CD146及其在纤维化的诊断和治疗中作为生物标志物和治疗靶点的用途制造技术

本发明专利技术涉及医学领域，特别是涉及纤维化的诊断和治疗。更具体来说，本发明专利技术涉及CD146及其在纤维化的诊断中作为生物标志物和在纤维化的治疗中作为治疗靶点的用途。本发明专利技术还涉及在对象中检测对纤维化的易感性，诊断、预后和/或监测纤维化的组合物和方法。本发明专利技术还涉及用于在对象中预防或治疗纤维化的CD146抑制剂和包含CD146抑制剂的组合物，以及在诊断或治疗背景中的组合物、试剂盒及其用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD146及其在纤维化的诊断和治疗中作为生物标志物和治疗靶点的用途
本专利技术涉及医学领域，特别是涉及纤维化的诊断和治疗。更具体来说，本专利技术涉及CD146及其在纤维化的诊断中作为生物标志物和在纤维化的治疗中作为治疗靶点的用途。本专利技术还涉及在对象中检测对纤维化的易感性，诊断、预后和/或监测纤维化的组合物和方法。本专利技术还涉及用于在对象中预防或治疗纤维化的CD146抑制剂和包含CD146抑制剂的组合物，以及在诊断或治疗背景中的组合物、试剂盒及其用途。
技术介绍
纤维化是在修复性或反应性过程中在器官或组织中形成过多的纤维结缔组织。从生理学上讲，纤维化的作用是沉积结缔组织，这会消除下方器官或组织的体系结构和功能。由细胞外基质(ECM)蛋白的病理性积累所定义，纤维化引起瘢痕形成和受影响组织的增厚。它实质上是夸张的伤口愈合反应，干扰了正常的器官功能。组织变得更加僵硬并丧失功能。纤维化与瘢痕形成过程相似，因为两者都涉及受刺激的成纤维细胞铺放包括胶原蛋白和糖胺聚糖的结缔组织。当免疫细胞例如巨噬细胞释放刺激成纤维细胞的可溶性因子时，所述过程开始。表征最充分的促纤维化介导物是TGFβ，它由巨噬细胞以及任何受损的被称为间质的表面之间的组织释放。纤维化的其他已知可溶性介导物包括CTGF、血小板衍生生长因子(PDGF)和白介素4(IL-4)。自身免疫疾病也可导致纤维化。这个组织修复过程是复杂的，其中ECM的合成和降解的严格调控确保维持正常的组织体系结构。所述整个过程尽管是必需的，然而如果组织损伤是严重或重复性的，或者如果伤口愈合反应本身变得失调，则可能导致进行性的不可逆的纤维化反应。纤维化可发生在体内的器官和许多组织中，通常是炎症或损伤的结果，其实例包括心脏(心房纤维化、心内膜心肌纤维化、梗塞特别是陈旧性心肌梗塞)、肾脏(肾纤维化)、肝脏(肝硬化、胆道闭锁)、肺(进行性大块纤维化)、脑(胶质瘢痕)、动脉(动脉僵硬)、关节例如膝或肩(关节纤维化)、肠(克罗恩病)、手、手指(杜普伊特伦挛缩)、皮肤(瘢痕疙瘩、肾源性系统性纤维化)、纵隔软组织(纵隔纤维化)、腹膜后软组织(腹膜后纤维化)、骨髓(骨髓纤维化)等。肾小球疾病可以逐步或迅速导致肾纤维化和慢性肾病(CKD)。快速进行性或新月体性肾小球肾炎(GN)是一组罕见的肾脏疾病，作为显著炎症并伴有肾小球损伤和新月体出现的结果，它们可能会迅速发展至晚期肾衰竭(Mathieson,P，2007)。其他的肾区室也受到影响，包括肾小管间质，其表现出导致肾间质纤维化的炎症。这种结构性病变的功能性结果是肾功能的迅速恶化(Moeller,M.J，2013)。尽管几项主要是关于实验性GN的临床前模型的研究提供了关于炎症过程和随之而来的纤维化两方面的病理生理学进展，但对所述疾病的调控和进展的分子认识仍然有限，并且当前的治疗仍仅仅部分有效。心肌纤维化是对某些形式的心脏病例如心肌梗塞、某些心肌病或高血压做出响应而自发发生的一种创伤愈合过程。它的特征在于细胞外基质蛋白(纤连蛋白、I型和III型胶原蛋白)的沉积增加，并伴有参与基质降解的金属蛋白酶(MMP)的表达降低(Talman和Ruskoaho，2016)。这种组织积累造成受伤心脏的刚性增加和顺应性下降，心脏不仅丧失其收缩和松弛的能力，而且丧失其驱动固有心脏电活动的能力。所有这些变化最终导致患者发生心功能不全，从长远来看会导致心脏骤停(Chaturvedi等，2010)。心肌纤维化根据其在心肌中的位置分为两类：-“反应性/间质性”纤维化，其对应于纤维化扩展到心肌细胞之间的间隙空间中。这种类型的纤维化在衰老的背景下得到了更具体的描述(Chen和Frangogiannis，2010；Mays等，1991)。