【技术实现步骤摘要】
一种生物分子检测方法
本专利技术涉及生物分子检测
,特别是涉及一种生物分子检测方法。
技术介绍
生物分子泛指生物体特有的各类分子,它们都是有机物,生物分子泛指生物体特有的各类分子,它们都是有机物,典型的细胞含有一万到十万种生物分子,其中近半数是小分子,分子量一般在500以下,其余都是生物小分子的聚合物,分子量很大,一般在一万以上,有的高达10万,因而称为生物大分子,构成生物大分子的小分子单元,称为构件,氨基酸、核苷酸和单糖分别是组成蛋白质、核酸和多糖的构件;生物分子都有自己特有的结构,生物大分子的分子量大,构件种类多,数量大,排列顺序千变万化,因而其结构十分复杂,估计仅蛋白质就有10-10种,生物分子又是有序的,每种生物分子都有自己的结构特点,所有的生物分子都以一定的有序性(组织性)存在于生命体系中;分子诊断是指应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术。分子诊断是预测诊断的主要方法,既可以进行个体遗传病的诊断,也可以进行产前诊断。分子诊断主要是指编码与疾病相关的各种结构蛋白、 ...
【技术保护点】
1.一种生物分子检测方法,其特征在于:所述检测方法包括蛋白质体外结合试验检测、免疫共沉淀检测和基因检测;/n所述蛋白质体外结合试验检测包括蛋白-蛋白之间的相互作用研究和RNA/DNA结合蛋白与其靶RNA/DNA之间相互作用研究,所述蛋白-蛋白之间的相互作用研究检测方法,包括以下步骤:/nStep01:准备相关检测仪器,包括生物分子互作分析仪;/nStep02:构建GST-靶蛋白融合表达载体;/nStep03:MS检测融合蛋白的表达;/nStep04:获取总蛋白裂解液;/nStep05:应用生物分子互作分析仪,进行蛋白质体外结合实验调取互作结合蛋白;/nStep06:对结合蛋 ...
【技术特征摘要】
1.一种生物分子检测方法,其特征在于:所述检测方法包括蛋白质体外结合试验检测、免疫共沉淀检测和基因检测;
所述蛋白质体外结合试验检测包括蛋白-蛋白之间的相互作用研究和RNA/DNA结合蛋白与其靶RNA/DNA之间相互作用研究,所述蛋白-蛋白之间的相互作用研究检测方法,包括以下步骤:
Step01:准备相关检测仪器,包括生物分子互作分析仪;
Step02:构建GST-靶蛋白融合表达载体;
Step03:MS检测融合蛋白的表达;
Step04:获取总蛋白裂解液;
Step05:应用生物分子互作分析仪,进行蛋白质体外结合实验调取互作结合蛋白;
Step06:对结合蛋白进行纯化与分析,得到检测结果;
Step07:对实验检测器械进行清洗,对检测环境进行清理。
所述RNA/DNA结合蛋白与其靶RNA/DNA之间相互作用研究检测方法,包括以下步骤:
Step11:准备相关检测仪器,包括生物分子互作分析仪;
Step12:进行RNA/DNA生物素探针的制备;
Step13:进行细胞裂解液的制备;
Step14:获取总蛋白裂解液;
Step15:RNA/DNAPulldown调取互作结合蛋白;
Step16:对结合蛋白进行纯化与分析,得到检测结果;
Step17:对实验检测器械进行清洗,对检测环境进行清理。
所述免疫共沉淀检测方法,包括以下步骤:
Step21:以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育;
Step22:基于上述Step21,形成免疫复合物;
Step23:对上述免疫复合物中加入能够与靶蛋白抗体结合的proteinA/G,形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体”复合物;
Step24:将免疫复合物经纯化后进行凝胶电泳分离;
Step25:基于上述Step24,结合Westernblot或质谱技术,对蛋白质进行纯化、并检测抗原或抗体。
所述基因检测方法,包括探针法检测、MassARRAy法检测和IlluminaBeadXpress法检测,所述探针法检测的检测方法,包括以下步骤:
Step31:进行相关检测对象的DNA提取;
Step32:对提取的DNA进行样品质量检测;
Step33:进行检测探针的设计与合成;
Step34:进行预实验,获得相应的实验基本数据;
Step35:进行荧光...
【专利技术属性】
技术研发人员:周景明,
申请(专利权)人:安乐励思科技苏州有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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