一种防尿液样本造假的氯胺酮检测卡及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及生物检测技术领域，具体涉及一种防尿液样本造假的氯胺酮检测卡及其制备方法与应用。本发明专利技术的氯胺酮检测卡包括温度感应区、氯胺酮检测区和尿液性质检测区；其中，温度感应区用于检测尿液温度，氯胺酮检测区用于检测氯胺酮的含量，尿液性质检测区用于检测尿液的理化性质；该检测卡能够同时实现尿液样本中氯胺酮含量的检测和尿液样本是否经稀释等造假的检测，且对于尿液样本的造假检测和对于氯胺酮的含量检测均具有较高的特异性和灵敏度，能够有效防止因尿液样本经稀释等造假而导致的漏检，提高氯胺酮检测的准确性，在氯胺酮检测中具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种防尿液样本造假的氯胺酮检测卡及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物检测
，具体涉及一种防尿液样本造假的氯胺酮检测卡及其制备方法与应用。
技术介绍
氯胺酮为白色粉末状物质，相对分子质量238，存在两种异构体：左旋结构和右旋结构。左旋氯胺酮常被作为外科手术麻醉剂，右旋氯胺酮具有兴奋及致幻作用。氯胺酮滥用对人体产生的毒副作用主要集中在中枢神经、呼吸系统、消化系统及循环系统。刺激中枢系统表现为幻觉、躁动、惊厥等。刺激呼吸系统表现为呼吸抑制、支气管或喉部痉挛。刺激消化系统产生呕吐、恶心、腹胀、胃出血等。刺激循环系统表现为心率加快、血压升高。因此，氯胺酮滥用者吸食氯胺酮后会产生梦境、幻觉以及恶心呕吐；服用剂量过大会出现意识模糊、呼吸抑制、四肢抽搐甚至呼吸停止等现象，严重者致人死亡；长期滥用氯胺酮会引起失忆、认知功能障碍和其他精神疾病。氯胺酮及其代谢产物可经由尿液排出体外。氯胺酮的检测方法主要有色谱法(液质联用、气质联用、高效液相和毛细管电泳法)、酶联免疫吸附(ELisa)法、胶体金法。色谱法具有重复性好、灵敏度高、能够定量检出等优点，是毒品检测的金标准，但因其操作过程繁琐，检测成本高，不适宜作为常规检测手段。Elisa是氯胺酮检测常用的方法，具有灵敏度高，成本低，操作简单等优点，但是此种方法整个检测过程需要2-3小时，无法满足现场快检的需求。胶体金免疫层析法具有操作简单，十分钟内就能进行结果判读，得出检测结果，无需配套设备，试剂保存简单，检测成本低等优点，已成为氯胺酮现场快检的理想方式。现有氯胺酮快速检测卡(胶体金法)的组成及检测原理如下：依次将吸水垫、喷有氯胺酮-BSA抗原(检测线)和羊抗鼠二抗(质控线)的Nc膜、喷有氯胺酮抗体的金标垫和样品吸收垫相互叠搭固定在反应支持板上，再裁切成试纸条，装入塑料模块中，制得氯胺酮测定检测卡。向加样孔中加入待检尿样，层析过程开始，金标垫上的金纳米标记的氯胺酮抗体得以释放，样本中的氯胺酮会与检测线的氯胺酮-BSA抗原竞争结合胶体金标记的氯胺酮抗体，使得检测线的显色反应为淡色或无色，未结合的金纳米标记的氯胺酮抗体颗粒会与质控线处的羊抗鼠二抗结合，发生显色反应，通过目测得到检测结果，实现样品中毒品的快速检出。然而，在实际检测过程中，将疑似吸毒人员的尿液样本进行检测时，若是吸毒人员将自身的尿液样本通过稀释或调包等造假方式逃避检查，将会对检测结果的准确度造成影响。而现有的氯胺酮快速检测卡(胶体金法)虽然能够实现快速检测，但是无法有效避免因可疑吸毒人员对尿液样本进行稀释、调包等造假而带来的漏检。因此，开发一种防尿液样本造假的氯胺酮快速检测卡具有重要意义。
技术实现思路
