一种人胰腺癌组织类器官模型的构建方法技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，具体涉及一种人胰腺癌组织类器官模型的构建方法。步骤S1：将新鲜的人胰腺癌标本用清洗液冲洗，机械剪碎；步骤S2：机械剪碎后的组织碎块进行酶消化；步骤S3：将酶消化后的组织碎块进行无酶消化，收集上清，离心后得到胰腺癌单细胞沉淀；步骤S4：将步骤S3得到的胰腺癌单细胞与基质材料充分混匀，种胶滴，加入完全培养基进行培养。本发明专利技术采用机械剪碎

【技术实现步骤摘要】
一种人胰腺癌组织类器官模型的构建方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种人胰腺癌组织类器官模型的构建方法。

技术介绍

[0002]癌症是一种极其复杂的疾病，在过去的几十年里，人们对部分类型癌症的基础科学研究取得了一些实质进展，但是应用至临床实际治疗时仍存在或多或少的问题。人们也已逐渐认识到，基础科学研究到临床实际治疗的转化成了发展新肿瘤治疗方案的主要障碍之一。这主要是因为许多肿瘤模型仅仅对肿瘤组织进行了大体概括，无法很好地维持肿瘤细胞的高度异质性，从而使许多在传统癌症模型中有效的药物在临床试验中无法得到验证。
[0003]传统的二维（2D）细胞培养在建立基础肿瘤生物学研究中发挥了重要作用，并且由于其具有广泛的可用性、易操作性、可重复性和低成本等优点而被常规使用。但是从原发肿瘤标本中生成2D细胞模型的方法效率极低，容易发生优势克隆选择，在体外扩增数代之后会发生大量且不可预测的遗传变化，丧失原始肿瘤的遗传异质性，因而临床相关性较低。相比之下，患者来源的异种移植（PDX）模型是通过手术方式从癌症患者病灶处取下来小块肿瘤，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人胰腺癌组织类器官模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1：将新鲜的人胰腺癌标本用清洗液冲洗，机械剪碎；步骤S2：机械剪碎后的组织碎块进行酶消化；步骤S3：将酶消化后的组织碎块进行无酶消化，收集上清，离心后得到胰腺癌单细胞沉淀；步骤S4：将步骤S3得到的胰腺癌单细胞与基质材料充分混匀，种胶滴，加入完全培养基进行培养。2.根据权利要求1所述的人胰腺癌组织类器官模型的构建方法，其特征在于，机械剪碎后用基础培养基重悬，经100μm滤网过滤得到的滤液再经20μm滤网过滤，得到滤渣为细胞团块，将细胞团块与基质材料充分混匀，种胶滴，加入完全培养基进行培养。3.根据权利要求1所述的人胰腺癌组织类器官模型的构建方法，其特征在于，酶消化采用的酶消化液为含有2.5~5mg/mL胶原酶II，10~100μg/mL DNase I和10.5μM Y
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27632的基础培养基。4.根据权利要求1所述的人胰腺癌组织类器官模型的构建方法，其特征在于，酶消化的条件为37℃，40~50rpm，20~30min，消化1次。5.根据权利要求1所述的人胰腺癌组织类器官模型的构建方法，其特征在于，无酶消化采用的无酶消化液为Gentle Cell Dissociation Reagent。6.根据权利要求5所述的人胰腺癌组织类器官模型的构建方法，其特征在于，无酶消化液中含有10.5μM Y
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27632。7.根据权利要求1所述的人胰腺癌组织类器官模型的构建方法，其特征在于，无酶消化为加入无酶消化液后在37℃下消化10~20min，其中每消化5min吹打10~20...

【专利技术属性】
技术研发人员：张太平，邱江东，陶锦新，陈光宇，杨刚，赵方宇，刘悦泽，郑连芳，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：