使用微通道对血液进行预处理以对血细胞进行分级制造技术

在通过使血液流过微通道对血液中的细胞分级之前，使包含细胞的血液与多孔材料的多孔表面接触(S80)。在一个实施例中，将多孔材料添加到包含细胞的血液中并与之混合在一起，从而使包含细胞的血液与多孔表面接触。在一个实施例中，多孔材料是其中多孔表面由多糖形成的颗粒。将多孔材料悬浮在液体中，并在这种状态下添加到包含细胞的血液中。在一个实施例中，颗粒具有预定的粒度分布。其标准体积累积分布中的中值粒径d50V为25μm至280μm。的中值粒径d50V为25μm至280μm。的中值粒径d50V为25μm至280μm。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用微通道对血液进行预处理以对血细胞进行分级


[0001]本专利技术涉及血液的预处理，特别是涉及使用微通道对血液进行预处理以对血细胞进行分级。本专利技术还涉及用于血液预处理的评估方法。

技术介绍

[0002]专利文献1描述了使用微通道对血细胞进行分级。
[0003]引文清单
[0004]专利文献
[0005]专利文献1：国际专利公开第WO2018/123220号。

技术实现思路

[0006]技术问题
[0007]当血液流过微通道时，微通道中可能会发生堵塞。本专利技术的目的是提供一种适合于消除这种堵塞的方法。
[0008]解决方案
[0009]<1>一种用于血液预处理的方法，包括：在使血液流过微通道以对血液中的细胞进行分级之前，使包含细胞的血液与多孔材料的多孔表面接触。
[0010]<2>根据<1>的预处理的方法，其中通过将多孔材料添加到包含细胞的血液中并使它们混合，使包含细胞的血液与多孔表面接触。
[0011]<3>根据<2>的预处理的方法，其中所述多孔材料具有多孔表面包含多糖的颗粒，并且作为在液体中的悬浮液添加到包含细胞的血液中。
[0012]<4>根据<3>的预处理的方法，其中所述颗粒具有粒度分布，其基于体积的累积分布的中值粒径d50V为25μm至280μm。
[0013]<5>根据<4>的预处理的方法，其中当所述多孔材料用于凝胶过滤色谱法时，所述多孔材料能够分级分离DNA，并且所述多孔材料对DNA的排除极限为45个碱基对或多于45个碱基对。
[0014]<6>根据<4>的预处理的方法，其中当所述多孔材料用于凝胶过滤色谱法并且满足所述多孔材料对蛋白质分级分离的下限为1
×
104Da或大于1
×
104Da和所述多孔材料对蛋白质分级分离的上限为4
×
106Da或大于4
×
106Da的至少任一个条件时，所述多孔材料能够分级分离蛋白质。
[0015]<7>根据<4>所述的预处理的方法，其中从所述颗粒中预先去除粒径小于或等于截止直径的小颗粒，和截止直径为25μm至100μm。
[0016]<8>根据<3>的预处理的方法，其中要与多孔材料的表面接触的血液是未用另一种液体稀释的全血，在与多孔材料的表面接触后，将全血用另一种液体稀释；或者要与多孔材料表面接触的血液是预先用另一种液体稀释的全血。
[0017]<9>一种用于对血液中的细胞进行分级的方法，其包括：根据<3>所述的预处理的
方法对包含细胞的血液进行预处理；然后使经预处理的血液流过微通道，从而对血液中的细胞进行水力分级。
[0018]<10>根据<9>的分级方法，其中在预处理中，颗粒具有粒度分布，其基于体积的累积分布的中值粒径d50V为25μm至280μm，并且预先通过筛分将小于或等于截止直径的小颗粒从颗粒中去除，并且在分级中，在微通道中进行水力分级的点的上游设置有使血液平面流动的平坦进入通道，并且截止直径大于该进入通道的横截面的短边方向上的长度。
[0019]<11>根据<10>所述的分级方法，其中在所述进入通道中以穿过血液流的方式设置有柱密集区，沿短边方向设立柱密集区中的各个柱。
[0020]<12>根据<11>的分级方法，其中所述分级富集胎儿有核红细胞(fNRBC)、循环肿瘤细胞(CTC)和骨髓瘤细胞中的任一种。
