番茄SlZHD10基因及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种番茄SlZHD10基因及其应用，其序列如SEQ ID NO：1所示；其编码的蛋白序列如SEQ ID NO：2所示。还包含番茄SlZHD10基因用于构建SlZHD10番茄基因组编辑材料的应用，该材料能提高种子萌发率。通过本发明专利技术，本发明专利技术首次构建了SlZHD10番茄基因组编辑材料，并进行功能研究，发现该基因在种子萌发过程中起调控作用。控作用。控作用。

【技术实现步骤摘要】
番茄SlZHD10基因及其应用


[0001]本专利技术涉及一种番茄SlZHD10基因及其应用，属于生物


技术介绍

[0002]种子是园艺生产的重要基础，种子的质量直接影响农业生产的进行。番茄（Solanum lycopersicumL.）是世界范围内广泛种植的重要蔬菜作物，而我国的番茄种植面积和产量都位居世界前列。我国的番茄生产通常采用穴盘育苗和设施栽培，对种子的萌发率有较高的要求，种子萌发率低会导致出苗不整齐和用种量的提高，从而延迟栽种计划和增加生产成本。因此，提高番茄种子的萌发率对农业生产具有重要意义。
[0003]番茄SlZHD10基因编码的蛋白属于锌指同源域（ZHD，zinc finger
‑
homodomain）转录因子家族，已有研究表明，该家族蛋白在植物生长发育和胁迫响应中发挥重要作用，但还没有其参与调控番茄种子萌发的报道。
[0004]CRISPR/Cas9是一种简单易行且成本较低的基因编辑技术，通过靶点的精准修饰，可以定向改良植物性状，从而加速育种进程。然而，目前还没有通过CRISPR/Cas9技术敲除SlZHD10基因，从而提高番茄种子萌发率的方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于针对上述问题，提供一种番茄SlZHD10基因及其应用，本专利技术提供了番茄SlZHD10基因（序列如SEQ ID NO：1所示）及其编码蛋白（序列如SEQ ID NO：2所示），和SlZHD10基因组编辑材料在提高种子萌发率中的应用。
[0006]一种番茄SlZHD10基因，其特征在于：其序列如SEQ ID NO：1所示，SEQ ID NO：1为：ATGGAACACAGAGGCCAAGAAAAGGATATGGGCTTGCCTAATCCCAATCCCATGAGTTATAACCCATCTCAACTTAACCAGCAAGAATCATCTTCCTCTGCAGCAAACAAGTTCCTTACCGCACCAAATAGAACAACAAATGAACATGAGAATACCATTTTTAGCCCTAACCAAACCCTAGATCAGCATAATATTACTCAAAATTCAGATCCAGATCCAGTTCGACAACTATCTACTAGTTCAGCAAGTGAGAGGAATATTACCCCCGTCCGGTACAAAGAATGTCTCAAAAATCATGCTGCAAATTTGGGAGGATATGTACTAGACGGTTGCGGAGAATTCATGCCAAGCGGAGAAGAGGAGACACTAGAATACCTGAAATGTGCAGCTTGTGATTGTCACCGCAATTTTCATAGGAAAGAGACTGAGGACGAATCACAAACACCTGGTGTGCATAGAAATAACCACCGTATACCCAACCAAACTCCGCCTTCTCTTCCAGCTGTGCCTACGCAGCAACAACACCATCATAAATACCCTCACAGCTATCCAAGAGGTCACATGGCACCAGTAATGATGAGTTTCGGCGGGAACACGGGAGTTGCAGCTGAATCATCAAGTGAAGATCTGAATATGTTTCACGGAGGACAAGGGGTAATTCAGCCTTGTAATTTTTCGGCATCGAAGAAGAGATTTCGAACGAAATTCAGTCAACAACAGAAAGATAGAATGCTAGAGTTCGCTGAGAAACTGGGATGGAGAATTCAGAAACAAGATGAACAAGAAGTGCATCAATTTTGTAATGAAGTGGGCGTGAAGAGACAAGTGTTCAAAGTGTGGATGCACAACAGCAAACAAGCAACCAAGAAGAAACAAAATTAA其编码的蛋白序列如SEQ ID NO：2所示，SEQ ID NO：2为：MEHRGQEKDMGLPNPNPMSYNPSQLNQQESSSSAANKFLTAPNRTTNEHENTIFSPNQTLDQHNITQNS
Green PCR Master Mix（Takara，Japan）于实时荧光定量PCR仪（CFX96，Bio
‑
Rad，USA）进行分析。使用番茄SlTIP41为内参基因，基因相对表达量采用2
‑△△
CT
方法计算。实时定量PCR引物为qRT
‑
SlTIP41
‑
F：TCAGTGGGAGGATTGTAAGG（SEQ ID No.14），qRT
‑
SlTIP41
‑
R：GGTTCTTTAGACGCCAATGC（SEQ ID No.15），qRT
‑
S1ZHD10
‑
F：ATCCAGATCCAGTTCGACAA（SEQ ID No.16），qRT
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S1ZHD10
‑
R：ATCACAAGCTGCACATTTCA（SEQ ID No.17）。结果如图2c所示，SlZHD10的表达量呈逐渐下降的趋势，这进一步说明了番茄SlZHD10基因负向调控种子萌发。
[0018]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建番茄SlZHD10突变体，对SlZHD10基因进行功能研究。本专利技术通过实验证明，番茄SlZHD10基因编辑材料的种子在正常条件下及NaCl胁迫下的萌芽率显著高于野生型番茄种子，说明SlZHD10基因在番茄种子萌发的过程发挥负向调控作用。SlZHD10基因新功能的发现为创制高萌发率的番茄种质材料提供了依据，具有良好的应用前景。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种番茄SlZHD10基因，其特征在于：其序列如SEQ ID NO：1所示，SEQ ID NO：1为：ATGGAACACAGAGGCCAAGAAAAGGATATGGGCTTGCCTAATCCCAATCCCATGAGTTATAACCCATCTCAACTTAACCAGCAAGAATCATCTTCCTCTGCAGCAAACAAGTTCCTTACCGCACCAAATAGAACAACAAATGAACATGAGAATACCATTTTTAGCCCTAACCAAACCCTAGATCAGCATAATATTACTCAAAATTCAGATCCAGATCCAGTTCGACAACTATCTACTAGTTCAGCAAGTGAGAGGAATATTACCCCCGTCCGGTACAAAGAATGTCTCAAAAATCATGCTGCAAATTTGGGAGGATATGTACTAGACGGTTGCGGAGAATTCATGCCAAGCGGAGAAGAGGAGACACTAGAATACCTGAAATGTGCAGCTTGTGATTGTCACCGCAATTTTCATAGGAAAGAGACTGAGGACGAATCACAAACACCTGGTGTGCATAGAAATAACCACCGTATACCCAACCAAACTCCGCCTTCTCTTCCAGCTGTGCCTACGCAGCAACAACACCATCATAAATACCCTCACAGCTATCCAAGAGGTCACATGGCACCAGTAATGATGAGTTTCGGCGGGAACACGGG...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱红梅，全珠玲，祁典，蔡丛希，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：