一种土壤中乙蒜素的固相萃取气相色谱测定方法技术

本发明专利技术属于环境监测技术领域，具体涉及一种土壤中乙蒜素的固相萃取气相色谱测定方法，包括以下步骤：调节待测土壤样品pH至2～3，向酸性土壤中加入一定量的掩蔽剂混匀，再加入干燥剂混匀至土壤样品呈松散状；加入提取溶剂进行振荡提取，合并提取溶液，过滤浓缩，待净化；将提取浓缩液转移至活化后的净化柱中，采用洗脱溶剂洗脱，合并收集所有洗脱液后浓缩，得到待测样品；对待测样品进行气相色谱检测。该方法以盐酸羟胺为掩蔽剂，采用弗罗里硅土固相萃取柱，以二氯甲烷+正己烷(6+1)的混合溶液为土壤样品中乙蒜素的提取溶剂和洗脱溶剂，利用不同极性的二根毛细管色谱柱进行分离，双ECD检测器定性并定量；方法准确，简单可靠。

【技术实现步骤摘要】
一种土壤中乙蒜素的固相萃取气相色谱测定方法
本专利技术属于环境监测
，具体涉及一种土壤中乙蒜素的固相萃取气相色谱测定方法。
技术介绍
乙蒜素是我国自主研制成功的有机硫类杀菌剂，其作用机理是分子结构中的基团与菌体分子中含-SH基的物质反应，从而抑制菌体正常代谢，主要用于水稻、黄瓜、棉花、油菜等作物防治枯萎病、霜霉病、角斑病等病害。乙蒜素是高效无公害广谱仿生杀菌剂，兼具植物生长调节作用，能促进萌芽、提高发芽率、增加产量和改善品质，是复配杀菌剂农药的首选原料。乙蒜素又称“乙基硫代磺酸乙酯”，“抗菌剂402”，分子式为C4H10O2S2，挥发性强，有强腐蚀性。纯品为无色油状透明液体，加热至130～140℃分解，易溶于乙醚、氯仿、乙醇、冰醋酸等有机溶剂，在室温水中溶解度为1.2％；工业品为微黄色油状透明液体，具有大蒜臭味。属于中等毒性，其急性口服LD50小鼠为80毫克/千克，大鼠为140毫克/千克，对家兔和豚鼠皮肤有刺激作用。乙蒜素在常温及酸性条件下稳定，遇铁和强碱易分解。目前有研究人员研究乙蒜素在土壤和植物中的降解规律，如佘佳荣等用电子捕获检测器(ECD)-气相色谱法研究乙蒜素乳油在长沙、广州、山东、北京四地的黄瓜及土壤中的残留动态，研究得出，乙蒜素在黄瓜中半衰期分别为：广州3.47d，长沙1.37d，山东2.10d，北京3.18d；乙蒜素在土壤中半衰期分别为：广州3.34d，长沙2.46d，山东2.60，北京2.89d。另外，ZiLeiChen等用电子捕获检测器(ECD)-气相色谱法，以丙酮+石油醚(1+1)溶剂提取土壤中乙蒜素，用弗罗里硅土吸附剂净化，研究测定了乙蒜素在棉花生态环境中的动态变化，研究得出，乙蒜素在土壤和棉花植物中的半衰期分别为2.7d和5.2d。有关乙蒜素的检测方法研究的很少，现有用气相色谱法和液相色谱法测定乙蒜素的原药，如李敏用HPLC法测定蒜米中大蒜素和乙蒜素含量。但是，关于生态环境土壤中乙蒜素的测定，国内外至今没有标准方法，因此有必要研究土壤中乙蒜素含量的测定方法。目前已知的土壤中乙蒜素含量的测定方法研究中，王海萍在稻田水、土壤和稻米中乙蒜素的残留[J].农药，2009，48(3)：206～207一文中，以二氯甲烷于30℃下恒温振荡1h，提取稻田土壤中的乙蒜素残留量，气相色谱法ECD检测器测定；但该方法进行土壤样品分析时，气相色谱分离时间很短，乙蒜素在不到5分钟就分离出，且乙蒜素标准和样品保留时间差别很大，而且土壤样品是没有净化的，结果易有假阳性。另外，对于基质比较复杂的土壤样品，提取液若不净化，会造成测定结果偏高或假阳性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决现有技术中存在的上述问题，提出了一种土壤中乙蒜素的固相萃取气相色谱测定方法，该方法以盐酸羟胺为掩蔽剂，采用弗罗里硅土固相萃取柱，以二氯甲烷+正己烷(6+1)的混合溶液为土壤样品中乙蒜素的提取溶剂和洗脱溶剂，利用不同极性的二根毛细管色谱柱进行分离，双ECD检测器定性并定量；采用该固相萃取气相色谱法测定土壤中乙蒜素的残留量，方法准确，简单可靠。本专利技术的技术方案是：乙蒜素在碱性条件下或遇铁分解，专利技术人详细研究了测定土壤中乙蒜素的分析条件，发现乙蒜素在碱性条件下完全分解；随着氯化铁含量的增加，乙蒜素的测定回收率是逐渐降低的，当氯化铁含量增加时，乙蒜素的测定回收率迅速降低，氯化铁含量越高，乙蒜素几乎分解。