本发明专利技术涉及一种用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置及包括其的检测试剂盒及其应用，所述浓缩装置包括阶梯式反应室，所述阶梯式反应室内套设有浓缩室，所述阶梯式反应室外的底部连接有真空泵；所述浓缩室的底部设有疏水膜，且所述浓缩室内卡设有标记膜；所述标记膜位于所述疏水膜的上方。本发明专利技术汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，样本反应浓缩之后加入其中的免疫层析检测卡后，无需长时间等待，即可进行样本检测，操作简单，样本处理时间短，降低了时间成本，适用于临床快速诊断检测。
【技术实现步骤摘要】
用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置及包括其的检测试剂盒及其应用
本专利技术属于体外诊断领域，涉及一种用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置及包括其的检测试剂盒及其应用。
技术介绍
血清淀粉样蛋白A(SAA)是一种急性时相反应蛋白，相对分子质量约为12kD。正常情况下血液中SAA的含量很少，炎症或感染急性期其在48～72h内即迅速升高，并且在疾病的恢复期迅速下降。已有研究表明，在细菌、病毒感染、动脉粥样硬化、冠心病、急性移植排斥反应等疾病中均可检测到血清SAA升高。与C-反应蛋白(CRP)相似，SAA有助于诊断炎症、评估其活性、检测其活动及治疗。在病毒感染性急性期，SAA水平明显升高，而CRP升高并不明显，因此SAA是诊断病毒感染灵敏而可靠的特异性指标，有助于患者细菌感染和病毒感染的鉴别诊断。目前，大多是针对汗液收集装置的研究，但由于汗液量少，因此如果直接检测由于浓度低可能会造成灵敏度的降低，不易及时对人的健康进行监测。因此研发出一种能在汗液收集后进行浓缩加速反应的装置以提高灵敏度成为迫切需求。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的主要目的在于提供一种用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置及包括其的检测试剂盒及其应用。为了实现上述目的，本专利技术提供了一种用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置，所述浓缩装置包括阶梯式反应室，所述阶梯式反应室内套设有浓缩室，所述阶梯式反应室外的底部连接有真空泵；所述浓缩室的底部设有疏水膜，且所述浓缩室内卡设有标记膜；所述标记膜位于所述疏水膜的上方。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述阶梯式反应室包括连接为一体的第一反应室和第二反应室，所述第一反应室和第二反应室均为中空的圆柱形结构，且所述第一反应室的直径大于第二反应室的直径；这样设置可以使阶梯式反应室和浓缩室套设在一起，二者之间形成中空结构，可用于废液储存；并且外层的阶梯式反应室能压住浓缩室底部的疏水膜。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述浓缩室为中空的圆柱形结构，且所述浓缩室的直径小于第一反应室的直径，并大于第二反应室的直径；这样设置可以使阶梯式反应室和浓缩室套设在一起，二者之间形成中空结构，可用于废液储存；并且外层的阶梯式反应室能压住浓缩室底部的疏水膜。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述疏水膜的孔径小于200nm，这样设置的目的是防止缓冲液在反应阶段就下渗，孔径小于200nm是因为所使用标记的荧光微球直径大于200，可以防止被标记的抗体下渗到阶梯式反应室。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述标记膜上标记有乳胶荧光微球标记的一株鼠抗人血清淀粉样蛋白A单克隆抗体、乳胶荧光微球标记的兔IgG多克隆抗体；所述乳胶荧光微球标记的一株鼠抗人血清淀粉样蛋白A单克隆抗体和乳胶荧光微球标记的兔IgG多克隆抗体的摩尔比为1:0.2～4，优选比例为1:1.2，这样优选后有利于提高液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒的灵敏度和特异性；所述标记膜为硝酸纤维素膜。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述浓缩室、阶梯式反应室与真空泵的体积比为(1-10):(0.9-1.9):(0.9-1.9)，优选为1：0.9：0.9，综合不同稀释比例效果来看，这样优选后的稀释测值效果最好。为了实现上述目的，本专利技术还提供了一种用于检测汗液中血清淀粉样蛋白A的系统，所述系统包括上述的浓缩装置和免疫层析检测卡。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述免疫层析检测卡包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有一株血清淀粉样蛋白A单克隆抗体，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体；所述试纸条还包括PVC板，所述PVC板上固定有依次连接的加样垫、包被垫及吸水垫，所述包被垫上依次设有检测线及质控线。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述另一株血清淀粉样蛋白A单克隆抗体与羊抗兔多克隆抗体的划膜浓度比为(1-2)：(1-2)，优选为1:1，优选比例既不会浪费原料，测量结果也相对准确。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述免疫层析检测卡还包括用于卡设试纸条的卡壳；所述卡壳包括：底槽，其连接于所述PVC板；上盖，其连接于所述底槽，所述上盖上设置有用于向所述加样垫上加样的加样孔；观察窗，其设置于上盖上并用于检测线和质控线的数据采集。