一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法，包括以下步骤：1)授粉后30～40d，从果柄基部剪取蒴果清洗消毒，用无菌滤纸吸干蒴果表面水分；2)沿蒴果心皮纵轴方向剥开果皮，将絮连同种胚剥离出来；3)将絮连同种胚接种于1/2MS培养基上培养至苗高4～6cm以上，有4～6片真叶；4)将组培幼苗洗去培养基，移栽于装有基质的无纺布容器中，三周后移入大田。本发明专利技术方法简单可行，安全可靠，移栽到大田后成活率达到95％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法
本专利技术属于植物育苗
，具体涉及一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法。
技术介绍
植物组织培养又称离体培养，利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)、组织或细胞以及原生质体，在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株。杂交育种是培育杨树新品种的主要手段。为了提高育种效率，解决室内切枝水培杂交后期果穗脱落、种子发育不成熟问题，对水培后期杂种胚进行离体培养，是一种可行有效的方法。通过离体培养获得组培苗后进行炼苗移栽，最终获得杂交苗。传统组培苗移栽，先将组培苗移栽到一种基质中，在室内完成炼苗，然后再移栽到大田。上述方法室内炼苗时基质配比不易同时解决组培苗根生长需要的无菌、通气、营养需求，并且从室内炼苗到大田移栽的过程，组培苗根部容易受损，缓苗期较长，导致杂交子代组培苗的成苗率低。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法，旨在解决：1)黑杨切枝水培杂交后期果穗脱落、种子发育不成熟难以大田播种成苗的问题；2)杂交子代组培苗在室内炼苗时，基质配比难以兼顾组培苗根生长需要的无菌、通气和营养需求；3)从室内到大田移栽，组培苗根部容易受损，缓苗期较长，组培苗的成苗率低问题。为解决上述问题，本专利技术具体通过以下技术方案实现：一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法，包括以下步骤：1)授粉30～40d后，从果柄基部剪取蒴果清洗消毒，用无菌滤纸吸干蒴果表面水分；2)沿蒴果心皮纵轴方向剥开种皮，将絮连同种胚剥离出来；3)将絮连同种胚接种于1/2MS培养基上培养至苗高4～6cm以上，有4～6片真叶；4)将幼苗放入清水中，要毛刷去除培养基以防止伤根，移栽于装有基质的营养杯中，25～30d后移入大田。进一步的，步骤(1)中消毒采用75％的酒精浸泡消毒6～7min。。进一步的，步骤(3)中培养环境温度25℃±2℃，2500～3000Lux，光照时间16～17小时/天。进一步的，步骤(4)中基质按照质量分数包括以下组分：草炭75％、珍珠岩15.5％、蛭石7.5％、缓释肥1％、过磷酸钙0.5％、硫酸亚铁0.5％。基质容器无纺布制作，规格为直径5～7cm，高10～12cm，把容器上部3～4cm厚基质，换为过筛消毒的河沙。进一步的，步骤(4)中移栽于营养杯第1～7d环境湿度保持95％～98％，透光率75％～78％，温度25℃±2℃；第8～15d环境湿度保持80％～90％；透光率80％～85％，温度25℃±2℃；第16～23d环境湿度保持70％～80％；透光率90％～95％，温度25℃±2℃；之后视苗木状况定期进行喷淋，透光率95％以上。进一步的，营养杯采用无纺布制成，可直接移栽到大田，减少缓苗期和根系损伤，增加移栽成活率。本专利技术的有益效果为：1)经过组培培养成苗，解决了黑杨切枝水培杂交种子发育不成熟难以大田播种成苗的问题；2)用毛刷在清水中刷去组培苗根部基质，有效降低了根损伤。采用河沙和混合基质双层育苗基质法，在一种育苗容器中实现了组织苗炼苗的无菌、通气和生长营养需求。3)营养杯用无纺布做成，苗子直接移栽在其中，炼苗后直接从室内下地，无需缓苗期，提高移栽成活率。具体实施方式下面将结合本专利技术具体的实施例，对本专利技术技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1本专利技术提供了一种杨树组培苗的炼苗移栽方法，以提高杨杂交育种子代成苗率，具体通过以下内容实现：1)授粉30d后，用剪刀从果柄基部剪下蒴果，自来水冲洗干净果皮表面，沥净水分，放入无菌瓶。用75％的酒精浸泡消毒6min，接着无菌水冲洗三次，冲洗后将材料放入培养皿中，无菌滤纸吸干材料表面水分。