一类环肽类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一类环肽类化合物及其制备方法和应用。本发明专利技术从曲霉菌Aspergillus sp.H6

【技术实现步骤摘要】
一类环肽类化合物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属微生物及其天然产物的应用
，更具体地说，本专利技术涉及一类新的环肽类化合物及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]癌症是威胁人类生命的三大致死性疾病之一。鼻咽癌发病具有明显的地域特点，超过70％发生于东亚以及东南亚，而我国南方地区尤为多见：如广东、广西、江西、福建等地。其中约75％患者诊断时即为晚期。对于恶性肿瘤的治疗，天然产物及其衍生物药物发挥着重要作用。
[0003]海洋真菌是产生新的活性物质、生产新药的巨大宝库。从海洋真菌的应用意义上来说，对海洋真菌的活性代谢产物的研究对寻找新的药物有重要意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一类新的环肽类化合物及其制备方法和应用。
[0005]本专利技术的第一个目的是提供如式(I)
‑
式(IV)任一项所示的环肽类化合物，或其药用盐：
[0006][0007]其中，如式(I)、(II)、(III)所示的环肽类化合物为一类结构新颖的环六肽类化合物，如式(IV)所示的环肽类化合物为一个新的缩酚酸肽类化合物。
[0008]通过对化合物4(如式(IV)所示的环肽类化合物)的抗肿瘤活性评价，发现化合物4对人鼻咽癌(HONE1)、人鼻咽癌病毒系(HONE
‑
EBV)IC
50
均<15μM，可以作为抗鼻咽癌药物开发
的先导化合物。
[0009]通过对化合物4的抑制乙酰胆碱酶活性评价，发现化合物4对乙酰胆碱酶活性具有一定抑制作用，IC
50
<15μM。
[0010]本专利技术的第二个目的是提供曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7在制备所述的如式(I)
‑
式(IV)任一项所示的环肽类化合物中的应用，所述的曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的保藏编号为GDMCC No：61220。
[0011]其中，所述曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7，于2020年9月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，其保藏编号为GDMCC No：61220。
[0012]本专利技术的第三个目的是提供所述的如式(I)
‑
式(IV)所示的环肽类化合物的制备方法，所述的如式(I)
‑
式(IV)所示的环肽类化合物是从曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的发酵培养物中分离纯化得到，所述的曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的保藏编号为GDMCC No：61220。
[0013]具体步骤如下：制备曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的发酵培养物，用乙酸乙酯浸泡，乙酸乙酯浸提液经减压蒸馏浓缩得到浸膏，浸膏经正相硅胶柱层析，以二氯甲烷
‑
甲醇作为洗脱剂从体积比100:0～0:100梯度洗脱，收集二氯甲烷
‑
甲醇体积比9：1洗脱的馏分Fr.g，收集二氯甲烷
‑
甲醇体积比85：15洗脱的馏分Frs.h，收集二氯甲烷
‑
甲醇体积比80：20洗脱的馏分Frs.i；馏分Fr.g经反相硅胶柱层析，以水
‑
甲醇为洗脱剂从体积比9:1～0:1梯度洗脱，收集水
‑
甲醇体积比40：60洗脱的馏分Frs.g3，馏分Frs.g3经HPLC纯化得到如式(I)和式(III)所示的环肽类化合物；馏分Frs.h经HPLC纯化得到如式(IV)所示的环肽类化合物；馏分Frs.i经反相硅胶柱层析，以水
‑
甲醇为洗脱剂从体积比9:1～0:1梯度洗脱，收集水
‑
甲醇体积比55：45洗脱的馏分Frs.i3，馏分Frs.i3经HPLC纯化得到如式(II)所示的环肽类化合物。
[0014]优选，所述的曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的发酵培养物是通过以下方法制备得到：将曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7接入到种子培养基，27℃，200rpm，培养48小时，获得种子液，将种子液接种到发酵培养基中，27℃，静置培养30天，获得发酵培养物；所述的种子培养基的配方为：每升培养基中含有麦芽浸膏15g和海盐10g，余量为水，pH为7.4～7.8；所述的大米培养基是通过以下方法配制的：按每200g大米加海盐7.5g和蒸馏水250ml混合灭菌制得。