为了实现上述目的，本专利技术还提供了一种汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：1)将所采取的汗液加入所述汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒的浓缩室，并与缓冲液按照1～10:10的比例进行混合，之后通过所述浓汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒的的真空泵抽取，得到浓缩后的样本；2)取30～100μL步骤1)中浓缩后的样本滴加到所述汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒的加样孔(对应试纸条的加样垫)中，室温静置5～20min，然后将所述汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒插入到荧光免疫分析仪进行检测，即时可获得检测结果。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述汗液的收集为现有技术，在此不必赘述；例如，可通过可柔性汗液采集器收集汗液。在本专利技术的一个具体方案中，其中所述汗液样本选自额头、脖颈或腋下等容易产生汗液且方便采集的部位。本申请具体操作过程及原理：将通过现有技术采集到的汗液加入用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置的浓缩室内，加入缓冲液，通过真空泵向下抽取液体，控制浓缩装置的阶梯式反应室的体积以及通过疏水膜的分子直径，小分子水通过膜被负压抽到第二反应室，大分子荧光微球标记的抗体则留在了浓缩室的底部，多余的水被排到了第二反应室起到了浓缩作用。其中，浓缩室内的底部为疏水膜，膜的孔径小于200nm，利用最底部真空泵抽取相应浓缩倍数的体积，膜上剩余的液体则为浓缩液及荧光微球标记的抗体。相比于现有技术，本专利技术具有以下有益效果：1、本专利技术所述的用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置，其可配合可柔性穿戴式汗液收集装置用于浓缩后汗液中SAA的检测，用于患者细菌感染和病毒感染的诊断。浓缩后灵敏度增加，极大地提高了检测效率。2、本专利技术所述的汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，其灵敏度高、稳定性强、具有优异的准确性和精密度。3、本专利技术所述的汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，样本反应浓缩之后加入其中的免疫层析检测卡后，无需长时间等待，即可进行样本检测，操作简单，样本处理时间短，降低了时间成本，适用于临床快速诊断检测。附图说明图1为本专利技术所提供的用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置的结构示意图，图2为本专利技术所提供的SAA免疫层析检测卡的结构示意图；图3A为本专利技术所提供的SAA免疫层析检测卡中一种上盖的内部结构示意图；图3B为本专利技术所提供的SAA免疫层析检测卡中一种底槽的内部结构示意图；图4为本专利技术实施例1中SAA的标准曲线示意图；其中，1a-标记膜，2a-阶梯式反应室，21a-第一反应室；22a-第二反应室；3a-浓缩室，4a-真空泵，5a-疏水膜，6a-针本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置，其特征在于，所述浓缩装置包括阶梯式反应室，所述阶梯式反应室内套设有浓缩室，所述阶梯式反应室外的底部连接有真空泵；所述浓缩室的底部设有疏水膜，且所述浓缩室内卡设有标记膜；所述标记膜位于所述疏水膜的上方。/n
【技术特征摘要】
1.一种用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置，其特征在于，所述浓缩装置包括阶梯式反应室，所述阶梯式反应室内套设有浓缩室，所述阶梯式反应室外的底部连接有真空泵；所述浓缩室的底部设有疏水膜，且所述浓缩室内卡设有标记膜；所述标记膜位于所述疏水膜的上方。
2.如权利要求1所述的用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置，其特征在于，所述阶梯式反应室包括连接为一体的第一反应室和第二反应室，所述第一反应室和第二反应室均为中空的圆柱形结构，且所述第一反应室的直径大于第二反应室的直径。
3.如权利要求1所述的用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置，其特征在于，所述浓缩室为中空的圆柱形结构，且所述浓缩室的直径小于第一反应室的直径，并大于第二反应室的直径；所述疏水膜的孔径小于200nm。
4.如权利要求1所述的用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置，其特征在于，所述标记膜上标记有乳胶荧光微球标记的一株鼠抗人血清淀粉样蛋白A单克隆抗体、乳胶荧光微球标记的兔IgG多克隆抗体；所述乳胶荧光微球标记的一株鼠抗人血清淀粉样蛋白A单克隆抗体和乳胶荧光微球标记的兔IgG多克隆抗体的摩尔比为1:0.2～4；所述标记膜为硝酸纤维素膜。
5.如权利要求1所述的用于收集汗液中血清淀粉样蛋白A的浓缩装置，其特征在于，所述浓缩室、阶梯式反应室与真空泵的体积比为(1-10):(0.9-1.9):(0.9-1.9)。
6.一种汗液中血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括权利要求1-5任一项所述的浓缩装置和SAA免疫层析检测卡。
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【专利技术属性】
技术研发人员：胡琛光，胡文翔，岳乾阳，朱泉，林斯，
申请(专利权)人：北京华科泰生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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