一种用于驼奶发酵的复合菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种用于驼奶发酵的复合菌剂及其制备方法和应用，所述复合菌剂包括如下重量份的菌种：植物乳杆菌K25 4～6份、植物乳杆菌KC28 2～4份、植物乳酸杆菌D1501 1～3份、肠系膜明串珠菌SHU1396 0.5～1.5份；本发明专利技术复合菌剂，通过各菌种的选择，能够快速实现驼奶的发酵，发酵10h得到的酸奶活菌数在10

【技术实现步骤摘要】
一种用于驼奶发酵的复合菌剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及微生物发酵
，具体涉及一种用于驼奶发酵的复合菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
酸奶发酵剂是指具备分解乳糖产生乳酸能力，含菌量高，菌活性高，通常被用于生产干酪、酸奶等发酵产品的一类细菌培养物，是酸奶产香和产酸的主要原因。酸奶发酵剂能够使原材料产生乳酸，同时产生乙酸、乙醛等小分子风味物质，芳香化合物、细菌素等大分子物质，使发酵产品具有独特风味和卖点。发酵剂的品质高地直接影响乳制品的组织状态和口感。例如，现有一种酸奶发酵菌剂、全菌酸奶及其制备方法的研究中。该酸奶发酵菌剂的组成成分包括：按重量比为干酪乳杆菌10％、植物乳酸杆菌10％、保加利亚杆菌10％、副干酪乳杆菌15％、鼠李糖乳杆菌15％、瑞士乳杆菌5％、嗜酸乳杆菌5％、两歧双歧杆菌5％、长双歧杆菌5％、乳双歧杆菌5％、短双歧杆菌5％、婴儿双歧杆菌5％、嗜热链球菌5％。但是该发酵剂不适合发酵驼乳；具体因为驼奶本身含有溶菌酶，抑菌效果强，现有市售发酵菌剂用于发酵驼奶活性会受到抑制，导致发酵时间较长以及产品质量较差。同时，市售菌剂中菌株对酸和胆盐的耐受能力差，耐消化道消化液溶解破坏能力也弱一点，益生功能的菌落数量必然会低一些。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于驼奶发酵的复合菌剂及其制备方法和应用，该复合菌剂能够更好的适应驼奶的发酵，缩短发酵时间，以及提高活菌含量和口感。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：本专利技术第一方便提供一种用于驼奶发酵的复合菌剂，所述复合菌剂包括如下重量份的菌种：植物乳杆菌K254～6份、植物乳杆菌KC282～4份、植物乳酸杆菌D15011～3份、肠系膜明串珠菌SHU13960.5～1.5份。本专利技术上述各菌种可以通过购买得到，也可以通过分离得到，优选地，从酸驼奶样品中分离得到；具体地，可以通过如下方法得到：从阿拉善牧人家获取的酸驼奶样品选择稀释浓度梯度为10-5进行涂布在普通MRS固体培养基进行培养,然后在MRS培养基上进行划线纯化四次后，进行气味、颜色等评定。并对这两种平板进行形态学观察和分析。然后在MRS液体种子培养基中37℃120rpm进行摇床培养16h，利用细菌基因组提取试剂盒提取基因组DNA，利用16SrDNA通用引物对乳酸菌基因组进行PCR扩增，将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测并送到北京华大基因公司测序，序列在NCBI中进行BLAST比对，即确定筛选到的菌株分别为植物乳杆菌K25，植物乳杆菌KC28，乳酸杆菌D1501和肠系膜明串珠菌SHU1396。本专利技术第二方面提供一种上述复合菌剂的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：(a)将各菌种分别接种于培养基中进行扩大培养、离心，得到各菌种菌泥；(b)将各菌种菌泥分别与保护剂混合制成菌悬液、冷冻干燥，得到各菌种的冻干粉；(c)将各菌种冻干粉混合，得到所述复合菌剂。优选地，所述步骤(a)中，所述培养基包括如下重量百分含量的组分：碳源3％～5％、氮源3％～5％、增殖因子6％～12％、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾，余量为UMRS培养基，所述磷酸氢二钠和磷酸二氢钾的添加终浓度为0.05mol/L～0.2mol/L，并且磷酸氢二钠与磷酸二氢钾的摩尔比为1∶(12～13)；当菌种为植物乳杆菌K25时，培养基中的碳源为质量比为1∶(1.5～2.5)的D-山梨醇和葡萄糖，氮源为质量比为3∶(3.5～4.5)的牛肉膏和胰蛋白胨，增殖因子为西红柿汁；当菌种为植物乳杆菌KC28时，培养基中的碳源为质量比为1∶(0.9～1.1)的D-山梨醇和蔗糖，氮源为质量比为3∶(3.5～4.5)的牛肉膏和酵母浸粉，增殖因子为质量比为1∶(0.9～1.1)的胡萝卜汁和橙汁；当菌种为植物乳酸杆菌D1501时，培养基中的碳源为质量比为1∶(0.9～1.1)的D-山梨醇和葡萄糖，氮源为质量比为3∶(4.5～5.5)的牛肉膏和胰蛋白胨，增殖因子为胡萝卜汁；当菌种为肠系膜明串珠菌SHU1396时，培养基中的碳源为质量比为(1.5～2.5)∶1的蔗糖和葡萄糖，氮源为质量比为1∶(0.9～1.1)的牛肉膏和大豆蛋白胨，增殖因子为质量比为1∶(0.9～1.1)的柠檬汁和胡萝卜汁。优选地，所述步骤(a)中，当菌种为植物乳杆菌K25时，离心速度为4000r/min，离心时间为10min；当菌种为植物乳杆菌KC28时，离心速度为4000r/min，离心时间为10min；当菌种为植物乳酸杆菌D1501时，离心速度为8000r/min，离心时间为10min；当菌种为肠系膜明串珠菌SHU1396时，离心速度为6000r/min，离心时间为10min。优选地，所述步骤(b)中，菌泥与保护剂的质量比为1∶(0.8～1.2)。优选地，所述步骤(b)中，保护剂由脱脂乳、乳糖、海藻糖以及生理盐水制得；当菌种为植物乳杆菌K25时，保护剂由如下重量百分含量的组分构成：脱脂乳14％～15％、乳糖8％～9％、海藻糖8％～10％，余量为生理盐水；当菌种为植物乳杆菌KC28时，保护剂由如下重量百分含量的组分构成：脱脂乳17％～18％、乳糖8％～9％、海藻糖8％～9％，余量为生理盐水；当菌种为植物乳酸杆菌D1501时，保护剂由如下重量百分含量的组分构成：脱脂乳15％～16％、乳糖6％～7％、海藻糖6％～7％，余量为生理盐水；当菌种为肠系膜明串珠菌SHU1396时，保护剂由如下重量百分含量的组分构成：脱脂乳15％～16％、乳糖7％～8％、海藻糖4％～5％，余量为生理盐水。优选地，所述步骤(a)中，各菌种的接种量分别为(1.2～1.5)×1012CFU/L；扩大培养的温度为35～39℃，培养时间为22～26h。本专利技术第三方面提供一种驼奶的发酵方法，所述的发酵方法包括将上述复合菌剂添加到驼奶中进行发酵。优选地，所述复合菌剂的添加终浓度为0.8～1.2g/L；优选地，所述发酵温度为35～39℃，发酵时间为8～12h。与现有技术相比，本专利技术的有益效果至少包括：本专利技术复合菌剂，通过各菌种的选择，能够快速实现驼奶的发酵，发酵10h得到的酸奶活菌数在109CFU/mL以上，乙醛含量在12μg/ml以上，色泽上较均匀、乳黄色、口感纯正、较酸、甜味较淡、乳味很重；此外，发酵后的酸奶在-20℃存放1年以上，活菌存活率在90％以上。本专利技术复合菌剂的制备方法中，通过针对不同菌种选择特定培养基以及保护剂，能够保障各菌种的活性，大大缩短了菌株的培养时间并提高菌种的性能；此外，该复合菌剂具有活菌数高、体积小、保存稳定性好、便于储存和运输等特点。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术技术方案的实施例进行详细的描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本专利技术的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本专利技术的保护范围。需要注意的是，除非另有说明，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于驼奶发酵的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂包括如下重量份的菌种：/n植物乳杆菌K25 4～6份、植物乳杆菌KC28 2～4份、植物乳酸杆菌D1501 1～3份、肠系膜明串珠菌SHU1396 0.5～1.5份。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于驼奶发酵的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂包括如下重量份的菌种：
植物乳杆菌K254～6份、植物乳杆菌KC282～4份、植物乳酸杆菌D15011～3份、肠系膜明串珠菌SHU13960.5～1.5份。


