鹿角蕨的组培快繁方法技术

本发明专利技术提供一种鹿角蕨的组培快繁方法。本发明专利技术以绿孢鹿角蕨的孢子为材料，从孢子萌发、孢子体诱导、孢子体带根增殖以及外源物质处理生根苗以提高其适应性等方面进行了试验比较，并建立了绿孢鹿角蕨的组培快繁体系，优化其组培工艺、提高移栽炼苗成活率，实现了绿孢鹿角蕨的组培苗批量化繁育。本发明专利技术为绿孢鹿角蕨的产业化开发及利用提供了技术支撑，同时也为绿孢鹿角蕨的种群恢复、野生资源保护提供了保障。该方法同样适用于二歧鹿角蕨的组培快繁。该方法同样适用于二歧鹿角蕨的组培快繁。

【技术实现步骤摘要】
鹿角蕨的组培快繁方法


[0001]本专利技术涉及植物组培
，具体地说，涉及鹿角蕨(Platycerium)的组培快繁方法。

技术介绍

[0002]绿孢鹿角蕨(Platycerium wallichii Hooker)是水龙骨科(Polypodiaceae)鹿角蕨属(Platycerium)植物，为典型的热带雨林附生蕨类，该属约有15种，分布于非洲、热带亚洲和热带美的热带雨林中。中国仅有一种，即绿孢鹿角蕨，野外分布于云南省德宏州盈江县、陇川县和瑞丽市。绿孢鹿角蕨姿态优美，作为观叶植物中的珍稀物种，具有较高的观赏价值；作为热带雨林的标志物种，可为热带雨林的生态恢复提供依据，具有较高的生态价值；作为蕨类植物中的进化类群，对研究植物种间协同进化关系具有重要意义，具有较高的科学价值；此外具有药用价值，被当地人用作跌打药。目前绿孢鹿角蕨赖以生存的森林环境由于热区开发而遭到严重破坏，使其野生资源日益减少。加之绿孢鹿角蕨叶形奇特，观赏期长、易于管护，作为室内观叶植物中珍贵稀有的精品，一株株型优美的绿孢鹿角蕨在市场上可售卖数百元至上千元，野外残存的绿孢鹿角蕨资源因人为采挖获取暴利而进一步流失。绿孢鹿角蕨现已被列为国家二级保护植物，并有学者建议应将其列入一级保护并尽早进行人工有性繁殖研究。鹿角蕨属植物的栽培品种中，开发利用较好的有荷兰、美国加州圣迭戈、罗伯特和齐森亨尼等。然而市场上的绿孢鹿角蕨绝大部分来源于直接进口，国内缺乏规模化的繁殖与栽培，有关其市场开发在国内还属于空白阶段。因此，有必要开展绿孢鹿角蕨的繁殖技术研究，有效保护我国野生绿孢鹿角蕨资源的同时，促进其野生居群的扩大和可持续开发利用。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种鹿角蕨的组培快繁方法。
[0004]为了实现本专利技术目的，本专利技术提供一种鹿角蕨(Platycerium)的组培快繁方法，包括以下步骤：
[0005]1)采集的鹿角蕨孢子经消毒后，接种在1/2MS或改良Knops培养基上进行孢子萌发及孢子体诱导；
[0006]2)待孢子体生长至叶宽0.5
‑
1.0cm(优选0.5cm)，转接至MS培养基上进行孢子体增殖，或者，转接至培养基I上进行GGB诱导。
[0007]所述培养基I为MS+6
‑
BA 0.5
‑
1.0mg
·
L
‑1+NAA 1.0
‑
1.5mg
·
L
‑1+AC 0.1
‑
0.3g
·
L
‑1；优选MS+6
‑
BA0.5 mg
·
L
‑1+NAA 1.0mg
·
L
‑1+AC 0.1g
·
L
‑1。
[0008]上述各步骤使用的培养基中琼脂含量为4
‑
6g
·
L
‑1，pH 5.8
‑
6.0(优选pH 5.8)。
[0009]前述方法还包括步骤3)：待孢子体生长至叶宽1
‑
2cm，转接于含有200
‑
300mg
·
L
‑1(优选200mg
·
L
‑1)磷酸二氢钾的1/2MS培养基中进行组培苗的培养。磷酸二氢钾能增强植株持水力。
[0010]进一步地，待孢子体生长至叶宽3
‑
4cm(移栽炼苗的最佳时机，成活率较高)，移栽于培养基质(如泥炭藓)中进行培养。
[0011]所述培养基质还可以是泥炭藓与蛭石的混合物，其中泥炭藓与蛭石的体积比为3:1。
[0012]培养过程中，可辅以0.1
‑
0.3mg
·
L
‑1乙烯利(优选0.1mg
·
L
‑1)和/或400
‑
600mg
·
L
‑1(优选500mg
·
L
‑1)多效唑对组培苗进行叶面喷施。喷施乙烯利能有效提高组培苗木质化；喷施多效唑能有效抑制植株失水，提高木质化程度。
