一种鲎试剂冻干微球及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种鲎试剂冻干微球及其制备方法和应用。所述鲎试剂冻干微球包括鲎的阿米巴细胞提取物和活性剂，所述活性剂包括聚乙烯吡咯烷酮、乳糖、甘露醇、棉子糖、聚乙二醇和甘氨酸。各组分间相互配合，促进鲎试剂成型，并提高成型后硬度，同时保护预冷期、冻干期以及储存期鲎试剂的活性，从而使得鲎试剂冻干微球硬度高、表面光滑不易破碎掉屑，且稳定性高，便于后续进行自动化或者手动分装、保存。保存。

【技术实现步骤摘要】
一种鲎试剂冻干微球及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物制品冷冻
，涉及一种鲎试剂冻干微球及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]鲎试剂是由海洋生物鲎的血液阿米巴细胞的提取物制成的生物监测试剂，鲎试剂含有能被细菌内毒素(脂多糖)和真菌葡聚糖激活的C因子、B因子、G因子、凝固酶原和凝固蛋白原等，能够准确、快速地定性或定量检测样品中是否含有细菌内毒素和(1,3)
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β
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D
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葡聚糖。
[0003]目前，鲎试剂广泛用于制药、临床以及科研等领域，用于细菌内毒素和真菌葡聚糖检测，但鲎试剂在液体状态下不稳定、易污染，目前市面上的鲎试剂均采用常规的真空冷冻干燥处理后进行保存和运输，如CN102901726A公开了血液细菌内毒素检测试剂盒的制备和应用，其中涉及一种特异性鲎试剂及其制备方法，所述制备方法包括采血、分离细胞、裂解细胞、分离细胞壁、加促活剂和G因子抑制剂配制半成品，再经灌装、冷冻干燥和封口，制得特异性鲎试剂成品；CN1621841公开了一种抗干扰鲎试剂的制备工艺，所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鲎试剂冻干微球，其特征在于，所述鲎试剂冻干微球包括鲎的阿米巴细胞提取物和活性剂；所述活性剂包括聚乙烯吡咯烷酮、乳糖、甘露醇、棉子糖、聚乙二醇和甘氨酸。2.根据权利要求1所述的鲎试剂冻干微球，其特征在于，所述活性剂还包括鲎三肽。3.一种如权利要求1或2所述的鲎试剂冻干微球的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)将鲎的阿米巴细胞进行破碎处理，随后离心并萃取，得到阿米巴细胞提取物；在水中将聚乙烯吡咯烷酮、乳糖、甘露醇、棉子糖、聚乙二醇、甘氨酸、任选地鲎三肽混合，得到活性剂溶液；(2)将所述阿米巴细胞提取物和所述活性剂溶液混合，得到混合液；(3)利用滴珠机将所述混合液滴入液氮中，冷冻成微球，随后进行预冻和冷冻干燥，得到所述鲎试剂冻干微球。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述活性剂溶液包括5～10％聚乙烯吡咯烷酮、2～5％乳糖、5～10％甘露醇、1～5％棉子糖、0.2～1％聚乙二醇、0.5～1mg/mL甘氨酸和0～0.8mg/mL鲎三肽。5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述混合液中阿米巴细胞提取物和活性剂溶液的体积比为(1～5):1。6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述预冻的温度为
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60～
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45℃。7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述预冻的时间大于4h。8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述冷冻干燥包括以下步骤：(1
’
)于
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45～
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25℃、真空度为160～200ubar，将预冻后的微球保存8～12h；...

【专利技术属性】
技术研发人员：王保学，钱芃橙，苗苗，刘凯，刘浩宇，
申请(专利权)人：丹娜天津生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：