基因修饰的T细胞产品、其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及制备基因修饰的T细胞的方法、基因修饰的T细胞群及其用途。该方法包括：从混合的T细胞群分隔或富集表达CD8+的T细胞群和/或表达CD4+的T细胞群以产生分隔的或富集的T细胞群；刺激分隔的或富集的T细胞群以产生刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群；用载体转导刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群；使转导的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群与至少一种细胞因子接触；通过选择标记序列富集转导的、细胞因子刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群；增殖富集的、转导的、细胞因子刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群。本发明专利技术的基因修饰的T细胞具有高存活率和增殖率。

【技术实现步骤摘要】
基因修饰的T细胞产品、其制备方法和用途本申请是申请日为2015年4月8日，申请号为201580029752.3，专利技术名称为“确定的组合基因修饰的T细胞产品”的中国专利申请的分案申请。相关申请的交叉引用本申请要求2014年4月10日提交的美国临时专利申请号61/977,751、2014年4月30日提交的美国临时专利申请号61/986,479、2014年10月2日提交的美国临时专利申请号62/058,973、2014年12月5日提交的美国临时专利申请号62/088,363、2014年12月9日提交的美国临时专利申请号62/089,730和2014年12月11日提交的美国临时专利申请号62/090845的优先权的权益。上述申请的全部公开内容特别地通过引用全文并入。序列表的引用本申请连同电子格式的序列表一起提交。序列表提供为2015年3月23日创建的大小为2.92kb的命名为SCRI-090WO_SEQUENCE_LISTING.TXT的文件。电子格式的序列表的信息通过引用全文并入本文。
本专利技术的方面涉及制备含有嵌合抗原受体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备具有嵌合抗原受体的基因修饰的T细胞的方法，包括：/n从混合的T细胞群分隔或富集表达CD8+的T细胞群和/或表达CD4+的T细胞群，以产生分隔的或富集的T细胞群，所述T细胞是如源自胸腺细胞的T细胞或源自工程化前体的T细胞，所述工程化前体希望地是iPS细胞；/n刺激所述分隔的或富集的T细胞群，以产生刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群；/n用载体转导所述刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群，以产生转导的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群，其中所述载体编码嵌合抗原受体和标记序列，其中所述标记序列编码细胞表面选择性标记；/n使所述转导的CD8+T细胞群和/或CD4+T细...

【技术特征摘要】
20140410 US 61/977,751;20140430 US 61/986,479;20141.一种制备具有嵌合抗原受体的基因修饰的T细胞的方法，包括：
从混合的T细胞群分隔或富集表达CD8+的T细胞群和/或表达CD4+的T细胞群，以产生分隔的或富集的T细胞群，所述T细胞是如源自胸腺细胞的T细胞或源自工程化前体的T细胞，所述工程化前体希望地是iPS细胞；
刺激所述分隔的或富集的T细胞群，以产生刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群；
用载体转导所述刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群，以产生转导的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群，其中所述载体编码嵌合抗原受体和标记序列，其中所述标记序列编码细胞表面选择性标记；
使所述转导的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群与至少一种细胞因子接触，如接触1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20天或由任意两个前述的时间段限定的范围内的一段时间，以产生转导的、细胞因子刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群，所述细胞因子可以被外源地提供给T细胞，例如为除了可以由细胞产生或存在于培养基中的任何细胞因子以外的细胞因子；
通过选择所述标记序列富集所述转导的、细胞因子刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群，以产生富集的、转导的、细胞因子刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群；以及
增殖所述富集的、转导的、细胞因子刺激的CD8+T细胞群和/或CD4+T细胞群至少1天，如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20天或由任意两个前述的时间段限定的范围内的一段时间，以获得具有嵌合抗原受体的所述基因修饰的T细胞。


2.权利要求1所述的方法，其中，通过亲和性选择具有存在于CD8和/或CD4上的表...

【专利技术属性】
技术研发人员：迈克尔·C·延森，
申请(专利权)人：西雅图儿童医院DBA西雅图儿童研究所，
类型：发明
国别省市：美国;US