一种酶SCXC及其编码基因和在制备灭杀松材线虫产品中的应用制造技术

技术编号:28966618 阅读:13 留言:0更新日期:2021-06-23 09:06
本发明专利技术属于林业生物技术领域,公开了一种酶SCXC及其编码基因和在制备灭杀松材线虫产品中的应用,所述酶SCXC的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明专利技术所提供的酶SCXC可有效杀死松材线虫,松材线虫的死亡率高达85.42%,减轻松材线虫对松树的危害,对林业生产实践有重要价值。

【技术实现步骤摘要】
一种酶SCXC及其编码基因和在制备灭杀松材线虫产品中的应用
本专利技术属于林业生物
,具体涉及一种酶SCXC及其编码基因和在制备灭杀松材线虫产品中的应用。
技术介绍
松材线虫(BursaphelenchusxylophilusNickle)最早于1982年由日本传入我国南京中山陵,目前已经扩散到全国18个省。松材线虫本身很小,但借助于松树体内的寄生昆虫松墨天牛,通过气门进入天牛体内,或附着在天牛体表。当天牛幼虫羽化飞出寻找新的健康松树啃食时,松材线虫即通过天牛的取食伤口进入松树木质部,通过大量繁殖逐渐扩散到松树全株,使松树丧失水分运输功能,松脂分泌减少甚至停止,植株失水枯萎在30-45天死亡,3-5年可摧毁成片松林。松材线虫和松墨天牛合作导致的松树松材线虫病具有致死率高、传播速度快、极难防治等特点,我国已在1996年将其列为森林植物检疫对象。我国对松材线虫病已经进行了几十年的研究,但是还没有发现可以应用于生产、切实可行地控制病害的防治方法。目前松材线虫病的防治对策主要是结合松材线虫病的发生规律,选择合理的检验方法,包括加强检疫工作、及时清理病死植株、科学灭杀松墨天牛以及选种抗病的树种等,但是从灭杀松材线虫本身进行防治的对策较少。因此,本专利技术提供了一种灭杀松材线虫的酶SCXC及其编码基因和应用。
技术实现思路
专利技术目的:本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足,提供一种酶SCXC。本专利技术还要解决的技术问题是提供上述酶SCXC的编码基因。本专利技术还要解决的技术问题是提供包含上述编码基因的重组表达载体和制备方法。本专利技术还要解决的技术问题是提供包含上述编码基因的重组菌株。本专利技术进一步要解决的技术问题是提供上述酶SCXC的制备方法。本专利技术最后要解决的技术问题是提供上述酶SCXC的应用。专利技术思路:松材线虫体表携带的伴生细菌在不同的松树品种上可能具有显著不同,但主要有3类:假单胞菌(Pseudomonassp.)、泛菌(Pantoeasp.)和不解糖消化链球菌(Peptostreptococcussp.),其中假单胞菌和泛菌的比例较高。本专利技术以松材线虫体表携带的假单胞菌出发菌株,对其进行基因工程改造,使其能够分泌一种可灭杀松材线虫的酶,能够高效针对性的杀死松材线虫,提高对松材线虫的生物防治能力。为了解决上述第一个技术问题,本专利技术公开了一种胞外酶SCXC,其包括440个氨基酸,未预测到信号肽序列,蛋白理论分子量为46.11kDa。其中,所述酶SCXC为尿囊素酶。其中,所述酶SCXC的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示,具体为:MKILIQNGRVMDPATGRDEMADIAVAAGRIIAIGNVAPDFQPNRTIDASGCVVAPGLVDLAVRLREPGQEHAGMLESEMAAAVAGGVTSLVCPPDTEPVLDEPGLVDMLKFRAEKLHQSRVFPLGALTRGLKGEVLTEMAELTESGCIGFGQAEVPILNTQVLQRALQYAATFGYTVWLRPQDPWLGKGVAASGPLATRLGLSGVSAAAETIALHTLFELMRGVKGPGPGARVHLCRLSSAAGLALVRQAKAEGLPVTCDVSVHNLHLTDVDIGYYDSRLRLQPPVRQQRDRDALRAGLADGTIDALVSDHNPVDSDAKTLPFAEAEPGATAVELLLGLACRWAQQDGLGLMQALAVLTEGPQRVLGASLGTLQASVGRLAVGGVADLVVFDPNASHRVHAQALRSQGKHTPFDGHELPVTVRATLVAGQVAHTSSPAQA(SEQIDNo.1)。其中,所述酶SCXC的最适pH为7.0,最适温度为35℃,在生产实践中具有重要价值。为了解决上述第二个技术问题,本专利技术公开了一种上述酶SCXC的编码基因。