一种检测汞离子的核酸适配体试纸条制造技术

本实用新型专利技术属于重金属快速检测领域，涉及一种检测汞离子的核酸适配体试纸条。本实用新型专利技术由样品垫、释放垫、硝酸纤维素膜、吸水纸顺次相邻叠压并固定在背板上组成，选配外卡套和配套试剂。其中，释放垫含有纳米金标记的汞离子核酸适配体溶液，硝酸纤维素膜上有检测线和质控线，检测线包被生物素化探针1‑链霉亲和素溶液，质控线包被生物素化探针2‑链霉亲和素溶液，配套试剂为PBS缓冲液，外卡套上表面有样品添加孔和结果观察视窗。本实用新型专利技术结构简单、使用方便、成本低，且具有灵敏度高、特异性好等优点，适用于医药、环境、食品等领域汞离子的快速检测。

【技术实现步骤摘要】
一种检测汞离子的核酸适配体试纸条
本技术属于重金属快速检测领域，涉及一种检测汞离子的核酸适配体试纸条，适用于医药、环境、食品等领域汞离子的快速检测。
技术介绍
随着近年我国各行各业的迅猛发展，现代工业崛起，工业上汞的使用也越来越多。工业上除了使用金属汞以外还有许多汞的化合物，这些汞的污染物通过水和食物进入人的消化道，通过蒸汽进入人的皮肤或呼吸道，最终进入人体，危害人体健康。汞离子可以与体内的多种酶和蛋白质结合，使蛋白质和核酸的合成途径受阻，急性中毒可导致急性肺水肿和急性肾衰竭。因此，汞离子的检测在医药、环境、食品等领域都有十分重要的意义。目前原子吸收光谱法、电耦合等离子质谱法、冷蒸汽原子荧光光谱法是检测汞离子的主要方法，但这些方法均需要对样品进行净化、富集，操作步骤繁琐，耗时费力，且仪器价格昂贵，需要专业人员操作，不适合大批量样品的快速检测和现场检测。因此急需一种携带轻便、操作简单、价格低廉的快速检测方法。纳米金免疫层析法是近年来迅速发展的一种新型分析技术，其特点是简单快捷、成本低、无污染，非常适合于大批量样品的现场快速检测。但是抗体开发周期长、成本高，且难以有效识别金属离子。核酸适配体是通过SELEX技术筛选测序得到的一种新型识别分子，制备方法简单、性能稳定、易于修饰，具有高亲和力和高特异性的特点，可以有效结合金属离子。将纳米金技术和核酸适配体技术结合能研制一种快速、灵敏、高效检测汞离子的核酸适配体试纸条具有十分重要的意义。本专利技术研发一种检测汞离子的核酸适配体试纸条，满足医药、环境、食品等领域汞离子的快速检测。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种快速、灵敏、高效检测汞离子的核酸适配体试纸条，只需将样液缓慢加入到样品垫上，10min后依据质控线、检测线的显色强度便可实现样品中汞离子的快速检测。本技术结构简单、使用方便、成本低，适用于医药、环境、食品等领域汞离子的快速检测。为了实现本专利技术的目的，本专利技术的技术方案如下：一种检测汞离子的核酸适配体试纸条，由样品垫(1)、释放垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水纸(6)顺次相邻叠压并固定在背板(7)上组成，选配外卡套(8)和配套试剂(9)。硝酸纤维素膜(3)上有检测线(4)和质控线(5)。最优的，试纸条长68mm～71mm，宽4mm；相邻叠压宽度为1-2mm；样品垫的下端与背板的下端对齐，吸水纸的上端与背板的上端对齐。最优的，样品垫为玻璃纤维滤纸。处理过程为在含有0.2％聚乙烯吡咯烷酮、0.8％吐温-20的20mmol/LPBS缓冲液中浸泡30min后，37℃烘干16h。最优的，释放垫为玻璃纤维滤纸，含有纳米金标记的汞离子核酸适配体溶液。汞离子核酸适配体的核苷酸序列为5’-CGGTTGCACTTGTTTGTTAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-3’，其3’端采用巯基修饰。最优的，检测线靠近释放垫一侧，质控线靠近吸水纸一侧；检测线包被生物素化探针1-链霉亲和素溶液，生物素化探针1的核苷酸序列为：5’-AACAAACAAGTGCAACCG-3’，其3’端标记生物素；质控线包被生物素化探针2-链霉亲和素溶液，生物素化探针2的核苷酸序列为5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTT-3’，其3’端标记生物素；链霉亲和素为巯基化链霉亲和素。最优的，背板为聚苯乙烯背板。