一种合成7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种合成7‑氨基去乙酰氧基头孢烷酸的方法。本发明专利技术提供了一种合成7‑苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸的方法，为在生物合成α‑酮戊二酸和生物合成过氧化物酶的作用下，利用生物合成的脱乙酰氧头孢菌素C合成酶scDAOCS7，催化青霉素G或其盐，合成7‑苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸(G‑7‑ADCA)；2)通过青霉素酰化酶催化所述7‑苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸合成7‑氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7‑ADCA)。该方法使用全细胞作为催化剂，细胞可以提供辅因子再生的环境，从而在反应过程中无需外源添加辅因子。

【技术实现步骤摘要】
一种合成7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸的方法
本专利技术属于生物
，涉及一种合成7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸的方法。
技术介绍
7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA,结构式如图1所示)是重要的头孢类抗生素合成的母核，目前以7-ADCA为母核合成的内酰胺类药物包括头孢羟氨、头孢拉定、头孢克罗等都是国内外抗生素市场用量较大的抗生素药物。7-ADCA合成方法主要有两种，化学法和酶法。其中化学法首先以青霉素G钾盐为原料将其氧化为青霉素G亚砜，然后扩环重排产生7-苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸，最后采用化学水解的方法制得7-ADCA,因为化学法合成7-ADCA工艺复杂，工序多，设备要求严格，反应过程中会大量使用化工原料和有机溶媒，存在劳动保护和环境污染问题等缺点而逐渐被化学酶法替代。目前生产7-ADCA的主要工艺为半合成酶法，以青霉素G钾盐为底物，经过过氧化氢催化扩环生成7-苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸(G-7-ADCA)，然后通过青霉素酰化酶水解去掉侧链获得7-ADCA。然而，该过程需要大量的过氧化氢，对环境冲击较大，而生物酶法由于反应条件温本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种合成7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸的方法，包括如下步骤：/n1)以青霉素G或其盐为底物，用脱乙酰氧头孢菌素C合成酶scDAOCS7催化反应，合成7-苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸G-7-ADCA；/n所述催化过程中引入酶级联系统的生物合成途径来提供辅因子α-酮戊二酸和自主清除转化过程中产生的H

【技术特征摘要】
1.一种合成7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸的方法，包括如下步骤：
1)以青霉素G或其盐为底物，用脱乙酰氧头孢菌素C合成酶scDAOCS7催化反应，合成7-苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸G-7-ADCA；
所述催化过程中引入酶级联系统的生物合成途径来提供辅因子α-酮戊二酸和自主清除转化过程中产生的H2O2，且以全细胞的方式维持转化过程中的辅因子再生；
2)以所述7-苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸G-7-ADCA为底物，用青霉素酰化酶催化反应，合成7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸7-ADCA。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述酶级联系统的生物合成途径为如下：以L-谷氨酸为底物，用L-谷氨酸氧化酶进行催化，生成辅因子α-酮戊二酸和副产物过氧化氢；且在所述催化过程中用过氧化氢酶清除所述副产物过氧化氢。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：
所述步骤1)的催化反应为用表达脱乙酰氧头孢菌素C合成酶、L-谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶的全细胞催化L-谷氨酸和青霉素G或其盐，合成7-苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸G-7-ADCA。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：
步骤1)中，所述全细胞为大肠杆菌；
所述表达脱乙酰氧头孢菌素C合成酶、L-谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶的大肠杆菌为将所述L-谷氨酸氧化酶、所述过氧化物酶编码基因和所述scDAOCS7酶编码基因导入所述大肠杆菌。


5.根据权利要求4所...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙周通，杨大猛，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：天津;12