神经母细胞瘤原位模型的建立方法技术

本发明专利技术公开一种神经母细胞瘤原位模型的建立方法，包括S10、按1:1比例将MEM培养基和F12培养基混合制成培养基混合液，将神经母细胞瘤接种于所述培养基混合液中进行细胞培养；S20、将培养后的神经母细胞瘤进行稀释，制成细胞悬液；S30、取用所述细胞悬液注入C57BL/6小鼠的颅骨周边，并将所述C57BL/6小鼠进行培养，当神经母细胞瘤的体积k处于2.2cm

【技术实现步骤摘要】
神经母细胞瘤原位模型的建立方法
本专利技术涉及生物医学
，尤其涉及一种神经母细胞瘤原位模型的建立方法。
技术介绍
神经母细胞瘤是儿童最常见的颅外肿瘤，是婴幼儿最常见的肿瘤。有将近一半的神经母细胞瘤发生在2岁以内的婴幼儿。神经母细胞瘤约占6-10％的儿童肿瘤，15％的儿童肿瘤死亡率。对于4岁以下儿童，每一百万人口的死亡率为10；对于4-9岁儿童，每一百万人口的死亡率为4例。在相关技术中，采用动物模型作为研究神经母细胞瘤最受广大研究者的青睐，但由于动物模型中的神经母细胞瘤生长的差异，导致所建立动物模型的准确度差，不利于后期研究。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的第一个目的在于提出一种神经母细胞瘤原位模型的建立方法，包括：S10、按1:1比例将MEM培养基和F12培养基混合制成培养基混合液，将神经母细胞瘤接种于所述培养基混合液中进行细胞培养；S20、将培养后的神经母细胞瘤进行稀释，制成细胞悬液；S30、取用所述细胞悬液注入C57BL/6小鼠的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种神经母细胞瘤原位模型的建立方法，其特征在于，包括：/nS10、按1:1比例将MEM培养基和F12培养基混合制成培养基混合液，将神经母细胞瘤接种于所述培养基混合液中进行细胞培养；/nS20、将培养后的神经母细胞瘤进行稀释，制成细胞悬液；/nS30、取用所述细胞悬液注入C57BL/6小鼠的颅骨周边，并将所述C57BL/6小鼠进行培养，当神经母细胞瘤的体积k处于2.2cm

【技术特征摘要】
1.一种神经母细胞瘤原位模型的建立方法，其特征在于，包括：
S10、按1:1比例将MEM培养基和F12培养基混合制成培养基混合液，将神经母细胞瘤接种于所述培养基混合液中进行细胞培养；
S20、将培养后的神经母细胞瘤进行稀释，制成细胞悬液；
S30、取用所述细胞悬液注入C57BL/6小鼠的颅骨周边，并将所述C57BL/6小鼠进行培养，当神经母细胞瘤的体积k处于2.2cm3至3.5cm3之间时，确定得到神经母细胞瘤原位模型。


2.根据权利要求1所述的神经母细胞瘤原位模型的建立方法，其特征在于，所述S10中，具体包括：
S11、采用青霉素100-200ug/ml、链霉素100-200ug/ml、10-15ng/mL人表皮生长因子、10-15ng/mL血管内皮生长因子、两性霉素2.5-5μg/ml、MEM培养基0.2-0.5mg/L及F12培养基0.1-0.25mg/L进行配比，以制成所述培养基混合液；
S12、将具有荧光素酶的神经母细胞瘤接种至所述培养基混合液重悬，在37℃、5％CO2的环境中培养。


3.根据权利要求2所述的神经母细胞瘤原位模型的建立方法，其特征在于，所述S12中，具体包括：
S121、采集患者神经母细胞瘤并通过100mL/L中性甲醛固定6～24h；
S122、通过经常规组织处理进行HE染色，在所述神经母细胞瘤中至少具有50个橙绿信号总数时，确定为所述具有荧光素酶的神经母细胞瘤；
S122、将所述具有荧光素酶的神经母细胞瘤接种至所述培养基混合液重悬，并37℃、5％CO2的环境中进行传代培养3-4天，...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙倩，刘建军，任晓虎，聂露琳，
申请(专利权)人：深圳市疾病预防控制中心深圳市卫生检验中心，深圳市预防医学研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44