一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法技术

本发明专利技术提供了一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法，属于水产品中污染物残留量检测技术领域。本发明专利技术所述水产品重金属镉残留量快速检测的方法包括如下步骤：取水产品的可食部分，粉碎匀浆，根据水产品种类的差异，分别加入0.5‑1mol/L硝酸溶液，离心取上清后用0.5‑1mol/L硝酸溶液分别稀释0‑20倍，调节pH值至7.0～7.5，再加入PBS缓冲溶液和EDTA溶液，用重金属镉免疫胶体金快速检测卡和/或试纸检测。本发明专利技术所述建立的水产品中重金属镉的免疫胶体金快速检测方法，可实现对鱼类、甲壳类和贝类等不同水产品种中重金属镉残留量的快速、简便检测，并用于对不同种类水产品中重金属镉是否超标进行现场判定。

【技术实现步骤摘要】
一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法
本专利技术属于水产品中污染物残留量检测
，尤其涉及一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法。
技术介绍
重金属镉是海洋环境中常见的污染物之一，可在环境中迁移、转化，并易于被动植物富集。镉在人体中主要蓄积在肝、肾、骨等部位，对人体具有致癌、致畸、致突变等作用。有研究表明，甲壳类及双壳类等水产动物，因其底栖生活习性，更容易积累重金属镉等有毒物质，并通过食物链传递，对人体造成危害。我国相继对渤海、黄海、东海、南海等海域海洋环境和海洋生物体中重金属开展了污染调查及研究，发现虾蟹、贝类中重金属镉的污染状况较为严重，部分种类甲壳类和双壳类水产品中重金属镉残留量超标已成为普遍现象，严重影响了我国水产品质量安全和水产行业的可持续发展。因此，建立水产品中重金属镉残留量测定的快速检测方法，可对水产品中重金属镉是否超标做出快速判定，为水产品生产和质量安全监管提供技术支撑，有着十分重要的作用。现有对水产品重金属镉检测方法多为原子吸收分光光度法、电感耦合等离子体原子发射光谱法、电感耦合等离子体质谱法。这些方法需要在专业实验室内进行操作，对实验人员和实验条件要求较高，实验步骤复杂，检测所用仪器价格昂贵，不利于对水产品中重金属镉残留量进行简单、快速的现场测定。免疫胶体金快速检测方法是将抗原抗体免疫反应技术、胶体金标记技术和层析技术相结合的分析方法，具有简便、快速、低成本和易于推广等优点，但是目前免疫胶体金快速检测方法仅应用于粮食、水体、环境、饲料等领域，并不能有效应用于现场检测虾、蟹、贝类等水产品的重金属镉残留，而且由于甲壳类和贝类样品种类较多、样品基质复杂，如含有较多的蛋白、脂肪、色素等，会影响重金属镉残留检测的准确性，容易出现假阳性和假阴性的结果，所以免疫胶体金检测技术并不能有效的实现甲壳类和贝类样品中重金属镉残留量现场快速检测的目的。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法，可针对不同品种水产样品实现快速、简便、低成本的重金属镉残留量的现场测定。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：本专利技术提供了一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法，包括如下步骤：取水产品的可食部分，粉碎匀浆，与硝酸溶液按1g：14-18mL的质量体积比混合，离心取上清液；将所述上清液与硝酸溶液按1：0-19.5的体积比混合即为稀释液，调节pH值至7.0-7.5，再加入缓冲溶液和EDTA溶液，用免疫胶体金法进行检测；上述硝酸溶液的浓度为0.45-1.05mol/L。优选的，所述调节pH值的溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。优选的，所述氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液的浓度为0.45-1.05mol/L。优选的，所述水产品包括鱼类、甲壳类和贝类。优选的，当所述水产品为鱼类时，所述硝酸溶液的浓度为0.45-0.55mol/L，所述上清液不添加硝酸溶液进行稀释，直接调节pH值。优选的，当所述水产品为甲壳类时，所述硝酸溶液的浓度为0.95-1.05mol/L，所述上清液与硝酸溶液的体积比为1：2.5-3.5。优选的，当所述水产品为贝类时，所述硝酸溶液的浓度为0.70-0.80mol/L，所述上清液与硝酸溶液的体积比为1：18.5-19.5。优选的，所述EDTA溶液的浓度为0.45-0.55mol/L。优选的，所述缓冲溶液包括PBS缓冲溶液。优选的，所述稀释液、PBS缓冲溶液和EDTA溶液的体积比为1：0.4～0.6:0.2～0.3与现有技术相比，本专利技术技术方案具有如下有益效果：本专利技术根据水产品品种和限量指标的不同，通过加入硝酸溶液对水产品中重金属镉进行提取，根据不同水产品中重金属镉的限量指标差异选择不同的稀释处理方式，并在缓冲溶液条件下用EDTA络合重金属镉，可简化不同品种水产品重金属镉检测时的预处理步骤，大大缩短了预处理的时间，再结合免疫胶体金法进行检测，进一步缩短了整个检测过程的时间，可实现对不同水产品种中重金属镉残留量的快速、简便检测，并可用于对不同种类水产品中重金属镉是否超标进行现场判定。