一种双层微流控芯片、包含该芯片的乳腺癌miRNA检测试剂盒及制备方法、检测方法技术

本发明专利技术属于核酸检测技术领域，涉及一种用于核酸检测的双层微流控芯片、包含该芯片的检测试剂盒及其制备方法、检测方法。一种双层微流控芯片，包括上层的阀门控制层、中间的流道层和功能化基底，所述流道层设有微腔、与所述微腔连接的微流道、以及进样口和出样口；所述的阀门控制层包括控制阀、与所述控制阀连接的阀门进样口；所述功能化基地分为检测区和反应区，所述检测区与所述微腔对应，所述反应区与所述微流道对应。本发明专利技术还提供一种乳腺癌miRNA检测试剂盒。本发明专利技术的双层微流控芯片结构简单、易于制备，采用该芯片和试剂盒对乳腺癌miRNA检测进行检测，耗时短、步骤简单、灵敏度高、检测样品需求量少，能够实现乳腺癌miRNA的快速、高效检测。

【技术实现步骤摘要】
一种双层微流控芯片、包含该芯片的乳腺癌miRNA检测试剂盒及制备方法、检测方法
本专利技术属于核酸检测
，涉及一种用于核酸检测的双层微流控芯片、包含该芯片的检测试剂盒及其制备方法、检测方法。
技术介绍
乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤之一，严重影响女性的生命健康安全，其发病率呈现上升并且具有年轻化的趋势。2011年最新调查发现，乳腺癌在影响全球女性恶性肿瘤死亡率方面位居首位。由于乳腺癌初期表现症状不明显，多数病人就诊时已经发展到中晚期，而乳腺癌的早期诊断在缓解病人后续治疗痛苦及延长患者生命时间等方面具有重要价值。因此，提高乳腺癌早期检测水平，探索良好的早期诊断指标具有重要意义。传统意义上，对于乳腺癌的早期诊断主要采用Qrt-PCR技术、蛋白免疫印迹等，这些方法具有低的检测灵敏度、长的时间消耗以及高的样本消耗等不足，因此很少被应用于临床癌症的早期诊断。MiRNA是一种长度在19-23bp非编码蛋白的单链RNA，参与动植物内转录后基因的表达调控，在动植物中起重要的调节作用。许多研究表明miRNA在生物体内可以参与不同的生物过程，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双层微流控芯片，其特征在于：包括上层的阀门控制层、中间的流道层和功能化基底，所述流道层设有微腔、与所述微腔连接的微流道、以及进样口和出样口；所述的阀门控制层包括控制阀、与所述控制阀连接的阀门进样口；所述功能化基底分为检测区和反应区，所述检测区与所述微腔对应，所述反应区与所述微流道对应。/n

【技术特征摘要】
1.一种双层微流控芯片，其特征在于：包括上层的阀门控制层、中间的流道层和功能化基底，所述流道层设有微腔、与所述微腔连接的微流道、以及进样口和出样口；所述的阀门控制层包括控制阀、与所述控制阀连接的阀门进样口；所述功能化基底分为检测区和反应区，所述检测区与所述微腔对应，所述反应区与所述微流道对应。


2.根据权利要求1所述的双层微流控芯片，其特征在于：所述的反应区修饰有纳米氧化石墨烯或纳米石墨烯材料，检测区修饰多聚赖氨酸。


3.根据权利要求2所述的双层微流控芯片，其特征在于：所述的反应区固定有检测探针。


4.根据权利要求3所述的双层微流控芯片，其特征在于：所述控制阀包括微腔控制阀和微流道控制阀，所述微腔控制阀设置在所述微腔的入口处，所述的微流道控制阀设置在所述微流道和出样口之间。


5.一种乳腺癌miRNA检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括1-4任一项所述的双层微流控芯片、乳腺癌miRNA标准品和荧光标记的miRNA探针。


6.根据权利要求5所述的乳腺癌miRNA检测试剂盒，其特征在于：所述的乳腺癌miRNA标准品分别是以乳腺癌标志物miR-125、miR-126、miR-155、miR-191、miR-21为模板合成的产物。


7.根据权利要求6所述的根据权利要求5所述的乳腺癌miRNA检测试剂盒，其特征在于：还包括稀释试剂，所述的稀释试剂包括1MTEBuffer和RNA保护液，用于对乳腺癌miRNA标准品或探针进行稀释。...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩琳，褚玉金，张宇，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37