基于基因沉默的褐飞虱防控基因Nach-like的dsRNA片段及其用途制造技术

本发明专利技术属于农业生物技术领域，涉及基于基因沉默的褐飞虱防控基因的dsRNA片段。本发明专利技术公开了一种褐飞虱Nach–like基因dsRNA，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所述。本发明专利技术还同时公开了上述褐飞虱Nach–like基因dsRNA的用途：褐飞虱的Nach‑like基因dsRNA引发的基因沉默对褐飞虱存在致死效果。本发明专利技术还同时公开了上述褐飞虱Nach–like基因dsRNA的克隆方法和合成方法。

【技术实现步骤摘要】
基于基因沉默的褐飞虱防控基因Nach-like的dsRNA片段及其用途
本专利技术属于农业生物
，涉及基于基因沉默的褐飞虱防控基因的dsRNA片段。
技术介绍
褐飞虱Nilaparvatalugens作为一种稻田重要害虫，在若虫期和成虫期均可危害水稻，每年对水稻产量带来巨大损失。其主要通过刺吸水稻韧皮部汁液的方式，导致水稻生长受到影响。同时刺吸的过程中也可以传播水稻病毒病，加重水稻病害的流行(程遐年等,2003)。目前对褐飞虱的防治主要依赖于化学农药防治，这种防治方式极易造成褐飞虱的抗药性，同时对生态环境带来严重污染(Cheng,2009)。因此，发展新的褐飞虱防治方法势在必行。Zha等(2011)首次将褐飞虱的己糖转运蛋白基NlHT1、羧肽酶Nlcar和类丝氨酸蛋白酶Nltry等三个基因的dsRNA转入水稻植株中，获得了转褐飞虱靶标dsRNA的水稻，尽管褐飞虱取食这些水稻植株之后，仅相关基因的转录水平显著下降，并没有出现显著的致死表型，但是这种基于RNA干扰的转基因抗褐飞虱水稻的出现，为褐飞虱的防治提供了新的途径。随后，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.褐飞虱Nach–like基因dsRNA，其特征在于核苷酸序列如SEQ ID NO.1所述。/n

【技术特征摘要】
1.褐飞虱Nach–like基因dsRNA，其特征在于核苷酸序列如SEQIDNO.1所述。


2.如权利要求1所述的褐飞虱Nach–like基因dsRNA的用途，其特征是：褐飞虱的Nach-like基因dsRNA引发的基因沉默对褐飞虱存在致死效果。


3.如权利要求1中所述的褐飞虱Nach–like基因dsRNA的克隆方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)NCBI数据库中获得褐飞虱Nach-like序列，其序列ID为XM_022348347.1；利用Primer5软件设计引物，得到正向引物、反向引物；以反转录得到的cDNA作为模板，通过PCR扩增得到目标产物片段；
正向引物：AGTAAGAATCCAGCCTCAGT
反向引物：AGCAAGGAACAACCAGTAGA；
(2)对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，对目的条带切割回收纯化；
(3)回收纯化后将产物连接在pCE2-TA/Blunt-Zero载体上，...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶恭银，党聪，洪锐，孙初一，汪芳，方琦，姚洪渭，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33