分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法技术

本发明专利技术属于氟雷拉纳检测技术领域，公开了一种分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，检测饲料中氟雷拉纳含量方法：准确称取样品放入到离心管内，加入5mL乙腈；涡旋混匀1min后，超声离心5min，取上层清液加入15mL于净化管中，涡旋30s，4000r/min离心5min；取上清液于10mL玻璃离心管中，40℃氮吹近干，1mL甲醇定容，过0.22μm有机滤膜后待测，利用液相色谱串联质谱技术进行测定。对试样进行定性和定量检测，并对检测结果进行表述。本发明专利技术能快速、准确地检测饲料中氟雷拉纳的含量，有助于规范饲料中驱虫剂的添加，保障动物饲料生产的规范和安全以及保障动物源性食品的安全。

【技术实现步骤摘要】
分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法
本专利技术属于氟雷拉纳检测
，尤其涉及一种分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法。
技术介绍
目前，氟雷拉纳是一种异噁唑啉类驱虫剂，广泛使用于畜牧、家禽、宠物等动物寄生虫的防治。氟雷拉纳可通过饲料摄入在动物体内富集，积累，且表观分布容积高，清除率低，半衰期长，很容易在动物肌肉、脂肪和内脏中长期残留，长期食用氟雷拉纳残留量超标的动物源性食品可能会引起人体急性中毒或慢性肝脏中毒。饲料中添加氟雷拉纳正在发展中，还未引起相关部门及研究者足够重视，而目前国内外还未制定相应的饲料中氟雷拉纳含量检测标准和检测方法。通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：目前国内外还未制定相应的饲料中氟雷拉纳含量检测标准和检测方法。解决以上问题及缺陷的难度为：相关参考资料较少,没有成熟的检测方法可以借鉴。解决以上问题及缺陷的意义为：本专利技术能快速、准确、高效地检测饲料中氟雷拉纳的含量，有助于规范饲料中驱虫剂的添加，保障动物饲料生产的规范和安全以及保障动物源性食品的安全。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法。本专利技术是这样实现的，一种分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，所述分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，包括：步骤一，准确称取样品2.00±0.02g至50mL放入到离心管内，加入5mL乙腈；步骤二，涡旋混匀1min后，超声15min，10000r/min离心5min，取上层清液加入15mL净化管中(100mgC18+100mgPSA)；步骤三，取上清液于10mL玻璃离心管中，40℃氮吹近干，1mL甲醇定容，过0.22μm有机滤膜后上样，利用液相色谱串联质谱技术进行测定；步骤四，根据上述检测方法，对样品(试样)进行定性分析和定量检测，并对检测结果进行表述。进一步，所述步骤二中，涡旋30s，4000r/min离心5min。进一步，所述步骤三中，色谱条件：色谱柱：WatersCORTECSC18色谱柱(2.7μm2.1*50mm)，柱温35℃，进样体积：1μL，流速：0.3mL/min，流动相为甲醇和纯水梯度洗脱。进一步，所述步骤三中，质谱条件：电喷雾离子源(ESI-；毛细管电压：3.5kV；脱溶剂气温度：500℃脱溶剂气流量：800L/hr；气帘气流量：150L/hr；碰撞气流量：0.16mL/min，定量离子对(m/z)554>534，定性离子对(m/z)554>514，碰撞能量20eV，锥孔电压60V。进一步，所述步骤四中，定性测定方法，包括：样品测定时，如果检出的色谱峰保留时间与空白检材添加对照品的色谱峰保留时间比较，相对误差小于2％，并且在扣除背景后的样品质谱图中，均出现所选择的离子对，而且所选择的离子对相对丰度比与添加对照品的离子对相对丰度比至相对误差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在这种化合物。进一步，所述步骤四中，定量测定方法，包括：在仪器最佳工作状态下，将试样溶液注入液相色谱串联质谱仪中，测得相应的峰面积，由标准曲线得到试样中氟雷拉纳的浓度。进一步，所述步骤四中，分析结果的表述：试样中氟雷拉纳的含量按下列公式计算：式中：X——试样中氟雷拉纳的含量，单位为微克每千克或微克每升(ug/kg或ug/L)；ρ——由标准曲线计算所得的试样溶液中氟雷拉纳的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL)；V——最终定容体积，单位毫升(mL)；m——试样的称样量，单位克(g)；f——稀释倍数；计算结果保留三位有效数字。本专利技术各个步骤的参数确保该检测方法的有效性，保证能够准确、高效、快速地检测饲料中氟雷拉纳的含量。本专利技术的另一目的在于提供一种饲料中氟雷拉纳含量的检测方法，所述饲料中氟雷拉纳含量的检测方法使用上述的分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法。结合上述的所有技术方案，本专利技术所具备的优点及积极效果为：本专利技术利用分散固相萃取(QuRChERS)前处理技术，能有效的检测动物饲料中氟雷拉纳的含量，具有快速、简单、准确、高效的特点。本专利技术的建立能快速、准确地检测饲料中氟雷拉纳的含量，有助于规范饲料中驱虫剂的添加，保障动物饲料生产的规范和安全以及保障动物源性食品的安全。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例提供的分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法流程图。图2是本专利技术实施例提供的色谱示意图。图3是本专利技术实施例提供的质谱示意图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，下面结合附图对本专利技术作详细的描述。如图1所示，本专利技术实施例提供的分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，包括：S101：准确称取样品2.00±0.02g至50mL放入到离心管内，加入5mL乙腈；S102：涡旋混匀1min后，超声15min，10000r/min离心5min，取上层清液加入15mL净化管中(100mgC18+100mgPSA)；S103：取上清液于10mL玻璃离心管中，40℃氮吹近干，1mL甲醇定容，过0.22μm有机滤膜后上样，利用液相色谱串联质谱技术进行测定。S104：根据上述检测方法，对样品(试样)进行定性分析和定量检测，并对检测结果进行表述。本专利技术提供的分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法业内的普通技术人员还可以采用其他的步骤实施，图1的本专利技术提供的分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法仅仅是一个具体实施例而已。本专利技术实施例提供的S102中，涡旋30s，4000r/min离心5min。本专利技术实施例提供的S103中，色谱条件：色谱柱：WatersCORTECSC18色谱柱(2.7μm2.1*50mm)，柱温35℃，进样体积：1μL，流速：0.3mL/min，流动相为甲醇和纯水梯度洗脱；质谱条件：电喷雾离子源(ESI-；毛细管电压：3.5kV；脱溶剂气温度：500℃脱溶剂气流量:800L/hr；气帘气流量：150L/hr；碰撞气流量：0.16mL/min，定量离子对(m/z)554>534，定性离子对(m/z)554>514，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，其特征在于，利用分散固相萃取技术，检测饲料中氟雷拉纳的含量，所述分散固相萃取与液相色谱串联质谱检测氟雷拉纳含量的方法包括：/n称取样品放入到离心管内，加入乙腈；/n涡旋混匀后，超声，离心，取上层清液加入净化管中；/n取上清液于玻璃离心管中，氮吹近干，甲醇定容，过有机滤膜后上样，利用液相色谱串联质谱技术进行测定；/n对试样进行定性和定量检测，并对检测结果进行表述。/n

