慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法技术

本发明专利技术涉及生物医学工程技术领域，具体涉及慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法；包括以下步骤：S1、取清洁雄性成年大鼠48只进行分组，S2、构建慢性铝染毒模型，S3、构建Morris水迷宫，S4、实施LTP实验，S5、实施高尔基染色，S6、实施Western blot检测，S7、对实验进行统计学分析；本发明专利技术慢性铝染毒损伤大鼠学习与记忆能力，且随着染毒剂量的增加对LTP的抑制作用越明显，大鼠海马树突棘形态松散，密度降低，慢性铝染毒通过下调NLGN1、NMDAR‑2A、NMDAR‑2B以及PSD‑95蛋白表达水平损伤海马突触功能，导致大鼠学习记忆功能受损，实现了有效的分析。

【技术实现步骤摘要】
慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法
本专利技术涉及生物医学工程
，具体涉及慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法。
技术介绍
铝是一种广泛存在于自然界中的慢性蓄积性神经毒物，可通过多种方式及途径进入人体并对多器官系统造成危害，其中神经系统受到的危害最为严重，可导致多种神经退行性疾病，包括帕金森病、阿尔茨海默病和透析性脑病等。近年来的队列研究也显示，职业性电解铝作业工人的短时记忆能力、书写言语能力以及计算能力均相较于对照人群明显降低，其轻度认知障碍的检出率也明显升高。因此，研究铝毒性机制，积极防治铝暴露导致的中毒是重要的职业卫生和环境卫生问题。以往的研究主要集中在铝染毒对N-甲基-D-天冬氨酸和α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体功能的损害，以及对长时程增强(long-termpotentiation，LTP)的抑制作用。通过急性侧脑室和亚慢性腹腔注射染毒模型，均发现铝会引起N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-asparticacidreceptor，NMDAR)1、NMDAR-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、取清洁雄性成年大鼠48只进行分组；/nS2、构建慢性铝染毒模型；/nS3、构建Morris水迷宫；/nS4、实施LTP实验；/nS5、实施高尔基染色；/nS6、实施Western blot检测；/nS7、对实验进行统计学分析。/n

【技术特征摘要】
1.慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、取清洁雄性成年大鼠48只进行分组；
S2、构建慢性铝染毒模型；
S3、构建Morris水迷宫；
S4、实施LTP实验；
S5、实施高尔基染色；
S6、实施Westernblot检测；
S7、对实验进行统计学分析。


2.根据权利要求1所述的慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法，其特征在于，在所述步骤S1中，取清洁雄性成年大鼠48只进行分组的方法为：
清洁雄性成年大鼠48只，体重均为220-300g；按体重相近随机分为对照组以及10、20、40μmol/kg麦芽酚铝染毒组，每组12只。


3.根据权利要求1所述的慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法，其特征在于，在所述步骤S2中，构建慢性铝染毒模型的方法为：
按照每100g体重0.1mL进行腹腔注射；对照组注射生理盐水，铝染毒组分别注射10、20、40μmol/kg麦芽酚；采用染毒5d停2d的注射方式染毒，持续3个月；室内环境温度控制在22-24℃，昼夜节律自然照明。


4.根据权利要求1所述的慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法，其特征在于，在所述步骤S3中，构建Morris水迷宫的方法为：
构建被水平垂直均等分成4个象限的直径120cm、高75cm的水池中；在目标象限的正中位置放置一个直径12cm、高50cm的平台，水位高于平台1-2cm；前5天每天在随机选择的4个象限中训练，每个象限中，大鼠头朝池壁，从象限中央进入水中，训练时长120s，记录大鼠从入水到发现平台的潜伏期，引导大鼠停留在平台上10s；第6天，大鼠在无平台的条件下由随机一个象限入水，在120s内记录大鼠穿越平台的次数。


5.根据权利要求1所述的慢性铝影响突触可塑性及神经连接蛋白1表达的分析方法，其特征在于，在所述步骤S4中，实施LTP实验的方法为：
每组选取6只大鼠，按照每100g体重注射0.7mL20％乌拉坦溶液麻醉；将完全麻醉的大鼠用专用脑立体定向定位器固定，暴露颅骨；以前囟中点右旁开3.8cm，向后4.2cm为圆心钻直径4mm的孔；清理周围碎颅骨，暴露脑皮质；利用微推进装置将电极下放至预定的海马刺激及记录部位，刺激电极顶端位于Schaffer侧枝部位，记录电极的顶端则位于海马CA1区；每30s进行1次测试刺激，获得场兴奋性突触后电位；根据产生最大fEPSP振幅50％的刺激强度作为基础...

【专利技术属性】
技术研发人员：张淑惠，牛侨，冯芹，
申请(专利权)人：山西医科大学，
类型：发明
国别省市：山西;14