为解决现有技术中存在的技术问题，本专利技术的目的在于提供一种能够同时检出尿液样本是否造假和其中氯胺酮含量的检测卡，本专利技术的另一目的在于提供该检测卡的制备方法及其应用。为实现上述目的，本专利技术创造性地引入尿液温度感应区和尿液性质检测区。其中，尿液温度感应区可通过检测尿液温度判断尿液样本是否经过稀释等掺假或调包，尿液性质检测区可通过检测尿液的标志性理化指标判断尿液样本是否经过稀释等掺假，两者结合可实现功能互补和配合，有效提高尿液样本造假的检出率。进一步通过对尿液温度感应区、尿液性质检测区和氯胺酮检测区进行优化，有效避免各检测区之间的相互干扰，在保证对尿液样本造假检测的特异性和灵敏度的同时，保证了氯胺酮检测的特异性和灵敏度。具体地，本专利技术的技术方案如下：首先，本专利技术提供一种氯胺酮检测卡，其包括温度感应区和反应区；所述反应区包括氯胺酮检测区和尿液性质检测区；其中，所述温度感应区用于检测尿液样本的温度；所述氯胺酮检测区用于检测尿液样本的氯胺酮的含量；所述尿液性质检测区用于检测尿液样本的理化性质，所述尿液的理化性质为选自尿微量白蛋白、尿肌酐、尿钙、蛋白质、白细胞、潜血/隐血、葡萄糖、酮体、尿胆原、比重、胆红素、酸碱度、维生素C、亚硝酸盐中的一种或多种。利用所述氯胺酮检测卡对尿液样本进行检测，根据氯胺酮检测区的检测结果，判断尿液样本中氯胺酮的含量；根据温度感应区和尿液性质检测区的检测结果，判断待检测尿液样本是否造假。本专利技术中，所述尿液理化性质的检测指标具体可为：尿肌酐，或为尿肌酐和尿钙。本专利技术通过大量研究和实践，确定了相对更适用于与温度感应区互补配合的尿液理化性质检测指标，优选为尿肌酐含量或为尿肌酐和尿钙含量。上述理化性质指标配合温度感应能够更好地提高尿液样本造假检测的灵敏度和特异性。为更好地保证检测的快速便捷性，所述氯胺酮检测区为免疫层析检测区。优选为胶体金免疫层析。通过对各检测区的位置关系进行设计和优化，有利于减少各区之间检测的相互干扰，作为优选，所述检测卡的结构为：所述温度感应区设置独立的加样区；所述氯胺酮检测区与所述尿液性质检测区共用一个加样区，沿尿液样本层析方向依次为所述氯胺酮检测区和所述尿液性质检测区。作为优选，本专利技术的氯胺酮检测卡的结构具体如下：所述温度感应区包含感温变色塑料；所述尿液性质检测区包含尿液性质检测块；所述尿液性质检测块固定有用于检测尿液理化性质的反应液。所述感温变色塑料的消色温度区间优选为33℃～37℃。作为本专利技术的一种优选方案，所述检测卡包括背衬以及沿所述检测卡的长轴一端到另一端依次粘贴在所述背衬上的感温变色塑料、样品垫、结合物释放垫、氯胺酮反应膜、吸收垫和尿液性质检测块；所述样品垫、结合物释放垫、氯胺酮反应膜、吸收垫和尿液性质检测块中任意相邻两个均部分搭接。所述感温变色塑料无需搭接直接贴于背衬。所述结合物释放垫包被有标记的氯胺酮抗体；所述氯胺酮反应膜固定有氯胺酮抗原和二抗；所述氯胺酮抗原和二抗分别形成检测线和质控线；所述检测线靠近所述结合物释放垫，所述质控线靠近所述吸收垫。作为优选，所述感温变色塑料与所述样品垫之间设有2～4mm的间距；结合物释放垫的1/3-1/2被覆盖于样品垫下。作为优选，所述检测线与所述质控线相互平行且与所述检测卡的长轴方向垂直。可选地，将所述检测卡包装于卡壳中，在所述感温变色塑料的对应位置设有一个加样孔；所述样品垫的对应位置设有一个加样孔。所述检测卡还可设有2个可视观察窗口，分别位于检测线和质控线的对应位置以及尿液性质检测块的对应位置。在温度感应区中通过使用能够感应温度并发生颜色变化的可逆温致变色材料，能够简单快速地判断尿液的温度范围。所述感温变色塑料由包括可逆温致变色复配物的原料制备得到；所述可逆温致变色复配物包括如下重量份的组分：隐色剂：热敏玫红或结晶紫内酯0.3～0.8份；显色剂：双酚A或对羟基苯甲酸苄酯2～5份；溶剂：十四醇25～35份。在温度感应区中采用该可逆温致变色复配物，可更好地与尿液性质检测区配合实现尿液样本的造假检测，同时不影响氯胺酮检测区的检测。作为本专利技术的一种优选方案，所述隐色剂、显色剂和溶剂的质量比为1:6:60。所述可逆温致变色复配物的制备原料还包括塑料原料；所述制备原料中，所述可逆温致变色复配物的质量百分比为20％～30％。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氯胺酮检测卡，其特征在于，包括温度感应区和反应区；所述反应区包括氯胺酮检测区和尿液性质检测区；所述温度感应区用于检测尿液样本的温度；所述氯胺酮检测区用于检测尿液样本的氯胺酮的含量；所述尿液性质检测区用于检测尿液样本的理化性质，所述理化性质为选自尿微量白蛋白、尿肌酐、尿钙、蛋白质、白细胞、潜血/隐血、葡萄糖、酮体、尿胆原、比重、胆红素、酸碱度、维生素C和亚硝酸盐中的一种或多种。/n