并且乙蒜素是易挥发物质，随着环境温度的提高，乙蒜素在氮吹浓缩过程中挥发损失很厉害，并且现有的分析测定结果的重现性很差，为此本专利技术提供了一种土壤中乙蒜素的固相萃取气相色谱测定方法，包括以下步骤：(1)土壤样品前处理，调节待测土壤样品pH至2～3，向酸性土壤中加入一定量的掩蔽剂混匀，再加入干燥剂混匀至土壤样品呈松散状；加入提取溶剂进行振荡提取，合并提取溶液，过滤浓缩，待净化；(2)将步骤(1)中待净化的提取浓缩液转移至活化后的净化柱中，采用洗脱溶剂洗脱，合并收集所有洗脱液后浓缩，得到待测样品；(3)对步骤(2)中的待测样品进行气相色谱检测，以标准曲线外标法对待测土壤样品中乙蒜素进行定量。进一步的，所述步骤(1)中采用盐酸溶液调节待测土壤样品pH；掩蔽剂为能够将三价铁还原为二价铁的试剂，优选盐酸羟胺，掩蔽剂的加入量由土壤中铁含量决定；干燥剂选用无水硫酸钠，提取溶剂为二氯甲烷和正己烷的混合溶液。如果样品体系中存在三价铁，乙蒜素遇三价铁易分解，导致回收率很低；而二价铁对测定乙蒜素的含量影响不大；因此，选择向样品中加入掩蔽剂，在酸性条件下能把三价铁还原成二价铁，以除去样品中的三价铁。进一步的，所述步骤(1)中采用1+1盐酸溶液调节待测土壤样品pH；提取溶剂为二氯甲烷和正己烷(6+1)的混合溶液，提取次数为2～3次。进一步的，所述步骤(2)中净化柱采用弗罗里硅土固相萃取柱，并采用二氯甲烷和正己烷(6+1)的混合溶液进行活化。进一步的，所述步骤(2)中的洗脱溶剂包括二氯甲烷、二氯甲烷+10％正己烷、正己烷+25％乙酸乙酯、二氯甲烷+5％甲醇、二氯甲烷+正己烷(6+1)，优选洗脱溶剂为二氯甲烷+正己烷(6+1)混合溶液。进一步的，所述步骤(3)中的检测采用具有双ECD检测器、双色谱柱的气相色谱仪。乙蒜素是易挥发性物质，出峰时间比较早，但在做实际样品时，有一种未知干扰物质和乙蒜素的保留时间很接近，几乎重叠，影响准确定量。为此，优化色谱分离条件，尽量让乙蒜素和干扰物质分开，最后确定的最佳的色谱分离条件为：所述步骤(3)中的气相色谱条件：气相色谱柱：尺寸为30m×0.53mm×1.5μm的DB-5色谱柱或尺寸和性能与该DB-5色谱柱相当的色谱柱、尺寸为30m×0.53mm×1.0μm的DB-1701或尺寸和性能与该DB-1701色谱柱相当的色谱柱；进样口温度：230℃；进样量：2.0μL；载气：N2；进样方式：不分流进样，0.75min分流，分流比：30mL/min；流速：4.5mL/min；ECD检测器温度：300℃，尾吹气流量：60mL/min；程序升温：初始温度50℃，以4℃/min的升温速率升温至120℃，保持4min；然后以6℃/min的升温速率升温至200℃，接着以60℃/min的升温速率升温至280℃，保持6min。本专利技术的有益效果：(1)本专利技术首次在酸性条件下，以盐酸羟胺为掩蔽剂，以二氯甲烷+正己烷(6+1)的混合溶液为提取溶剂提取土壤样品中的乙蒜素；并采用弗罗里硅土固相萃取柱为固相萃取净化柱，首次以二氯甲烷+正己烷(6+1)混合溶液为洗脱溶剂，研究建立了固相萃取气相色谱法测定土壤中乙蒜素含量的分析方法；该分析方法以不同极性的二根色谱柱分离，双ECD检测器定性并定量，固相萃取气相色谱法测定土壤中乙蒜素的残留量，方法准确，简单可靠，方法适用范围广。(2)本专利技术所提供的测定方法，控制在酸性条件下，并给出最佳掩蔽剂盐酸羟胺掩蔽剂，解决了土壤中乙蒜素在提取时遇铁和碱易分解的问题，提高测定回收率，填补了目前土壤乙蒜素含量测定本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种土壤中乙蒜素的固相萃取气相色谱测定方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)土壤样品前处理，调节待测土壤样品pH至2～3，向酸性土壤中加入掩蔽剂混匀，再加入干燥剂混匀至土壤样品呈松散状；加入提取溶剂进行振荡提取，合并提取溶液，过滤浓缩，待净化；/n(2)将步骤(1)中待净化的提取浓缩液转移至活化后的净化柱中，采用洗脱溶剂洗脱，合并收集所有洗脱液后浓缩，得到待测样品；/n(3)对步骤(2)中的待测样品进行气相色谱检测，以标准曲线外标法对待测土壤样品中乙蒜素进行定量。/n

