干预BOK在制备治疗新冠肺炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，公开了干预BOK在制备治疗新冠肺炎药物中的应用。为给新冠肺炎的综合治疗寻找一种新的免疫治疗方案，本发明专利技术对新冠肺炎患者肺组织进行研究发现，BOK在新冠肺炎患者的肺组织细胞内的表达量增加，对BOK基因敲除能抑制新冠病毒膜蛋白诱导人源肺细胞和血管内皮细胞凋亡的作用，通过对小鼠行气管注射慢病毒表达针对BOK的shRNA，BOK的敲减可以抑制新冠病毒膜蛋白诱导肺组织凋亡的作用，提示BOK有望应用于新冠肺炎的综合治疗中，制备成治疗新冠肺炎药物的形式，以减轻新冠肺炎患者肺部损伤和肺泡腔液渗入，适用于新冠肺炎过程中肺组织器官的保护作用。用于新冠肺炎过程中肺组织器官的保护作用。用于新冠肺炎过程中肺组织器官的保护作用。

【技术实现步骤摘要】
干预BOK在制备治疗新冠肺炎药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，更具体地，涉及干预BOK在制备治疗新冠肺炎药物中的应用。

技术介绍

[0002]冠状病毒病2019(COVID
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19)是由急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS
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CoV
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2)引起的一种呼吸系统疾病，大多数COVID
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19患者表现出轻度至中度症状，但约15％进展为严重的肺炎，约5％最终发展为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)，败血性休克和/或多器官功能衰竭。临床治疗的主要包括对症管理和氧气治疗，并为呼吸衰竭患者提供机械通气。尽管正在积极测试包括核苷酸类似物remdesivir在内的几种抗病毒药物，但尚未存在治疗COVID
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19的特效药。除了直接针对病毒或阻断病毒进入的疫苗开发和方法外，解决感染的病理学问题的治疗也成为主要关注点。
[0003]SARS
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2感染宿主细胞可导致细胞凋亡，进一步导致器官组织损伤及病变，尤其是肺泡表皮及上皮细胞和紧邻的血管内皮细胞。这些组成宿主免疫“防线/屏障”的细胞的死亡，一方面导致病毒在体内的扩散和感染，加重患者病情，甚至导致继发性感染；另一方面，凋亡的肺上皮细胞和血管内皮细胞会造成组织液渗漏，引起生理功能紊乱。新冠肺炎肺死亡患者肺切片免疫组化，肺表皮细胞受到SARS
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CoV
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2的侵害后导致的呼吸道病变，包括支气管和肺泡组织的渗出、肺泡壁破坏、肺泡腔含有各种脱落细胞的粘液，使得氧气无法到达肺泡表面进行氧交换。病理报告提示开发一种减轻，甚至是抑制支气管及肺泡内因细胞凋亡造成的碎片脱落和肺泡腔渗出液，能改善肺组织供氧，挽救患者生命。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术中缺乏能够抑制肺泡内细胞凋亡的方法或药剂的缺陷，首先提供了一种用于治疗新冠肺炎的药物，所述药物能减轻新冠病毒感染引起的肺泡内的细胞凋亡和碎片脱落。
[0005]本专利技术的目的通过以下技术方案予以实现：
[0006]一种用于治疗新冠肺炎的药物，所述药物能够抑制或拮抗BOK蛋白表达。
[0007]B淋巴细胞瘤
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2基因卵巢癌杀伤蛋白(BCL
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2ovarian killer，BOK)是介导细胞内源性凋亡中重要途径的参与分子。本专利技术通过对新冠肺炎患者病理切片研究发现，SARS
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2感染的肺组织细胞呈现强阳性表达的BOK细胞与凋亡活化酶共染，分子水平研究显示SARS
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2的膜蛋白能通过BOK介导细胞凋亡，敲除BOK能废除膜蛋白诱导细胞凋亡的能力，动物体内实验显示，表达SARS
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2膜蛋白的慢病毒感染会导致肺部细胞凋亡和脱落，通过敲减BOK能减轻膜蛋白引起的肺组织凋亡。
[0008]优选的，所述药物能够抑制BOK蛋白介导的肺组织内细胞凋亡。