最优的，外卡套为聚丙烯塑料、聚乙烯塑料或丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物树脂材质，用于放置固定有样品垫、释放垫、硝酸纤维素膜、吸水纸的背板；外卡套上表面有2个镂空，分别为样品添加孔和结果观察视窗，其中，样品添加孔刻有“S”标记，结果观察视窗刻有“C”、“T”，分别对应质控线、检测线。最优的，配套试剂为PBS缓冲液，浓度为10～20mmol/L。有益效果：本专利技术以纳米金标记核酸适配体制成，具有较高的灵敏度和特异性，操作简便、便于携带运输且成本较低，具有较高的便捷应用性能。只需将样液缓慢加入到样品垫上，10min后依据质控线、检测线的显色强度便可实现样品中汞离子的快速检测。附图说明图1，试纸条的剖面结构图其中：1，样品垫；2，释放垫；3，硝酸纤维素膜；4，检测线；5，质控线；6，吸水纸；7，背板；8，外卡套；9，配套试剂；10，样品添加孔；11，结果观察视窗。图2，试纸条的俯视图其中：1，样品垫；2，释放垫；3，硝酸纤维素膜；4，检测线；5，质控线；6，吸水纸；7，背板；8，外卡套；9，配套试剂；10，样品添加孔；11，结果观察视窗。图3，试纸条的检测结果判定图其中：4，检测线；5，质控线。具体实施方式结合实施例对本专利技术做进一步说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所做出的任何变更或改进，均属于本专利技术的保护范围。实施例一将样品滴加到样品垫(1)上，10min后依据质控线、检测线的显色强度便可实现样品中汞离子的快速检测。当质控线(5)显示出红色条带，且检测线(4)显色明显弱于质控线(C)或不显色，判定为阳性，如图3c、3d所示；当质控线(5)显示出红色条带，且检测线(4)显示强于质控线(5)或于质控线(5)显色强度相当，判定为阴性，如图3a、3b所示；当质控线(5)不显色，则无论检测线显色与否，该次检测结果均判定为无效，如图3e、3f所示。实施例二使用20mmol/LPBS缓冲液配制浓度为0.01mg/L的汞离子标准品溶液，缓慢加入到样品垫上，10min后观察试纸条显色情况。结果，质控线显示出红色条带，检测线不显色，判定为阳性。实施例三使用20mmol/LPBS缓冲液缓慢加入到样品垫上，10min后观察试纸条显色情况。结果，质控线和检测线均显示出红色条带，且检测线显示强于质控线，判定为阴性。上述实施例仅供说明本技术之用，而并非是对本技术专利的限制；应当指出的是，对于本领域的普通技术人员，在不脱离本技术构思的情况下，还可以做出各种变化和变型，这些都属于本技术的保护范围；因此，凡是跟本技术权利要求范围所做的均等变化与修饰，均应属于本技术权利要求的覆盖范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测汞离子的核酸适配体试纸条，其特征在于，由样品垫(1)、释放垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水纸(6)、背板(7)、外卡套(8)和配套试剂(9)组成；硝酸纤维素膜(3)上有检测线(4)和质控线(5)。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测汞离子的核酸适配体试纸条，其特征在于，由样品垫(1)、释放垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水纸(6)、背板(7)、外卡套(8)和配套试剂(9)组成；硝酸纤维素膜(3)上有检测线(4)和质控线(5)。


2.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的核酸适配体试纸条，其特征在于，检测线(4)靠近释放垫(2)一侧，质控线(5)靠近吸水纸(6)一侧；样品垫(1)、释放垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水纸(6)顺次相邻叠压并固定在背板(7)上；外卡套(8)通过按压套住并固定背板(7)。


3.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的核酸适配体试纸条，其特征在于，所述的试纸条长68mm～71mm，宽4mm；叠压宽度为1-2mm；样品垫(1)的下端与背...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘浩，付萌，李捷，高俊海，
申请(专利权)人：杭州谱尼检测科技有限公司，
类型：新型
国别省市：浙江;33