2.权利要求1所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(a)将各菌种分别接种于培养基中进行扩大培养、离心，得到各菌种菌泥；
(b)将各菌种菌泥分别与保护剂混合制成菌悬液、冷冻干燥，得到各菌种的冻干粉；
(c)将各菌种冻干粉混合，得到所述复合菌剂。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中，所述培养基包括如下重量百分含量的组分：
碳源3％～5％、氮源3％～5％、增殖因子6％～12％、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾，余量为UMRS培养基，所述磷酸氢二钠和磷酸二氢钾的添加终浓度为0.05mol/L～0.2mol/L，并且磷酸氢二钠与磷酸二氢钾的摩尔比为1∶(12～13)；
当菌种为植物乳杆菌K25时，培养基中的碳源为质量比为1∶(1.5～2.5)的D-山梨醇和葡萄糖，氮源为质量比为3∶(3.5～4.5)的牛肉膏和胰蛋白胨，增殖因子为胡萝卜汁；
当菌种为植物乳杆菌KC28时，培养基中的碳源为质量比为1∶(0.9～1.1)的D-山梨醇和蔗糖，氮源为质量比为3∶(3.5～4.5)的牛肉膏和酵母浸粉，增殖因子为质量比为1∶(0.9～1.1)的胡萝卜汁和橙汁；
当菌种为植物乳酸杆菌D1501时，培养基中的碳源为质量比为1∶(0.9～1.1)的D-山梨醇和葡萄糖，氮源为质量比为3∶(4.5～5.5)的牛肉膏和胰蛋白胨，增殖因子为胡萝卜汁；
当菌种为肠系膜明串珠菌SHU1396时，培养基中的碳源为质量比为(1.5～2.5)∶1的蔗糖和葡萄糖，氮源为质量比为1∶(0.9～1.1)的牛肉膏和大豆蛋白胨，增殖因子为质量比为1∶(0.9～1.1)的柠檬汁和胡萝卜汁。


4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中，当菌种为植物乳杆菌K25...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵国芬，程旭恒，智超，冯洁，周俊文，
申请(专利权)人：内蒙古阿拉善游牧天地牧业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15