【技术特征摘要】
1.一种土壤中乙蒜素的固相萃取气相色谱测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)土壤样品前处理，调节待测土壤样品pH至2～3，向酸性土壤中加入掩蔽剂混匀，再加入干燥剂混匀至土壤样品呈松散状；加入提取溶剂进行振荡提取，合并提取溶液，过滤浓缩，待净化；
(2)将步骤(1)中待净化的提取浓缩液转移至活化后的净化柱中，采用洗脱溶剂洗脱，合并收集所有洗脱液后浓缩，得到待测样品；
(3)对步骤(2)中的待测样品进行气相色谱检测，以标准曲线外标法对待测土壤样品中乙蒜素进行定量。


2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤(1)中采用盐酸溶液调节待测土壤样品pH；掩蔽剂为能够将三价铁还原为二价铁的试剂，优选盐酸羟胺，掩蔽剂的加入量由土壤中铁含量决定；干燥剂选用无水硫酸钠，提取溶剂为二氯甲烷和正己烷的混合溶液。


3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤(1)中采用1+1盐酸溶液调节待测土壤样品pH；提取溶剂为二氯甲烷和正己烷(6+1)的混合溶液，提取次数为2～3次。


4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤(2)中净化柱采用弗罗里硅土固相萃取柱，并采用二氯甲烷和正己烷(6+1)的混合溶液进行活化。...

【专利技术属性】
技术研发人员：于彦彬，徐丹，单宇，李兰英，但宝华，
申请(专利权)人：山东中检理化环境技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37