[0013]前述的方法，培养条件均为温度23
±
2℃，光照强度150
‑
200μmol
·
m
‑2·
s
‑1，光周期12h
·
d
‑1。
[0014]步骤1)中消毒的方法为：将鹿角蕨孢子用0.1或0.2％氯化汞溶液消毒4
‑
6min(优选5min)后，用无菌水冲洗3
‑
5次。
[0015]优选地，所述鹿角蕨为绿孢鹿角蕨(Platycerium wallichii)、二歧鹿角蕨(Platycerium bifurcatum)。
[0016]本专利技术以绿孢鹿角蕨的孢子为材料，从孢子萌发、孢子体诱导、孢子体带根增殖，以及外源物质处理生根苗以提高其适应性等方面进行了试验比较，并建立了绿孢鹿角蕨的组培快繁体系，优化其组培工艺、提高移栽炼苗成活率，实现了绿孢鹿角蕨的组培苗批量化繁育。本专利技术为绿孢鹿角蕨的产业化开发及利用提供了技术支撑，同时也为绿孢鹿角蕨的种群恢复、野生资源保护提供了保障。该方法同样适用于二歧鹿角蕨的组培快繁。
附图说明
[0017]图1为本专利技术较佳实施例中绿孢鹿角蕨配子体状态及诱导孢子体情况(60d)。a：从左到右依次为MS、1/2MS、1/4MS、Knops；b：1/2MS上诱导出孢子体。
[0018]图2为本专利技术较佳实施例中不同培养基中绿孢鹿角蕨孢子体长势。a：处理1(60d)；b：处理2(60d)；c：处理3(60d)；d：处理4(40d)；e：处理4(60d)。
[0019]图3为本专利技术较佳实施例中组培苗持水力。a：组培苗含水量变化；b：组培苗失水速率变化。
[0020]图4为本专利技术较佳实施例中组培苗持水力。a：组培苗含水量变化；b：组培苗失水速率变化。
[0021]图5为本专利技术较佳实施例中组培苗生长情况(30d)。a：处理CK(对照)；b：处理1(喷施脱落酸)；c：处理2(喷施磷酸二氢钾)；d：处理3(喷施乙烯利)；e：处理4(喷施多效唑)。
[0022]图6为本专利技术较佳实施例中组培苗长势图。a：规格为＜1cm(左)、1
‑
2cm(右)；b：规格为3
‑
4cm；c：规格为＞4cm的生长状态。
具体实施方式
[0023]本专利技术涉及的术语：
[0024]6‑
BA：6
‑
苄基腺嘌呤；
[0025]NAA：萘乙酸；
[0026]AC：活性炭；
[0027]MS培养基和改良Knops培养基配方如下：
[0028][0029][0030]1/2MS培养基：在MS培养基的基础上，将本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.鹿角蕨(Platycerium)的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：1)采集的鹿角蕨孢子经消毒后，接种在1/2MS或改良Knops培养基上进行孢子萌发及孢子体诱导；2)待孢子体生长至叶宽0.5
‑
1.0cm，转接至MS培养基上进行孢子体增殖，或者，转接至培养基I上进行GGB诱导；所述培养基I为MS+6
‑
BA 0.5
‑
1.0mg
·
L
‑1+NAA 1.0
‑
1.5mg
·
L
‑1+AC 0.1
‑
0.5g
·
L
‑1；上述各步骤使用的培养基中琼脂含量为4
‑
6g
·
L
‑1，pH 5.8
‑
6.0。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所用培养基的pH 5.8。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括步骤3)：待孢子体生长至叶宽1
‑
2cm，转接于含有200
‑
300mg
·
L
‑1磷酸二氢钾的1/2MS培养基中进行组培苗的培养。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，待孢子体生长至叶宽3
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：向建英，段杰秋，唐军荣，唐甜甜，孙大宽，邓国宾，张媛，
申请(专利权)人：西南林业大学，
类型：发明
国别省市：