同时鉴别β-内酰胺类抗生素耐药基因的GeXP多重PCR检测试剂盒及其引物组制造技术

本发明专利技术公开了同时鉴别β‑内酰胺类抗生素耐药基因的GeXP多重PCR检测引物组，包括四对引物对：引物对A、引物对B、引物对C和引物对D，它们分别针对β‑内酰胺类抗生素耐药基因TEM、CTX‑M、SHV和bla‑CMY。在此基础上，发明专利技术人进一步建立了相应GeXP快速检测方法及其试剂盒。实验证明，使用本发明专利技术可同时检测β‑内酰胺类耐药基因TEM、CTX‑M、SHV和/bla‑CMY，具有简便快速、特异性强、灵敏度高等特点，与药敏试验、测序等实验方法的鉴定结果相比，符合率达100％。因此，本发明专利技术为常见的β‑内酰胺类耐药基因的检测提供了简便、高通量的检测试剂盒和检测体系，更符合实际的需要。本发明专利技术研究从基因上了解广西地区细菌对β‑内酰胺类抗生素的耐药情况，为调查耐药基因流行趋势提供一种全新的技术手段，应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】
同时鉴别β-内酰胺类抗生素耐药基因的GeXP多重PCR检测试剂盒及其引物组
本专利技术涉及抗生素耐药检测
，尤其涉及同时鉴别β-内酰胺类抗生素耐药基因的GeXP多重PCR检测试剂盒及其引物组。
技术介绍
抗生素的专利技术和应用是人类在20世纪医药领域最伟大的成就之一。由于广谱抗菌药的滥用，细菌耐药性的产生，给人类又造成了新的灾难。随着动物养殖业向规模化、集约化方法发展，饲养密度提高，加上管理用药不合理，导致动物细菌性疾病的危害加重。动物源食品也随之受到污染。近年来，由食源性致病菌引起的食物中毒在世界各地均有报道，引发公共卫生安全问题。细菌耐药性是微生物对抗生素的一种自然反应，每一种抗生素进入临床用药后随之而来的是细菌的耐药，这种耐药可能是天然的，也可能通过变异或者基因转移获得，不同的抗生素有其主导的耐药机制。细菌耐药带来的问题日愈严重，随着分子生物学技术的发展，细菌耐药性相关耐药基因陆续被鉴定。因此，要控制细菌耐药性，不仅要合理使用抗生素，还应该建立细菌耐药性相关耐药基因监测网，准确系统连续地检测本地细菌耐药情况，从而做好耐药趋势本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.同时鉴别β-内酰胺类抗生素耐药基因的GeXP多重PCR检测引物组，其特征在于包括四对引物对：引物对A、引物对B、引物对C和引物对D，它们分别针对β-内酰胺类抗生素耐药基因TEM、CTX-M、SHV和bla-CMY；每对引物包括上游引物和下游引物，每条引物由特异性嵌合引物在5’端添加相应GeXP通用引物构成；所述特异性嵌合引物分别具有序列表中SEQ.ID.NO.9至SEQ.ID.NO.16的碱基序列。/n

【技术特征摘要】
1.同时鉴别β-内酰胺类抗生素耐药基因的GeXP多重PCR检测引物组，其特征在于包括四对引物对：引物对A、引物对B、引物对C和引物对D，它们分别针对β-内酰胺类抗生素耐药基因TEM、CTX-M、SHV和bla-CMY；每对引物包括上游引物和下游引物，每条引物由特异性嵌合引物在5’端添加相应GeXP通用引物构成；所述特异性嵌合引物分别具有序列表中SEQ.ID.NO.9至SEQ.ID.NO.16的碱基序列。


2.根据权利要求1所述的GeXP多重PCR检测引物组，其特征在于：所述GeXP通用引物包括GeXP通用引物-F和GeXP通用引物-R，它们分别具有序列表中SEQ.ID.NO.17至SEQ.ID.NO.18的碱基序列。


3.根据权利要求2所述的GeXP多重PCR检测引物组，其特征在于：所述四对引物对中的各条引物为等摩尔混合。

【专利技术属性】
技术研发人员：谢芝勋，张艳芳，曾婷婷，邓显文，刘加波，谢志勤，张民秀，谢丽基，罗思思，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45