【技术特征摘要】
1.一种分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，其特征在于，利用分散固相萃取技术，检测饲料中氟雷拉纳的含量，所述分散固相萃取与液相色谱串联质谱检测氟雷拉纳含量的方法包括：
称取样品放入到离心管内，加入乙腈；
涡旋混匀后，超声，离心，取上层清液加入净化管中；
取上清液于玻璃离心管中，氮吹近干，甲醇定容，过有机滤膜后上样，利用液相色谱串联质谱技术进行测定；
对试样进行定性和定量检测，并对检测结果进行表述。


2.如权利要求1所述的分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，其特征在于，称取样品2.00±0.02g至50mL放入到离心管内，加入5mL乙腈。


3.如权利要求1所述分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，其特征在于，涡旋30s，4000r/min离心5min。


4.如权利要求1所述分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，其特征在于，涡旋混匀1min后，超声15min，10000r/min离心5min，取上层清液加入15mL净化管中。


5.如权利要求1所述分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，其特征在于，色谱条件：色谱柱：WatersCORTECSC18色谱柱2.7μm2.1*50mm，柱温35℃，进样体积：1μL，流速：0.3mL/min，流动相为甲醇和纯水梯度洗脱。


6.如权利要求1所述分散固相萃取与液相色谱串联质谱氟雷拉纳含量检测方法，其特征在于，取上清液于10mL玻璃离心管中，40℃氮吹近干，1mL甲醇定容，过0.22μm有机滤膜后上样，利用液相色谱串联质谱技术进行测定。

【专利技术属性】
技术研发人员：胡江涛，薛康，肖宇，刘菲，俞凌云，何开蓉，于刚，俞洪宝，黄冬地，
申请(专利权)人：成都海关技术中心，
类型：发明
国别省市：四川;51