本专利技术所述快速检测方法与原子荧光法、电感耦合等离子体质谱法等现有重金属镉检测方法相比，检测时间由原来的6～8h缩短为40～60min，极大缩短检测时间，且可实现现场快速检测，无需将水产品样本带回实验室检测。与现有重金属镉快速检测方法相比，本专利技术的前处理技术可实现对鱼类、甲壳类和贝类等不同水产品品种快速检测和限量指标判定。本专利技术所述方法对鱼类中重金属镉定性检测的检测限为0.1mg/kg，对甲壳类中重金属镉定性检测的检测限为0.5mg/kg，对贝类中重金属镉定性检测的检测限为2.0mg/kg。附图说明图1为结果判读示意图，其中C为质控线，T为检测线；图2为鱼类样品检测结果图，其中a为对照组，b为实验组；图3为甲壳类样品检测结果图，其中a为对照组，b为实验组；图4为贝类样品检测结果图，其中a为对照组，b为实验组。具体实施方式本专利技术提供了一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法，包括如下步骤：取水产品的可食部分，粉碎匀浆，与硝酸溶液按1g：14-18mL的质量体积比混合，离心取上清液；将所述上清液与硝酸溶液按1：0-19的体积比混合即为稀释液，调节pH值至7.0-7.5，再加入缓冲溶液和EDTA溶液，用免疫胶体金法进行检测；上述硝酸溶液的浓度为0.45-1.05mol/L。本专利技术对于水产品的种类没有特殊限定，优选的包括鱼类、甲壳类和贝类。本专利技术对于粉碎的方式没有特殊限定，采用本领域常规粉碎方式均可，优选的用粉碎机粉碎匀浆。本专利技术离心的方式优选的为用高速离心机离心，离心的转速优选为4000～5000r/min，更优选为4500r/min，离心的时间优选为5～7min，更优选为6min。本专利技术对于调节pH所用的溶液没有特殊限定，采用本领域常用调pH值的碱液均可，在本专利技术具体实施例中，调节pH值的碱液优选为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液，更优选为氢氧化钠溶液，所述氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液的浓度优选为0.45-1.05mol/L。本专利技术对于缓冲溶液的种类没有特殊限定，采用本领域常规缓冲溶液均可，优选的为PBS缓冲溶液，所述PBS缓冲溶液配制方法优选为：称取0.24g磷酸二氢钾、3.64g磷酸氢二钠十二水和物、8.00g氯化钠、0.20g氯化钾溶于800mL水中，加入浓盐酸调pH至7.4，用水定容到1000mL。本专利技术对于EDTA溶液的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售EDTA溶液均可，在本专利技术优选实施例中，所述EDTA溶液的浓度优选为0.45-0.55mol/L，更优选为0.5mol/L，所述EDTA溶液的用量以稀释液、PBS缓冲溶液计，稀释液、PBS缓冲溶液和EDTA溶液的体积比优选的为1：0.4～0.6:0.2～0.3，更优选的为1：0.5:0.25。本专利技术对于免疫胶体金法的具体形式、种类等没有特殊限定，采用本领域常规免疫胶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：取水产品的可食部分，粉碎匀浆，与硝酸溶液按1g：14-18mL的质量体积比混合，离心取上清液；将所述上清液与硝酸溶液按1：0-19.5的体积比混合即为稀释液，调节pH值至7.0-7.5，再加入缓冲溶液和EDTA溶液，用免疫胶体金法进行检测；所述硝酸溶液的浓度为0.45-1.05mol/L。/n

【技术特征摘要】
1.一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：取水产品的可食部分，粉碎匀浆，与硝酸溶液按1g：14-18mL的质量体积比混合，离心取上清液；将所述上清液与硝酸溶液按1：0-19.5的体积比混合即为稀释液，调节pH值至7.0-7.5，再加入缓冲溶液和EDTA溶液，用免疫胶体金法进行检测；所述硝酸溶液的浓度为0.45-1.05mol/L。


2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述调节pH值的溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。


3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液的浓度为0.45-1.05mol/L。


4.根据权利要求1-3任一项所述方法，其特征在于，所述水产品包括鱼类、甲壳类和贝类。


5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，当所述水产品为鱼类时，所述硝酸溶液的浓度为0...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐英江，田秀慧，韩典峰，宫向红，刘小静，张华威，任传博，
申请(专利权)人：山东省海洋资源与环境研究院山东省海洋环境监测中心，山东省水产品质量检验中心，
类型：发明
国别省市：山东;37