[0009]优选的，所述药物还包括药学上可以接受的辅剂。通过与药学上可以接受的辅剂配合使用，能够保证治疗效果的同时，还能够提高药物的安全性，有效性和稳定性。
[0010]更优选的，药物的剂型为注射给药剂型或者经胃肠道给药剂型，以增加药物的适用范围；具体地，经胃肠道给给药剂型包括常用的散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂等；注射给药剂型包括常用的注射剂(例如静脉注射剂、肌内注射剂、皮下注射剂、皮内注射剂)。更优选的，当所述药物的剂型为注射给药剂型时，使用时将药物与生理盐水混合制成溶液即可。
[0011]本专利技术通过研究发现：SARS
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2侵染宿主细胞后合成膜蛋白依赖BOK分子介导细胞凋亡，导致肺泡细胞脱落，凋亡抑制剂和BOK敲减能抑制膜蛋白介导的肺组织凋亡。
[0012]因此，本专利技术还提供特异性抑制BOK蛋白表达的物质在制备治疗新冠肺炎的药物中的应用。
[0013]本专利技术是通过BOK相关药物是抑制机体感染SARS
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2后细胞过度凋亡，抑制肺泡通透性来治疗新冠肺炎。因此，本专利技术还提供特异性抑制BOK蛋白表达的物质在制备治疗由新冠肺炎病毒引起的肺部细胞凋亡的药物中的应用；优选的，所述肺部细胞为肺泡细胞。
[0014]优选的，所述特异性抑制BOK蛋白表达的物质包括以下任一种：
[0015](i)包括但不限于以DDX19A/NOX1转录本为靶序列，且能够抑制DDX19A/NOX1基因表达产物表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸；
[0016](ii)包括但不限于能表达或形成(i)中所述小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸构建体；
[0017](iii)包括但不限于含有DDX19A/NOX1互补序列，且能够在转入体内后形成抑制DDX19A/NOX1基因表达产物表达或基因转录的干扰分子的构建体；
[0018](iv)抑制或敲除DDX19A/NOX1基因序列后的免疫相关细胞、其分化细胞或构建体。
[0019]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0020]本专利技术对新冠肺炎患者肺组织进行研究发现，BOK在新冠肺炎患者的肺组织细胞内的表达量增加，对BOK基因敲除能抑制新冠病毒膜蛋白诱导人源肺细胞和血管内皮细胞凋亡的作用，通过对小鼠行气管注射慢病毒表达针对BOK的shRNA，BOK的敲减可以抑制新冠病毒膜蛋白诱导肺组织凋亡的作用，提示BOK有望应用于新冠肺炎的综合治疗中，制备成治疗新冠肺炎药物的形式，以减轻新冠肺炎患者肺部损伤和肺泡腔液渗入，适用于新冠肺炎过程中肺组织器官的保护作用。
附图说明
[0021]图1为SARS
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2膜蛋白的瞬转表达对人源肺细胞和血管内皮细胞凋亡的影响，图1A为流式分析图，图1B为统计柱状图；
[0022]图2为采用WB检测SARS
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2膜蛋白的瞬转表达对细胞内凋亡相关因子的表达的影响；
[0023]图3A为采用切片观察和荧光染色检测SARS
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2膜蛋白和BOK敲减对小鼠肺部细胞凋亡和凋亡相关因子的影响；图3B和图3C为采用WB检测SARS
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2膜蛋白和BOK敲减对小鼠肺部细胞凋亡相关因子的影响；
[0024]图4A为新冠肺炎患者肺部病理组织切片免疫组化染色(HE)，图4B、图4C和图4D显示胞质内的病毒包涵体、肺泡表皮脱屑、支气管堵塞的脱落细胞和充满嗜酸性粘液的肺泡结构；
[0025]图5为采用荧光染色检测健康人和新冠肺炎患者肺组织内本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于治疗新冠肺炎的药物，其特征在于，所述药物能够抑制或拮抗BOK蛋白表达。2.根据权利要求1所述的用于治疗新冠肺炎的药物，其特征在于，所述药物能够抑制BOK蛋白介导的肺组织内细胞凋亡。3.根据权利要求2所述的用于治疗新冠肺炎的药物，其特征在于，还包括药学上可以接受的辅剂。4.特异性抑制BOK蛋白表达的物质在制备治疗新冠肺炎的药物中的应用。5.特异性抑制BOK蛋白表达的物质在制备治疗由新冠肺炎病毒引起的肺部细胞凋亡的药物中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述肺部细胞为肺泡细胞。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述特异性抑制BOK...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄曦，杨扬，王之影，
申请(专利权)人：中山大学附属第五医院，
类型：发明
国别省市：