一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法技术

本发明专利技术涉及文物检测技术领域，本发明专利技术公开了一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法，包括：1）制备胶体金溶液；2）取牛胶原蛋白抗体用PBS缓冲液稀释；3）将牛胶原蛋白抗体溶液滴加至胶体金溶液中搅拌；4）加入BSA溶液，搅拌；5）加入PEG‑20000溶液，搅拌；6）离心处理，弃上清液；7）沉淀物用含BSA、叠氮钠溶液的PBS缓冲液重悬；8）用喷金划膜机将胶体金标记的抗体喷涂到金标垫上，制备金标垫；9）用喷金划膜机将牛胶原蛋白抗原和质控线抗体划到硝酸纤维素膜上形成检测线和质控线；10）组装成胶体金免疫层析试纸条。本发明专利技术的试纸条检测方法简单快速，可以用于考古现场的快速检测。

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法
本专利技术涉及文物检测
，尤其涉及一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法
技术介绍
中国古代绘画在文化艺术发展的过程中的重要性不言而喻，因此研究绘画对于文化传播、绘画艺术鉴赏是十分有必要的，中华文化底蕴深厚，不同时期的绘画作品中所呈现的文化底蕴、时代特征、民俗风气、政治特征都为我们研究艺术中的时代信息提供了巨大的帮助。国内考古学家从古代绘画样本中鉴定出几个有机粘合剂分别为卵清蛋白、动物胶、牛奶和鱼胶。有利于我们检测识别各朝文物以及为我们后续对古代绘画样本的修复和保存提供了有效的信息。胶体金免疫层析技术是一种将抗原抗体免疫反应与胶体金标记示踪技术结合用于抗原、抗体含量定性定量检测的技术。该方法与常用的分析检测技术，如傅里叶红外光谱，拉曼光谱，X-衍射分析、质谱相比，对微痕迹类文物残留物进行分析时，更快速简单高效、灵敏度高、特异性强。但是目前在检测文物中粘合剂成分中还尚未有见应用报道。
技术实现思路
本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于包括以下步骤：/n1）取超声后分散均匀的胶体金8-12ml，加入碳酸钾溶液调节pH为8.0~9.0；/n2）取牛胶原蛋白抗体用PBS缓冲液稀释至浓度为10~20ug/ml；/n3）将所得牛胶原蛋白抗体溶液以25-35滴/min的速度滴加至步骤1）所得胶体金溶液中，室温匀速搅拌45~60min；/n4）向步骤3）所得溶液中加入BSA溶液至其终浓度为0.3-0.5wt%，进行蛋白的封闭，继续搅拌5-15min；/n5）向步骤4）所得溶液中加入PEG-20000溶液至终浓度为0.15-0.25wt%，继续搅拌5-15...

【技术特征摘要】
1.一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）取超声后分散均匀的胶体金8-12ml，加入碳酸钾溶液调节pH为8.0~9.0；
2）取牛胶原蛋白抗体用PBS缓冲液稀释至浓度为10~20ug/ml；
3）将所得牛胶原蛋白抗体溶液以25-35滴/min的速度滴加至步骤1）所得胶体金溶液中，室温匀速搅拌45~60min；
4）向步骤3）所得溶液中加入BSA溶液至其终浓度为0.3-0.5wt%，进行蛋白的封闭，继续搅拌5-15min；
5）向步骤4）所得溶液中加入PEG-20000溶液至终浓度为0.15-0.25wt%，继续搅拌5-15min；
6）将步骤5）所得溶液离心处理，弃上清液；
7）沉淀物用含0.8-1.2wt%BSA、0.03-0.05wt%叠氮钠溶液的PBS缓冲液重悬进行防腐处理，冷藏备用；
8）用喷金划膜机将步骤7）所得胶体金标记的抗体喷涂到金标垫上，制备金标垫；
9）用喷金划膜机将牛胶原蛋白抗原和质控线抗体划到硝酸纤维素膜上形成检测线和质控线；
10）组装成胶体金免疫层析试纸条。

【专利技术属性】
技术研发人员：王秉，闫琳，马维维，彭志勤，万军民，
申请(专利权)人：浙江理工大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33