【技术实现步骤摘要】
一种星孢菌素中间体K252c及其衍生物的催化合成体系及催化合成方法
本专利技术属于医药中间体的生物合成
，具体涉及星孢菌素的生物合成，尤其涉及一种星孢菌素中间体K252c及其衍生物的催化合成体系及催化合成方法。
技术介绍
癌症严重威胁人类健康，其诱发因素往往源于信号通路中激酶的异常活化。另外，自身免疫病、神经退行病等常见高发慢性病也与激酶异常密切相关。2001年，第一个激酶抑制剂类药物格列卫(Gleevec)在美获批上市，开启了癌症靶向治疗新时代，疗效显著优于化疗。截至2019年底，FDA共批准了52个激酶抑制剂。虽然数量较多，但由于癌症种类繁多、涉及的异常激酶众多且变异类型多样、以及使用后耐药等因素，癌症在临床上仍存在重大未满足的治疗需求。另外，这些上市药物仅靶向大约25个激酶，仅占人体518个激酶中的5％，尚有大量激酶暂未成药。因此，这类药物研发空间巨大。抗肿瘤新药主要来源于天然产物类似物。因此，有效合成天然产物类似物的创新技术对于新药发现来说至关重要。天然产物往往结构复杂，含有多个手性中心。相对于...
【技术保护点】
1.一种星孢菌素中间体K252c及其衍生物的催化合成体系，其特征在于，所述催化合成体系包括：合成原料L-色氨酸和/或L-色氨酸衍生物、L-色氨酸氧化酶、CPA合成酶、细胞色素P450酶、单加氧酶、辅因子和缓冲液；/n其中，所述L-色氨酸氧化酶为VioA，所述CPA合成酶为VioB，且所述单加氧酶为SpcC。/n
【技术特征摘要】
1.一种星孢菌素中间体K252c及其衍生物的催化合成体系，其特征在于，所述催化合成体系包括：合成原料L-色氨酸和/或L-色氨酸衍生物、L-色氨酸氧化酶、CPA合成酶、细胞色素P450酶、单加氧酶、辅因子和缓冲液；
其中，所述L-色氨酸氧化酶为VioA，所述CPA合成酶为VioB，且所述单加氧酶为SpcC。
2.根据权利要求1所述的催化合成体系，其特征在于，所述细胞色素P450酶包括StaP或RebP；
优选地，所述催化合成体系中，所述L-色氨酸氧化酶为VioA，所述CPA合成酶为VioB，所述细胞色素P450酶为RebP，且所述单加氧酶为SpcC。
3.根据权利要求1或2所述的催化合成体系，其特征在于，所述辅因子包括还原型辅酶和/或蛋白类辅因子；
优选地，所述还原型辅酶包括NADH和/或NADPH；
优选地，所述蛋白类辅因子包括FldA和/或FnR；
优选地，所述催化合成体系中包括辅因子NADPH、FldA和FnR。
4.根据权利要求1～3任一项所述的催化合成体系，其特征在于，所述催化合成体系中，L-色氨酸氧化酶液的总蛋白质量浓度为2～10mg/mL，优选为4～8mg/mL；
优选地，所述催化合成体系中，CPA合成酶液的总蛋白质量浓度为1～8mg/mL，优选为4～6mg/mL；
优选地，所述催化合成体系中，细胞色素P450酶液的总蛋白质量浓度为10～20mg/mL，优选为14～16mg/mL；
优选地，所述催化合成体系中，单加氧酶液的总蛋白质量浓度为30～40mg/mL，优选为33～36mg/mL；
优选地，所述催化合成体系中，所述辅因子NADPH的摩尔浓度为5～15mM，优选为8～12mM；
优选地，所述催化合成体系中，辅因子FldA蛋白液的总蛋白质量浓度为2～6mg/mL，优选为3～5mg/mL；
优选地，所述催化合成体系中，辅因子FnR蛋白液的总蛋白质量浓度为0.5～1.5mg/mL，优选为0.8～1mg/mL。
5.根据权利要求1～4任一项所述的催化合成体系，其特征在于，所述缓冲液包括Tris-HCl缓冲液；
优选地，所述Tris-HCl缓冲液的摩尔浓度为50～200mM；
优选地，所述Tris-HCl缓冲液的pH值为6.8～7.2；
优选地，所述Tris-HCl缓冲液还包括氯化钠；
优选地，所述Tris-HCl缓冲液中氯化钠的摩尔浓度为100～200mM；
优选地，所述缓冲液...
【专利技术属性】
技术研发人员：李永安，刁刘洋，白莉，周亚维，於四杰，
申请(专利权)人：百缮药业苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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