从犬粪中分离细粒棘球绦虫虫卵及体外孵化出六钩蚴进行原发性感染动物造模的方法技术

本发明专利技术公开了从犬粪中分离细粒棘球绦虫虫卵及体外孵化出六钩蚴进行原发性感染动物造模的方法。本发明专利技术所要保护的一个技术方案是制备细粒棘球绦虫六钩蚴的方法，包括分离得到细粒棘球绦虫虫卵，将所述细粒棘球绦虫虫卵使用胃蛋白酶进行孵化，使用脱壳液进行脱壳，使用Percoll培养液进行纯化得到细粒棘球绦虫六钩蚴。所述Percoll培养液由10

【技术实现步骤摘要】
从犬粪中分离细粒棘球绦虫虫卵及体外孵化出六钩蚴进行原发性感染动物造模的方法


[0001]本专利技术涉及医学
，具体涉及从犬粪中分离细粒棘球绦虫虫卵及体外孵化出六钩蚴进行原发性感染动物造模的方法。

技术介绍

[0002]棘球蚴病俗称包虫病(Echinococcosis)，是由棘球绦虫的幼虫(棘球蚴)所引起的一种危害性很大的人畜共患寄生虫病。棘球绦虫需要两个哺乳类动物才能完成其生活史，成虫即绦虫期寄生于终末宿主犬科动物的小肠内；包囊是棘球绦虫的幼虫阶段，寄生在人、草食家畜或啮齿类动物(中间宿主)的实质性器官内，以肝、肺为主。造成人感染的包虫病主要有两种类型：由细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)引起的囊型包虫病(Cystic Echinococcosis,CE)和由多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis，E.m)引起的泡型包虫病(Alveolar Echinococcosis，AE)。细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫有四个标志性发育的阶段：既成虫(终末宿主体内)，虫卵(终末宿主体内，感染本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.制备细粒棘球绦虫六钩蚴的方法，包括：从细粒棘球绦虫感染的粪便中分离细粒棘球绦虫虫卵，将所述细粒棘球绦虫虫卵使用胃蛋白酶进行孵化，使用脱壳液进行脱壳，使用Percoll培养液进行纯化得到细粒棘球绦虫六钩蚴；所述Percoll培养液由溶质和溶剂组成，溶剂为Percoll，溶质为10
×
NCTC135液体培养基、谷氨酰胺和庆大霉素；所述Percoll培养液中，10
×
NCTC135液体培养基的体积百分含量为10％，谷氨酰胺的含量为2M谷氨酰胺，庆大霉素的质量含量为5％。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述分离细粒棘球绦虫虫卵，包括如下步骤：A1)取细粒棘球绦虫感染犬的粪便，用0.85％的NaCl溶液稀释所述粪便后过滤，收集滤过物，对所述滤过物进行离心，收集沉淀，使用0.85％的NaCl溶液重悬所述沉淀得到的液体为含细粒棘球绦虫虫卵的宿主粪样悬浮液；A2)在饱和蔗糖溶液上层加入所述含细粒棘球绦虫虫卵的宿主粪样悬浮液，进行纯化虫卵处理，得到纯化后的细粒棘球绦虫虫卵。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：A2)中所述纯化虫卵处理包括如下步骤：在所述饱和蔗糖溶液上层加入所述含细粒棘球绦虫虫卵的宿主粪样悬浮液后，对所述饱和蔗糖溶液上层进行搅拌扩散处理；所述搅拌扩散处理为使用搅拌棒以80
‑
90圈/分钟的速度匀速旋转搅拌60圈使液体分层，吸取上层液体，用0.85％的NaCl溶液稀释所述上层液体后，离心收集沉淀。4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：A2)中，所述饱和蔗糖溶液和所述含细粒棘球绦虫虫卵的宿主粪样悬浮液的体积比为9:2。5.分离细粒棘球绦虫虫...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文宝，郭刚，李军，任远，齐文静，郭宝平，张耀，武娟，吴川川，张慧，
申请(专利权)人：新疆医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：