一种无血清培养基及其制备方法技术

本发明专利技术属于细胞培养技术领域，具体的，本发明专利技术涉及一种无血清培养基及其制备方法。本发明专利技术的无血清培养基，以成分无血清培养及的添加剂代替血清、血小板裂解液等动物源成分，无血清培养基的成分来源明确、批次间重复性好、临床安全性高，能够提供间充质干细胞快速生长、增殖所需的各类物质成分，并保持其干细胞特性，满足脂肪、骨髓、脐带、脐血、胎盘等不同来源的间充质干细胞体外培养的需求。

【技术实现步骤摘要】
一种无血清培养基及其制备方法
本专利技术属于细胞培养
，具体的，本专利技术涉及一种无血清培养基及其制备方法。
技术介绍
间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)广泛存在于成体骨髓、脂肪、牙髓及围产期脐血、脐带、胎盘等多种人体组织器官中，是具有多向分化潜能、良好的体外扩增能力以及免疫调节功能的成体干细胞，间充质干细胞多次传代扩增后仍具有干细胞特性，并且表面抗原不明显，异体移植排异较轻，配型要求不严格，是自体、异体细胞移植与治疗的理想种子细胞。间充质干细胞最早发现于骨髓，还可从脂肪、脐血、胎盘、脐带、羊水、牙体等组织中分离出来。由于其具有强大的增殖能力和多向分化潜能，在适宜的体内或体外环境下具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞，在外科烧伤、软组织填充、终末期肝病、心肌梗死、糖尿病等疾病的治疗中展现出良好的安全性和有效性。细胞培养技术是细胞生物学研究方法常用技术，通过在体外模拟体内环境，促使间充质干细胞能生长、增殖，从而实现细胞大规模培养。体外培养所需要的营养物质与本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种间充质干细胞的无血清培养基，其中，所述无血清培养基包括：/n基础培养基和无血清培养基的添加剂，所述基础培养基与所述无血清培养基的添加剂的质量比为(5-15)：1；/n其中，所述无血清培养基的添加剂包括：含有基础代谢类物质的第一组分、含有细胞因子类物质的第二组分，以及含有氧化还原类物质的第三组分；以所述添加剂的总质量为100％计，所述第一组分为6％-22％，所述第二组分为35％-47％，所述第三组分为43％-47％。/n

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞的无血清培养基，其中，所述无血清培养基包括：
基础培养基和无血清培养基的添加剂，所述基础培养基与所述无血清培养基的添加剂的质量比为(5-15)：1；
其中，所述无血清培养基的添加剂包括：含有基础代谢类物质的第一组分、含有细胞因子类物质的第二组分，以及含有氧化还原类物质的第三组分；以所述添加剂的总质量为100％计，所述第一组分为6％-22％，所述第二组分为35％-47％，所述第三组分为43％-47％。


2.根据权利要求1所述的无血清培养基，其中，所述基础培养基包括氨基酸、维生素、无机盐和脂类；
优选地，所述氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天门冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、谷氨酰胺中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述无机盐包括氯化钙、氯化钾、硫酸铜、碳酸氢钠、硝酸铁、氯化钠、硫酸亚铁、磷酸氢二钠、氯化镁、磷酸氢钠、硫酸镁、硫酸锌中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述脂类包括花生四烯酸、胆固醇、肉豆蔻酸、油酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、吐温和F-68中的一种或两种以上的组合；
优选地，所述维生素包括生物素、氯化胆碱、泛酸钙、叶酸、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、硫胺素、维生素B12、肌醇中的一种或两种以上的组合。


3.根据权利要求2所述的无血清培养基，其中，所述氨基酸的各组分在所述无血清培养基中的浓度如下：甘氨酸5.25-131.25mg/L，丙氨酸2.67-66.75mg/L，精氨酸54.78-1369.5mg/L，天冬酰胺4.14-103.5mg/L，天门冬氨酸3.99-99.75mg/L，半胱氨酸3.512-87.8mg/L，胱氨酸11.058-276.45mg/L，谷氨酸4.41-110.25mg/L，L-组氨酸14.696-367.4mg/L，异亮氨酸21.374-534.35mg/L，亮氨酸22.29-557.25mg/L，赖氨酸32.75-818.75mg/L，甲硫氨酸6.468-161.7mg/L，苯丙氨酸13.696-342.4mg/L，脯氨酸5.75-143.75mg/L，丝氨酸7.35-183.75mg/L，苏氨酸20.21-505.25mg/L，色氨酸3.844-96.1mg/L，酪氨酸18.358-458.95mg/L，缬氨酸19.93-498.25mg/L，谷氨酰胺100-300mg/L；
所述无机盐的各组分在所述无血清培养基中的浓度如下：氯化钙23.32-583mg/L，硫酸铜0.00026-0.0065mg/L，硝酸铁0.01-0.25mg/L，硫酸亚铁0.0834-2.085mg/L，氯化镁5.728-143.2mg/L，硫酸镁9.768-244.2mg/L，氯化钾62.36-1559mg/L，碳酸氢钠240-6000mg/L，氯化钠1416.1-35402.5mg/L，磷酸氢二钠14.204-355.1mg/L，磷酸氢钠12.5-312.5mg/L，硫酸锌0.0864-2.16mg/L；
所述维生素的各组分在所述无血清培养基中的浓度如下：生物素0.0007-0.0175mg/L，氯化胆碱1.996-49.9mg/L，泛酸钙0.648-16.2mg/L，叶酸0.73-18.25mg/L，烟酰胺0.604-15.1mg/L，盐酸吡哆醇0.6-15mg/L，核黄素0.0638-1.595mg/L，硫胺素0.634-15.85mg/L，维生素B120.136-3.4mg/L，肌醇2.92-73mg/L；
所述脂类的各组分在所述无血清培养基中的浓度如下：花生四烯酸0.0004-0.01mg/L，胆固醇0.044-1.1mg/L，肉豆蔻酸0.002-0.05mg/L，油酸0.002-0.05mg/L，棕榈酸0.002-0.05mg/L，棕榈油酸0.002-0.05mg/L，硬脂酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙振华，施坤宁，王星，
申请(专利权)人：江苏普瑞康生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32