褐色脂肪细胞上清、其制备法及使用制造技术

本发明专利技术提供包含褐色脂肪细胞的上清或其纯化物的具有代谢改善作用的组合物。另外本发明专利技术提供不使用含有高浓度葡萄糖的培养液而制备该上清的方法。本发明专利技术提供对于褐色脂肪细胞的上清的制备有用的，使用多能性干细胞的褐色脂肪细胞制造方法。在本发明专利技术中，成功从褐色脂肪细胞中取得了具有代谢改善作用的上清。该上清可以不使用含有高浓度葡萄糖的培养液而取得。另外本发明专利技术还成功使用无饲养层培养体系，在不添加细胞因子鸡尾酒的条件下从多能性干细胞生成了褐色脂肪细胞。本发明专利技术的褐色脂肪细胞上清可以期待应用于对糖代谢疾病的治疗药或美容品的开发。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】褐色脂肪细胞上清、其制备法及使用
本专利技术涉及一种具有胰岛素分泌促进作用及胰岛β细胞·骨骼肌细胞·心肌细胞的葡萄糖吸收亢进作用、线粒体机能提高作用和/或皮肤损伤治愈促进作用等的褐色脂肪细胞上清的制备法，及包含褐色脂肪细胞上清的组合物和将使用其的代谢障碍的矫正等作为目的内科疗法等。
技术介绍
表现出肥胖以及超重的人口正在世界范围内增加。根据2017年的“全球疾病、伤害和危险因素研究(GlobalBurdenofDiseases,Injuries,andRiskFactorsStudy)”，世界上3人中有1人肥胖或超重(非专利文献1)。肥胖或超重会使得2型糖尿病，缺血性心脏疾病，脑血管障碍，癌等威胁生命的疾病群的发病风险上升。进一步而言，过去曾经历过肥胖或超重的人，比维持正常体重的人死亡风险更高(非专利文献2)。另外，孕妇的血糖值越高，对新生儿的负担越会无限增大(非专利文献3)，有报道称，怀孕初期肥胖或超重的母亲的孩子的脑性麻痹发病率高(非专利文献4)，肥胖或超重的孕妇的孩子容易畸形(非专利文献5)。如上所述，肥胖以及超重对本人自不必说，对下一代本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有糖代谢改善作用的组合物，其包含褐色脂肪细胞的上清。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180814 JP 2018-152727;20190218 JP 2019-0264631.一种具有糖代谢改善作用的组合物，其包含褐色脂肪细胞的上清。


2.如权利要求1所述的组合物，其中，
所述褐色脂肪细胞的上清不包含含有BMP7、VEGF、SCF、Flt3L、IL6及IGF2的细胞因子鸡尾酒。


3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，
褐色脂肪细胞的上清不含外源性细胞因子。


4.如权利要求1至3中的任一项所述的组合物，其中，
褐色脂肪细胞是由多能性干细胞制得的褐色脂肪细胞。


5.如权利要求1至4中的任一项所述的组合物，其中，
褐色脂肪细胞是由无饲养层培养的多能性干细胞制得的褐色脂肪细胞。


6.如权利要求1至5中的任一项所述的组合物，其中，
褐色脂肪细胞是不添加包含BMP4、VEGF、SCF、Flt3L、IL6及IGF2的细胞因子鸡尾酒和/或包含BMP7、VEGF、SCF、Flt3L、IL6及IGF2的细胞因子鸡尾酒而从多能性干细胞生成的褐色脂肪细胞。


7.如权利要求1至6中的任一项所述的组合物，其中，
上清为通过使褐色脂肪细胞与盐类缓冲液一起孵育而制得的上清。


8.如权利要求7所述的组合物，其中，
盐类缓冲液含有葡萄糖。


9.一种制造权利要求7或8所述的组合物的方法，其包括：
(1)通过无饲养层维持培养多能性干细胞的步骤，
(2)在无血清环境下非贴壁培养步骤(1)的细胞，使其形成细胞凝聚体的步骤，
(3)在无血清环境下培养步骤(2)的细胞，使其分化为褐色脂肪细胞的步骤，
(4)在盐类缓冲液中孵育步骤(3)的褐色脂肪细胞，并回收其上清的步骤。


10.一种能够用于权利要求1至9中的任一项所述的组合物或该组合物的制造中的褐色脂肪细胞的制造方法，其包括：
(1)通过无饲养层维持培养多能性干细胞的步骤，
(2)使步骤(1)的细胞分散，不添加包含BMP4、VEGF、SCF、Flt3L、IL6及IGF2的细胞因子鸡尾酒，并在无血清环境下进行非贴壁培养，形成细胞凝聚体的步骤，
(3)不添加包含BMP7、VEGF、SCF、Flt3L、IL6及IGF2细胞因子鸡尾酒，在无血清环境下，培养步骤(2)的细胞的步骤。


11.如权利要求10所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：佐伯久美子，小林德彦，冈雅子，松村和典，西尾美和子，朱亚峰，森豊隆，
申请(专利权)人：国立研究开发法人国立国际医疗研究中心，株式会社爱迪药业，
类型：发明
国别省市：日本;JP