【技术特征摘要】
1.一种氯胺酮检测卡，其特征在于，包括温度感应区和反应区；所述反应区包括氯胺酮检测区和尿液性质检测区；所述温度感应区用于检测尿液样本的温度；所述氯胺酮检测区用于检测尿液样本的氯胺酮的含量；所述尿液性质检测区用于检测尿液样本的理化性质，所述理化性质为选自尿微量白蛋白、尿肌酐、尿钙、蛋白质、白细胞、潜血/隐血、葡萄糖、酮体、尿胆原、比重、胆红素、酸碱度、维生素C和亚硝酸盐中的一种或多种。


2.根据权利要求1所述的氯胺酮检测卡，其特征在于，所述理化性质为尿肌酐，或为尿肌酐和尿钙。


3.根据权利要求1或2所述的氯胺酮检测卡，其特征在于，所述氯胺酮检测区为免疫层析检测区；所述温度感应区设置独立的加样区；所述氯胺酮检测区与所述尿液性质检测区共用一个加样区，沿尿液样本层析方向依次为所述氯胺酮检测区和所述尿液性质检测区；
优选地，所述温度感应区包含感温变色塑料；所述尿液性质检测区包含尿液性质检测块；所述尿液性质检测块固定有用于检测尿液理化性质的反应液；
更优选地，所述检测卡包括背衬以及沿所述检测卡的长轴一端到另一端依次粘贴在背衬上的感温变色塑料、样品垫、结合物释放垫、氯胺酮反应膜、吸收垫和尿液性质检测块；样品垫、结合物释放垫、氯胺酮反应膜、吸收垫和尿液性质检测块中任意相邻两个均部分搭接；
所述结合物释放垫包被有标记的氯胺酮抗体；所述氯胺酮反应膜固定有氯胺酮抗原和二抗；所述氯胺酮抗原和二抗分别形成检测线和质控线；所述检测线靠近所述结合物释放垫，所述质控线靠近所述吸收垫。


4.根据权利要求3所述的氯胺酮检测卡，其特征在于，所述感温变色塑料由包括可逆温致变色复配物的原料制备得到；所述可逆温致变色复配物包括如下重量份的组分：隐色剂：热敏玫红或结晶紫内酯0.3～0.8份；显色剂：双酚A或对羟基苯甲酸苄酯2～5份；溶剂：十四醇25～35份。


5.根据权利要求3或4所述的氯胺酮检测卡，其特征在于，所述用于检测尿液理化性质的反应液包括酶底物和色原；所述酶底物包括如下酶活单位份数的组分：肌酸酶5～20份，过氧化物酶5～20份，肌酐酶5～20份，肌氨酸氧化酶15～60份；
所述色原为4-氨基安替比林以及选自N-乙基-N(2-羟基-3-丙磺基)-3,5-二甲基苯胺钠、苯酚、对氯酚、对羟基苯甲酸和3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠中的一种；
优选地，所述用于检测尿液理化性质的反...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴国华，
申请(专利权)人：戴国华，
类型：发明
国别省市：北京;11