事实上，许多工作已显示，心脏衰老与变得肥大的心肌细胞的总数的减少以及心肌胶原蛋白沉积的显著增加相关。这些变化造成心脏顺应性下降，从而导致舒张功能障碍的建立而收缩功能得以保留(Biernacka和Frangogiannis，2011)，和-“修复性纤维化”，其是指对心脏病例如心肌梗塞做出响应的瘢痕组织形成(Weber，1989)。目前，控制心肌纤维化的有害过程的有效疗法很少。因此，寻找抑制或逆转这一过程的新疗法是重要的公共卫生问题。由于人口老龄化和心血管疾病风险因子(糖尿病、肥胖和高血压)的加重，伴有纤维化的病症的频率显著增加。到目前为止，尚无可用于检测纤维化的特异性生物标志物。量化纤维化的唯一方式是组织活检。同样，没有可用于治疗纤维化的治疗方法，特别是没有可以逆转纤维化过程的治疗方法。仍然缺少一种诊断和监测纤维化或确定患者是否具有发生纤维化的风险的简单可靠且特异性的测试，并且所述测试对于快速建立旨在保护或改善患者健康的预防和治疗策略具有很高价值。这是本专利技术的目的。
技术实现思路
本专利技术人在本文中首次将CD146鉴定为在纤维化的诊断中特别令人感兴趣的生物标志物以及在纤维化的治疗中有利的治疗靶点或治疗工具。因此，本文中描述了CD146蛋白，特别是选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6和SEQIDNO：7的可溶性CD146(sCD146)蛋白或SEQIDNO：8的I5-13可溶性CD146蛋白或SEQIDNO：9的I10可溶性CD146蛋白，它们在对象中通常作为生物标志物，用于对纤维化特别是心肌、肾、皮肤和/或肺纤维化的易感性的检测，用于所述纤维化的诊断和/或预后，或用于所述纤维化的监测。本文还描述了一种在对象中检测对纤维化特别是心肌、肾、皮肤或肺纤维化的易感性或诊断和/或预后所述纤维化的体外、离体或体内方法。这种方法通常包括确定所述对象的生物样品中CD146蛋白的表达水平，通常是可溶性CD146蛋白的表达水平，特别是选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6和SEQIDNO：7的可溶性CD146蛋白的表达水平、SEQIDNO：8的I5-13可溶性CD146蛋白的表达水平或SEQIDNO：9的I10可溶性CD146蛋白的表达水平的步骤。本文还描述了一种在对象中监测纤维化、优选为心肌或肾纤维化的体外、离体或体内方法。所述方法通常包括在两个或更多个时间点确定所述对象的生物样品中CD146蛋白的表达水平、特别是可溶性CD146蛋白的表达水平，所述可溶性CD146蛋白选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6和SEQIDNO：7，其中与较早时间点在所述对象的生物样品中获得的参比值相比在较晚时间点所述对象的生物样品中更高的可溶性CD146蛋白表达水平指示了所述对象中纤维化的增加，而更低的可溶性CD146蛋白水平指示了纤维化的减少，并且相等的可溶性CD146蛋白水平指示了在所述对象中纤维化没有进展。本文还描述了一种在对象中监测纤维化、特别是本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可溶性CD146蛋白，其选自SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ IDNO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：7，并在对象中对心肌或肾纤维化的易感性的检测中、心肌或肾纤维化的诊断和/或预后中或心肌或肾纤维化的监测中用作生物标志物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180926 EP 18306253.81.一种可溶性CD146蛋白，其选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6和SEQIDNO：7，并在对象中对心肌或肾纤维化的易感性的检测中、心肌或肾纤维化的诊断和/或预后中或心肌或肾纤维化的监测中用作生物标志物。