其中,所述编码基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示,具体为:ATGAAGATCCTGATTCAAAACGGCCGCGTCATGGACCCGGCCACCGGCCGCGACGAGATGGCCGACATCGCGGTTGCCGCCGGTCGCATCATCGCCATCGGCAACGTGGCGCCCGATTTCCAGCCCAACCGCACCATCGACGCCAGCGGCTGCGTGGTGGCCCCGGGCCTGGTGGACCTGGCGGTGCGCCTGCGCGAGCCGGGCCAGGAGCACGCCGGCATGCTGGAGAGCGAGATGGCCGCGGCGGTGGCCGGTGGCGTCACCTCCCTGGTCTGCCCCCCCGACACCGAGCCGGTGCTGGACGAGCCCGGCCTGGTGGACATGCTCAAGTTCCGTGCCGAGAAGCTGCACCAGTCGCGCGTGTTCCCGCTGGGCGCGCTCACGCGCGGCCTCAAGGGCGAGGTGCTCACCGAGATGGCCGAGCTCACCGAGTCGGGCTGCATCGGCTTCGGACAGGCCGAGGTGCCGATTCTCAACACGCAGGTGCTGCAGCGCGCCCTGCAGTACGCGGCCACCTTCGGCTACACCGTGTGGCTGCGCCCGCAAGACCCCTGGCTGGGCAAGGGCGTGGCCGCCAGCGGCCCGCTGGCCACGCGCCTGGGCCTCTCGGGTGTGTCGGCGGCGGCCGAGACCATCGCGCTGCACACCCTGTTCGAGCTGATGCGTGGCGTCAAGGGCCCCGGTCCGGGCGCGCGCGTGCACCTGTGCCGCCTCAGCAGCGCCGCCGGCCTGGCCCTGGTGCGCCAGGCCAAGGCCGAGGGCCTGCCCGTCACCTGCGACGTGAGCGTGCACAACCTGCACCTCACCGACGTGGACATCGGCTACTACGACAGCCGCCTGCGCCTGCAGCCGCCGGTGCGCCAGCAGCGCGACCGCGACGCGCTGCGCGCGGGTCTGGCCGACGGCACCATCGATGCCCTGGTGTCCGACCACAACCCGGTGGACAGCGACGCCAAGACCCTGCCCTTTGCCGAGGCCGAGCCTGGCGCCACCGCGGTGGAGCTGTTGCTGGGCCTGGCCTGCCGCTGGGCGCAGCAAGACGGCCTGGGCCTGATGCAGGCGCTGGCCGTGCTCACCGAAGGGCCGCAGCGCGTGCTGGGCGCCAGCCTGGGCACCCTGCAGGCCAGCGTGGGCCGACTGGCCGTAGGTGGCGTGGCCGACCTGGTGGTGTTCGACCCCAACGCCTCGCACCGCGTGCACGCCCAGGCCCTGCGCAGCCAGGGCAAGCACACGCCGTTTGACGGGCACGAGCTGCCCGTCACCGTGCGGGCCACGCT本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种酶SCXC,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种酶SCXC,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。


2.一种权利要求1所述酶SCXC的编码基因。


3.根据权利要求2所述编码基因,其特征在于,所述编码基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。


4.包含权利要求2所述编码基因的重组表达载体。


5.根据权利要求4所述重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体的质粒为pVLT33。


6.权利要求4所述重组表达载体的制备方法,其特征在于,将核苷酸序列如SEQIDNo.2所示编码基因插入到质粒pVLT33的限制性酶切位点之间,得到重组表达...

【专利技术属性】
技术研发人员:蔡舒杨贺
申请(专利权)人:江苏聚庚科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏;32

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