2)用刀片沿心皮纵轴方向轻轻一压，剥开果皮，将絮连同种胚轻轻剥离出来，均匀接种在1/2MS培养基上，并用接种工具轻压，全面接触培养基，利于出苗和成长。培养环境温度25℃±2℃，光照强度2000Lux，光照时间每天16h。培养周期大约40d左右，一般的苗高4cm以上，有4～6片真叶。3)用无纺布和轻基质为生产原材料制备营养杯。基质的透气性、养分等对诱发新根起着关键性作用。基质配方按照质量分数包括以下组分：草炭75％、珍珠岩15.5％、蛭石7.5％、缓释肥1％、过磷酸钙0.5％、硫酸亚铁0.5％，搅拌均匀。无纺布制作育苗容器袋，经机器切段制成营养杯，规格为直径5.5cm，高10cm。去除营养杯上部3～4cm基质，装入过筛晒干的河沙，将营养杯置于育苗穴盘，浇透水备用。洗苗前，提前将水晾至常温备用。培养基瓶苗去盖，用镊子在培养瓶内旋转一下，培养基连同苗子一起倒出，去掉大块培养基，迅速将整棵苗浸入水盆，轻轻摘掉苗子基部杨絮，在有水的盘内用细毛刷轻轻刷去根上的培养基，尽量保持根系完整。再次清洗，将幼苗栽入备好的营养杯，浇透水，苗与基质完全密实，苗子顶尖和叶片保持干净，不得沾上沙子和基质。移栽第一周湿度保持95％左右，第二周湿度保持85％～90％，光照条件3000Lux。中午光照强时，可搭遮阴网。观察沙子颜色，判断是否喷水。两周后，选择傍晚时间或者阴天，将生了新根并展新叶的苗子移入湿度70％左右，温度28℃左右的环境。降低湿度，进一步对苗子进行驯化，适应外界环境。4)在基质不缺水的情况下，只需用喷壶喷水，保证沙子表面的湿润。三周后，选择阴雨天，将生根苗移入大田，在高2.5m处搭一层稀薄遮阴网，期间根据天气和基质判断浇水。一周后，阴雨天去掉拱棚上的遮阴网，再一周后，选择阴雨天去掉遮阴网，完全在自然条件下生长。实施例2本专利技术提供了中潜3号×巨霸杨、丹红杨×中汉17、中驻6号×巨霸杨、I-69×巨霸杨杂种胚组培苗的炼苗移栽方法，以提高杂交育种子代成苗率，具体通过以下内容实现：1)分别用巨霸杨的花粉给中潜3号、中驻6号和I-69杨的雌蕊、中汉17的花粉给丹红杨的雌蕊授粉，30天后，用剪刀从果柄基部剪下蒴果，自来水冲洗干净果皮表面，沥净水分，放入无菌瓶。用75％的酒精浸泡消毒6分钟，接着无菌水冲洗三次，冲洗后将材料放入培养皿中，无菌滤纸吸干材料表面水分。2)用刀片沿心皮纵轴方向轻轻一压，剥开果皮，将絮连同种胚轻轻剥出来，均匀接种在MS培养基上，并用接种工具轻压，全面接触培养基，利于出苗和成长。培养环境温度25℃±2℃，光照强度2000lx，光照时间每天16小时。培养周期大约40天左右，一般的苗高4cm以上，有4～6片真叶。3)用无纺布和轻基质为生产原材料制备营养杯。基质的透气性、养分等对诱发新根起着关键性作用。基质配方按照质量分数包括以下组分：草炭75％、珍珠岩15.5％、蛭石7.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)授粉30～40d后，从果柄基部剪取蒴果清洗消毒，用无菌滤纸吸干蒴果表面水分；/n2)沿蒴果心皮纵轴方向剥开种皮，将絮连同种胚剥离出来；/n3)将絮连同种胚接种于1/2MS培养基上培养至苗高4～6cm以上，有4～6片真叶；/n4)将组培幼苗洗去培养基，移栽于装有基质的营养杯中，三周后移入大田。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)授粉30～40d后，从果柄基部剪取蒴果清洗消毒，用无菌滤纸吸干蒴果表面水分；
2)沿蒴果心皮纵轴方向剥开种皮，将絮连同种胚剥离出来；
3)将絮连同种胚接种于1/2MS培养基上培养至苗高4～6cm以上，有4～6片真叶；
4)将组培幼苗洗去培养基，移栽于装有基质的营养杯中，三周后移入大田。


2.根据权利要求1所述的一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法，其特征在于，步骤(1)中消毒采用75％的酒精浸泡消毒6～7min。


3.根据权利要求1所述的一种提高黑杨杂交子代育苗成活率的方法，其特征在于，步骤(3)中培养环境温度25℃±2℃，光照强度2500～3000Lux，光照时间16～17小时/天。

【专利技术属性】
技术研发人员：丁昌俊，董玉峰，张伟溪，苏晓华，李善文，王延平，黄秦军，王雷，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院林业研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11