2.SEQIDNO：8的I5-13可溶性CD146蛋白或SEQIDNO：9的I10可溶性CD146蛋白，其在对象中对纤维化的易感性的检测中、纤维化的诊断和/或预后中或纤维化的监测中用作生物标志物。


3.一种在对象中检测对心肌或肾纤维化的易感性或诊断和/或预后心肌或肾纤维化的体外或离体方法，所述方法包括确定所述对象的生物样品中可溶性CD146蛋白的表达水平的步骤，其中所述可溶性CD146蛋白选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6和SEQIDNO：7。


4.根据权利要求3所述的方法，其中所述方法包括下述步骤：i)确定所述对象的生物样品中可溶性CD146蛋白的表达水平，所述可溶性CD146蛋白选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6和SEQIDNO：7，ii)将步骤i)中确定的表达水平与参比值进行比较，以及iii)当步骤i)中确定的水平高于所述参比值时，得出所述对象对心肌或肾纤维化具有易感性、患有心肌或肾纤维化或具有不良预后的结论，或者当步骤i)中确定的水平低于所述参比值时，得出所述患者对心肌或肾纤维化没有易感性、未患心肌或肾纤维化或具有良好预后的结论。


5.一种在对象中检测对纤维化的易感性或诊断和/或预后纤维化的体外或离体方法，所述方法包括确定所述对象的生物样品中SEQIDNO：8的I5-13可溶性CD146蛋白或SEQIDNO：9的I10可溶性CD146蛋白的表达水平的步骤。


6.根据权利要求5所述的方法，其中所述方法包括下述步骤：i)确定所述对象的生物样品中I5-13可溶性CD146蛋白的表达水平，ii)将步骤i)中确定的表达水平与参比值进行比较，以及iii)当步骤i)中确定的水平高于所述参比值时，得出所述对象对纤维化具有易感性、患有纤维化或具有不良预后的结论，或者当步骤i)中确定的水平低于所述参比值时，得出所述患者对纤维化没有易感性、未患纤维化或具有良好预后的结论。


7.根据权利要求5所述的方法，其中所述方法包括下述步骤：i)确定所述对象的生物样品中I10可溶性CD146蛋白的表达水平，ii)将步骤i)中确定的表达水平与参比值进行比较，以及iii)当步骤i)中确定的水平低于所述参比值时，得出所述对象对纤维化具有易感性、患有纤维化或具有不良预后的结论，或者当步骤i)中确定的水平高于所述参比值时，得出所述患者对纤维化没有易感性、未患纤维化或具有良好预后的结论。


8.一种在对象中监测心肌或肾纤维化的体外或离体方法，所述方法包括在两个或更多个时间点确定所述对象的生物样品中可溶性CD146蛋白的表达水平，所述可溶性CD146蛋白选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6和SEQIDNO：7，其中与较早时间点在所述对象的生物样品中获得的参比值相比在较晚时间点所述对象的生物样品中更高的可溶性CD146蛋白表达水平指示了所述对象中纤维化的增加，而更低的可溶性CD146蛋白水平指示了纤维化的减少，并且相等的可溶性CD146蛋白水平指示了在所述对象中纤维化没有进展。


9.一种在对象中监测纤维化的体外或离体方法，所述方法包括在两个或更多个时间点确定所述对象的生物样品中SEQIDNO：8的I5-13可溶性CD146蛋白的表达水平，其中与较早时间点在所述对象的生物样品中获得的参比值相比在较晚时间点所述对象的生物样品中更高的可溶性CD146蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：奥雷利·勒鲁耶，马塞尔·布罗特查宝德，克里斯托斯·查德吉希里斯托斯，纳萨莉·巴丁，弗朗索瓦丝·迪格纳特杰奥尔杰，亚历山德里纳·伯托德，本杰明·吉列特，克里斯托夫·蒂默曼，纪尧姆·哈奇，
申请(专利权)人：公共事业救济局马赛医院，法国国家卫生及研究医学协会，艾克斯马赛大学，伦敦玛丽女王大学，索邦大学，
类型：发明
国别省市：法国;FR