌稀释液中含有0.5-2wt％的表面活性剂和0.5-1.5wt％的氯化钠；优选地，所述无菌稀释液中含有1.0-1.5wt％的表面活性剂和0.9-1.2wt％的氯化钠。


4.根据权利要求3所述的凝结芽孢杆菌的计数检测方法，其特征在于，所述表面活性剂为阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂的混合物。


5.根据权利要求4所述的凝结芽孢杆菌的计数检测方法，其特征在于，所述阴离子表面活性剂选自十二烷基硫酸钠，十二烷基苯磺酸钠，十二烷基硫酸铵，十二烷基聚氧乙烯醚硫酸钠中的至少一种；所述非离子表面活性剂的HLB在12-16之间，具体选自吐温40，吐温60，吐温80，OP-10，聚氧乙烯烷基酚，聚氧乙烯单油酸酯中的至少一种。


6.根据权利要求4所述的凝结芽孢杆菌的计数检测方法，其特征在于，阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂的质量比为4-6：1。


7.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌的计数检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘笑尘，李鑫，
申请(专利权)人：长沙和光生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43