一种基于CRISPR-Cas12a系统的可视化病毒检测方法及应用技术方案

技术编号:29041190 阅读:28 留言:0更新日期:2021-06-26 05:51
本发明专利技术公开一种基于CRISPR

【技术实现步骤摘要】
一种基于CRISPR

Cas12a系统的可视化病毒检测方法及应用


[0001]本专利技术属于病毒检测
,尤其是一种基于CRISPR

Cas12a系统的可视化病毒检测方法及应用。

技术介绍

[0002]病毒感染严重危害人类健康,病毒检测对于疾病的诊断、预防和治疗至关重要,开发有效、准确、快速以及灵敏的检测工具对于疾病控制有着至关重要的作用。尽管在实验室方面检测方法的开发已经取得了巨大的进步,但是仍然需要加强对于非实验室条件下的检测方法开发,尤其要推动现场检测方面(point

of

care testing,POCT)需要建立广泛的适用性。基于CRISPR

Cas的核酸检测技术为开发灵敏快速POCT检测提供了新颖的方式。目前,病毒的检测方法主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测。但是由于抗原检测检出率较低,目前新冠检测主要集中在抗体和核酸检测。其中核酸检测具有早期诊断、灵敏度和特异性高等特点,被认为是检测病毒感染的“金标准”;尽管核酸扩增测试(P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
基因片段序列信息(5
’‑3’
)为SEQ ID NO.1:(2)SARS

CoV

2假病毒包装:将构建的含有SARS

CoV

2 N基因和ORF1ab基因片段的质粒lentiSARS

CoV
‑2‑
N与psPAX2和pMD2.G质粒共转染到293T细胞中,转染48小时后,收集细胞培养上清,经过0.45μm滤膜过滤,获得含有SARS

CoV

2基因片段的慢病毒,即SARS

CoV

2假病毒;(3)SARS

CoV

2N片段基因扩增:利用SARS

CoV

2特异的引物扩增N片段,扩增引物序列如下:F:SEQ ID NO.2:R:SEQ ID NO.3:(4)将新型冠状病毒质粒...

【专利技术属性】
技术研发人员:马龙殷利眷李晓燕陈思满淑丽
申请(专利权)人:天津科技大学
类型:发明
国别省市:

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