[0021]<13>一种用于血液预处理的评估方法，包括：在对包含细胞的血液进行预处理之后，使血液流过微通道，其中在微通道中以横穿血液流的方式设置有柱密集区；在血液开始流动一定时间之后，观察在柱密集区及在柱密集区下游与之邻近的柱稀疏区段散布的碎屑。
[0022]<14>根据<13>所述的评估方法，其中所述区段被最上游的柱密集区、邻近于最上游的柱密集区的柱密集区和微通道的侧壁包围，当在平面图中看到该区段时，碎屑相对于该区段散布的比例被确定为面积比。
[0023]<15>根据<14>所述的评估方法，其中通过使包含细胞的血液与测试材料的表面接触来进行预处理。
[0024]<16>根据<14>所述的评估方法，其中通过将测试物质添加到包含细胞的血液中并混合来进行预处理。
[0025]专利技术的有益效果
[0026]本专利技术可以提供一种适合于消除微通道中的堵塞的方法。
[0027]附图的简要说明
[0028][图1]图1是包括预处理步骤的流程图。
[0029][图2]图2是多孔颗粒的粒度分布。
[0030][图3]图3是微通道的平面图。
[0031][图4]图4是微通道的局部平面图。
[0032][图5]图5是微通道的详细局部透视图。
[0033][图6]图6是进入通道的透视图。
[0034][图7]图7是微通道的观察图像1(上排)及其略图(下排)。
[0035][图8]图8是评估预处理的操作的流程图。
[0036][图9]图9是微通道的观察图像2(上排)及其略图(下排)。
[0037][图10]图10是堵塞率的图表1。
[0038][图11]图11是堵塞率的图表2。
具体实施方式
[0039]<1、血液预处理方法的定位>
[0040]本专利技术的一个方面涉及血液的预处理。在描述血液预处理的细节之前，将参考附
图描述预处理的定位。在图中，示出了包括预处理血液的步骤S80的流程图。在执行步骤S80之前，在步骤S79中预先从活体采集血液。
[0041]在对血液中的细胞进行分级的步骤S81之前执行预处理步骤S80。对血液中的细胞进行分级意味着根据血液中细胞的大小对其进行分级分离。特别地，通过使血液流过微通道来执行步骤S81。步骤S81中的分级的示例是在微通道内执行的水力分级。微通道具有微米级的通道结构。这种微通道结构适合于血液分级(专利文献1)。具有用于血液分级的微通道本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于血液预处理的方法，包括在使血液流过微通道以对血液中的细胞进行分级之前，使包含细胞的血液与多孔材料的多孔表面接触。2.根据权利要求1所述的预处理的方法，其中通过将多孔材料添加到包含细胞的血液中并使它们混合，使包含细胞的血液与多孔表面接触。3.根据权利要求2所述的预处理的方法，其中所述多孔材料具有多孔表面包含多糖的颗粒，并且作为在液体中的悬浮液添加到包含细胞的血液中。4.根据权利要求3所述的预处理的方法，其中所述颗粒具有粒度分布，其基于体积的累积分布的中值粒径d50V为25μm至280μm。5.根据权利要求4所述的预处理的方法，其中当所述多孔材料用于凝胶过滤色谱法时，所述多孔材料能够分级分离DNA，并且所述多孔材料对DNA的排除极限为45个碱基对或多于45个碱基对。6.根据权利要求4所述的预处理的方法，其中当所述多孔材料用于凝胶过滤色谱法并且满足多孔材料对蛋白质分级分离的下限为1
×
104Da或大于1
×
104Da和多孔材料对蛋白质分级分离的上限为4
×
106Da或大于4
×
106Da的至少任一个条件时，所述多孔材料能够分级分离蛋白质。7.根据权利要求4所述的预处理的方法，其中预先将粒径小于或等于截止直径的小颗粒从颗粒中去除，和截止直径为25μm至100μm。8.根据权利要求3所述的预处理的方法，其中与多孔材料的表面接触的血液是未用另一种液体稀释的全血，在与多孔材料的表面接触后，将全血用另一种液体稀释；或与多孔材料表面接触的血液是预先用另一种液体稀释的全血。9.一...

【专利技术属性】
技术研发人员：久保知大，金岩知之，山中洋昭，关亮平，
申请(专利权)人：TL基因体科技株式会社，
类型：发明
国别省市：