【技术实现步骤摘要】
基于纳米颗粒的活细胞表面改造方法及其使用的纳米颗粒
[0001]本专利技术涉及一种基于纳米颗粒的活细胞表面改造技术及在肿瘤免疫治疗和组织修复等领域的应用，属于细胞治疗、生物医学、药物递送治疗领域。
技术介绍
[0002]利用活细胞递送生物活性物质已在很多疾病得到广泛的研究，包括艾滋病、肺结核、帕金森病、真菌感染等疾病。通常涉及的细胞多为自体细胞，如红细胞、巨噬细胞、干细胞和血小板等，这些细胞具有较高的生物相容性，完全可生物降解，不产生毒副产物。
[0003]以细胞为载体的递送系统在循环系统中寿命更长，体内药物释放时间更长，且可利用细胞的特异性功能实现活性物质的靶向递送。可通过物理、化学和材料的方法赋予这些细胞新的治疗功能，实施方法包括：1）利用多种作用力将活性物质接在细胞表面；2）将游离活性物质或载有活性物质的纳米粒包埋于细胞内。基于细胞递送活性物质的第一个临床应用是将胎盘葡萄糖脑苷脂酶包埋于红细胞中，并运送到白细胞中用于治疗戈谢病。
[0004]然而，将载有活性物质的纳米粒接于活细胞表面，实现活性物质和活细...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于纳米颗粒的活细胞表面改造方法，包括如下步骤：步骤1、制备纳米颗粒，使其表面含有
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NH2、
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SH或
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COOH；步骤2、将步骤1制得的纳米颗粒对一种或多种生物活性物质进行负载，获得负载有一种或多种生物活性物质的纳米颗粒；步骤3、采用活性PEG（NHS
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PEG
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MAL、CHO
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PEG
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MAL或EDC和NH2‑
PEG
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MAL）对步骤2中的纳米颗粒表面进行修饰，使纳米颗粒表面带有马来酰亚胺（
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MAL）或者活性酯（
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NHS）基团获得活化了的纳米颗粒；步骤4、收集处于对数生长期的细胞并培养，加入步骤3中活化了的纳米颗粒进行孵育，除去未反应的纳米颗粒；步骤5、采用PEG
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SH或PEG
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NH2封闭与细胞连接了的纳米颗粒表面的活性基团，得到载有生物活性物质的表面改造了的活细胞。2.根据权利要求1所述的基于纳米颗粒的活细胞表面改造方法，其特征在于：所述步骤4中的细胞活化预处理步骤如下：将步骤1所得的纳米颗粒负载有抗原OVA，然后再与所述细胞共同孵育获得活化了的细胞使得细胞就不吞噬纳米颗粒。3.根据权利要求2所述的基于纳米颗粒的活细胞表面改造方法，其特征在于：步骤4中的具体步骤如下：收集处于对数生长期的活化细胞，并铺于24孔板中，每孔1 mL，细胞密度为1
×
104个/孔—1
×
108个/孔，采用无血清培养基37℃下培养；之后加入步骤3中活化了的纳米颗粒，使其终浓度为3.125
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200 μg/mL，之后在4℃孵育10
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120 min，每15 min轻轻摇晃一次，之后用PBS洗涤细胞去除未反应的纳米颗粒，并最终获得活化了的纳米颗粒。4.根据权利要求1所述的基于纳米颗粒的活细胞表面改造方法，其特征在于：步骤5中的具体步骤如下：采用PEG
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SH或PEG
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NH2封闭与细胞连接了的纳米颗粒表面的活性基团：将PEG
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SH或PEG
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【专利技术属性】
技术研发人员：王晓莉，张闯年，杨菁，徐蓉，柳凯静，
申请(专利权)人：中国医学科学院生物医学工程研究所，
类型：发明
国别省市：
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