[0015]优选，所述的馏分Frs.g3经HPLC纯化得到如式(I)和式(III)所示的环肽类化合物具体为：将馏分Frs.g3用HPLC制备纯化，选用YMC
‑
Pack ODS
‑
A色谱柱，流动相为体积比59:41的甲醇/水，流速为2.0ml/min，波长为220nm，收集出峰时间t
R
＝26min的馏分，得到如式(I)所示的环肽类化合物，收集出峰时间t
R
＝28min的馏分，得到如式(III)所示的环肽类化合物。
[0016]优选，所述的馏分Frs.h经HPLC纯化得到如式(IV)所示的环肽类化合物具体为：将馏分Frs.h用HPLC制备纯化，选用YMC
‑
Pack ODS
‑
A色谱柱，流动相为体积比90:10的甲醇/水，流速为2.0ml/min，波长为220nm，收集出峰时间t
R
＝13.5min的馏分，得到如式(IV)所示的环肽类化合物；所述的馏分Frs.i3经HPLC纯化得到如式(II)所示的环肽类化合物具体为：将馏分Frs.i3用HPLC制备纯化，选用YMC
‑
Pack ODS
‑
A色谱柱，流动相为体积比40:60的
乙腈/水，流速为2.0ml/min，波长为220nm，收集出峰时间t
R
＝19min的馏分，得到如式(II)所示的环肽类化合物。
[0017]本专利技术的第四个目的是提供所述的如式(IV)所示的环肽类化合物在制备抗肿瘤药物和/或乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。
[0018]所述的抗肿瘤药物优选为抗鼻咽癌药物。
[0019]本专利技术的第五个目的是提供一种抗肿瘤药物，包括有效剂量的作为活性成分的所述的如式(IV)所示的环肽类化合物，及药学上可接受的载体。
[0020]相对于现有技术，本专利技术具有如下优点：
[0021]本专利技术从曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的发酵培养物中分离纯化得到一类结构新颖的环六肽类化合物(化合物1
‑
3)，该类化合物具有新颖结构骨架，对中国海洋来源小分子化合物具有重要意义；从曲霉菌Aspergillus 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.如式(I)
‑
式(IV)任一项所示的环肽类化合物，或其药用盐：2.曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7在制备权利要求1所述的如式(I)
‑
式(IV)任一项所示的环肽类化合物中的应用，所述的曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的保藏编号为GDMCC No：61220。3.权利要求1所述的如式(I)
‑
式(IV)所示的环肽类化合物的制备方法，其特征在于，所述的如式(I)
‑
式(IV)所示的环肽类化合物是从曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的发酵培养物中分离纯化得到，所述的曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的保藏编号为GDMCC No：61220。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：制备曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的发酵培养物，用乙酸乙酯浸泡，乙酸乙酯浸提液经减压蒸馏浓缩得到浸膏，浸膏经正相硅胶柱层析，以二氯甲烷
‑
甲醇作为洗脱剂从体积比100:0～0:100梯度洗脱，收集二氯甲烷
‑
甲醇体积比9：1洗脱的馏分Fr.g，收集二氯甲烷
‑
甲醇体积比85：15洗脱的馏分Frs.h，收集二氯甲烷
‑
甲醇体积比80：20洗脱的馏分Frs.i；馏分Fr.g经反相硅胶柱层析，以水
‑
甲醇为洗脱剂从体积比9:1～0:1梯度洗脱，收集水
‑
甲醇体积比40：60洗脱的馏分Frs.g3，馏分Frs.g3经HPLC纯化得到如式(I)和式(III)所示的环肽类化合物；馏分Frs.h经HPLC纯化得到如式(IV)所示的环肽类化合物；馏分Frs.i经反相硅胶柱层析，以水
‑
甲醇为洗脱剂从体积比9:1～0:1梯度洗脱，收集水
‑
甲醇体积比55：45洗脱的馏分Frs.i3，馏分Frs.i3经HPLC纯化得到如式(II)所示的环肽类化合物。5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，所述的曲霉菌Aspergillus sp.BH6
‑
7的发酵培养物是通过以下方法制备得到：...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨斌，龙洁怡，刘永宏，周雪峰，林秀萍，廖升荣，王俊锋，庞小艳，
申请(专利权)人：南方海洋科学与工程广东省实验室广州，
类型：发明
国别省市：