一种人脐血或骨髓造血干细胞体外诱导扩增蜕膜样自然杀伤细胞的方法技术

本申请公开了从造血干细胞体外诱导扩增蜕膜样自然杀伤细胞的方法，包括：将CD34

【技术实现步骤摘要】
一种人脐血或骨髓造血干细胞体外诱导扩增蜕膜样自然杀伤细胞的方法


[0001]本申请属于生物医药
，具体而言，涉及将脐血(Cord blood,CB)来源或自体骨髓(Bone marrow,BM)来源的CD34
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造血干细胞(Hematopoietic stem cells,HSC)体外诱导扩增，获得蜕膜样自然杀伤(Natural killer，NK)细胞的方法。

技术介绍

[0002]胎儿作为母体的一种半同种移植物，妊娠过程中胚胎能够逃避母体免疫系统的排斥反应是妊娠建立的前提。随着滋养层细胞的入侵，子宫内膜的蜕膜化逐渐完成，形成母体和胎儿相互作用的母胎界面。早孕时期,免疫细胞约占母胎界面蜕膜组织的30％，其中蜕膜自然杀伤(decidual natural killer，dNK)细胞大量存在，所占比例高达70％。
[0003]NK细胞作为母胎界面主体免疫细胞，承担着重要生理功能。与外周血NK(peripheral blood NK,pNK)细胞相比，dNK细胞具有独特的表型和功能，即表现为CD56
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从造血干细胞体外诱导扩增蜕膜样自然杀伤细胞的方法，包括：将CD34
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造血干细胞在体外进行四个阶段的培养，其中阶段I为CD34
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造血干细胞的扩增，阶段II为诱导CD34
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造血干细胞向NK细胞前体的分化，阶段III为诱导NK细胞前体向NK细胞的分化，阶段IV为诱导NK细胞扩增及成熟，收集CD3
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CD56
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NK细胞，从而得到蜕膜样自然杀伤细胞，其中所述培养以含有细胞因子组合I的新鲜基础培养基开始，在培养的阶段I、II、III和IV分别使用含有细胞因子组合I、组合II、组合III和组合IV的新鲜基础培养基进行半量换液培养，其中所述细胞因子组合I为Flt3L和SCF；组合II为Flt3L，SCF和IL
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15；组合III为Flt3L，SCF和IL
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15；组合IV为IL
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15。2.权利要求1所述的方法，其中所述基础培养基为添加胎牛血清，例如添加10％胎牛血清的SCGM培养基。3.权利要求1或2所述的方法，其中所述含有细胞因子组合I、II、III和IV的新鲜基础培养基中的各细胞因子浓度分别为组合I：30ng/ml Flt3L，20ng/ml SCF；组合II：30
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50ng/mlFlt3L，20
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40ng/mlSCF，和20
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40ng/ml IL
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15；组合III：10
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【专利技术属性】
技术研发人员：傅斌清，杜祥慧，魏海明，孙汭，田志刚，
申请(专利权)人：中国科学技术大学，
类型：发明
国别省市：