测定多肽的脱酰胺和免疫原性的系统和方法技术方案

可以通过二维相关光谱和/或二维共分布光谱确定蛋白质、肽和/或类肽的特征。可以关于施加的应力，如热应力，获得蛋白质、肽和/或类肽的光谱数据。二维相关光谱可用于生成二维同步图和异步图。异步图提供了增强的分辨率和分子事件的顺序，这些分子事件是所施加应力的函数。可以在异步图中识别峰，并且显示出异相强度变化的峰的相关性可以用于确定脱酰胺事件的存在和程度。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】测定多肽的脱酰胺和免疫原性的系统和方法相关申请本申请要求2018年10月24日提交的美国临时申请第62/750,022号的权益，其全部内容通过引用合并于此。
技术介绍
诸如蛋白质治疗剂的候选药物的高损耗率是药物开发的主要成本驱动因素，并且仍然是生物制药行业的主要挑战。免疫原性、蛋白质聚集、脱酰胺和氧化是监管机构关注的问题，因为它们可能会降低药效和患者的安全性而造成影响。蛋白质是复杂的分子，在不同的条件下，可能会发生非酶促的天冬酰胺转化为天冬氨酸或谷氨酰胺转化为谷氨酸的脱酰胺作用。仅在高pH条件下观察到异构体产物的出现。具体地说，蛋白质中的脱酰胺过程与低和高pH条件以及热应力有关。因此，发生的风险包括：(1)治疗性蛋白质的细胞培养生产过程中的上游加工，和/或(2)纯化，(3)病毒清除以及储存和输送过程中的下游加工，和(4)热应力和/或低/高pH条件。当前以高通量方式评估溶液中蛋白质的脱酰胺作用存在局限性。诸如HPLC、NMR和MS的当前技术在可分析的样品数量，脱酰胺作用后蛋白质稳定性的评估以及对功效和安全性的影响方面存在局限性。r>脱酰胺作用的机理本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.处理代表蛋白质、肽和/或类肽的特征的数据的方法，所述方法包括：/n使用量子级联激光显微镜获得所述蛋白质、肽和/或类肽的光谱数据，无需针对所施加的扰动使用探针或添加剂；/n应用二维相关性分析以生成所述蛋白质、肽和/或类肽的异步相关图；及/n在所述异步相关图中识别至少一个与所述蛋白质、肽和/或类肽的脱酰胺相关的峰。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181024 US 62/750,0221.处理代表蛋白质、肽和/或类肽的特征的数据的方法，所述方法包括：
使用量子级联激光显微镜获得所述蛋白质、肽和/或类肽的光谱数据，无需针对所施加的扰动使用探针或添加剂；
应用二维相关性分析以生成所述蛋白质、肽和/或类肽的异步相关图；及
在所述异步相关图中识别至少一个与所述蛋白质、肽和/或类肽的脱酰胺相关的峰。


2.根据权利要求1所述的方法，还包括：使用所述至少一个峰来确定相对于所施加的扰动的光谱强度变化的分布式存在的顺序。


3.根据权利要求2所述的方法，其中，使用所述至少一个峰包括：
对于两个波数v1和v2，确定对应于这两个波数的所述至少一个峰是否具有正值。


4.根据权利要求2所述的方法，其中，使用所述至少一个峰包括：
对于两个波数v1和v2，确定对应于这两个波数的所述至少一个峰是否具有负值。


5.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：在异步相关图中识别多个峰，并且在存在显示出异相强度变化的峰的相关性时，确定发生了脱酰胺事件。


6.根据权利要求1所述的方法，其中，获得所述光谱数据包括：作为内部探针分析所述蛋白质、肽和/或类肽的侧链模式。


7.根据权利要求1所述的方法，还包括：对所述光谱数据执行二维共分布分析。


8.根据权利要求1所述的方法，还包括：
应用二维相关性分析来生成所述蛋白质、肽和/或类肽的同步相关图。


9.根据权利要求8所述的方法，还包括：从所述异步相关图和同步相关图确定分子事件的顺序。


10.根据权利要求9所述的方法，进一步包括：基于所述分子事件的顺序确定脱酰胺的程度。


11.根据权利要求8所述的方法，进一步包括：确定所述蛋白质、肽和/或类肽中结构域的稳定性。


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【专利技术属性】
技术研发人员：B·帕斯特拉纳里奥斯，野田勇夫，
申请(专利权)人：蛋白质动态解决方案有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US