一种脱细胞真皮基质及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种脱细胞真皮基质及其制备方法，该脱细胞真皮基质以罗非鱼皮为原材料，经过去除鳞衣、脱细胞、溶液保存、辐照灭菌等工艺制备而成。制备方法包括：1)刮除鱼鳞、残肉及脂肪等杂质；2)化学溶胀后采用片皮机刮除鳞衣层；3)采用表面活性剂和酶溶液洗涤；4)漂白与消毒；5)采用含有抗氧化剂的高盐溶液浸泡，进行保存液置换；6)低温下低剂量辐照灭菌。本发明专利技术产品无需冷冻干燥处理，生产成本低，易于规模化生产，并且去除鳞衣工艺可以高效率、较彻底地除去黑色杂质，大大改善产品外观、提高产品的患者接受度。本发明专利技术同时公开了该保存液配方，该保存液可以降低辐照对产品性能的负面影响，确保产品在常温运输与保存下质量稳定。

【技术实现步骤摘要】
一种脱细胞真皮基质及其制备方法
本专利技术属于生物医用材料领域，涉及一种新型的罗非鱼皮脱细胞鱼皮基质材料及其制备方法，以及制备工艺中所使用的保存液。
技术介绍
鱼胶原材料因其良好的生物相容性和无人畜共患病毒传播风险，近年来受到越来越多的关注。专利WO2011/042794提出一种脱细胞鱼皮基质，是以鳕鱼皮为原材料，经化学试剂脱细胞、胰蛋白酶消化、冷冻干燥和环氧乙烷灭菌制得。该工艺因为鳕鱼尚未实现大规模的人工养殖、原料来源有限，加之冷冻干燥工序对设备的要求较高、不易规模化生产。专利CN108355172A描述了一种罗非鱼皮脱细胞基质的制备方法，但所述生产流程繁琐、未设置去除黑色鳞衣工艺步骤，并且所述的保护液为生理缓冲液、细胞培养液、组织保存液、透明质酸溶液、壳聚糖溶液、右旋糖酐溶液、甘油等试剂，未验证其能否用于湿态样品的常温保存。因此研制一种既有大量的原料供应、生产工艺易于规模化放大、又可去除黑色鳞衣、并且无需冷冻干燥可直接常温保存、临床即用型的脱细胞真皮基质材料，成为目前医用胶原产业化亟需解决的问题。专利技术内容本专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备罗非鱼皮脱细胞真皮基质的方法，具体包括如下步骤：/n1)前处理：刮除罗非鱼皮表面的鱼鳞、残肉及脂肪等杂质；/n2)刮除鳞衣：化学溶胀后采用片皮机刮除鳞衣层，然后用缓冲液浸泡；/n3)脱细胞：先后采用表面活性剂和核酸酶溶液振荡洗涤；/n4)漂白处理：采用化学漂白剂对鱼皮进行漂白与消毒；/n5)保存液置换：采用含有抗氧化剂与高浓度盐的保存液对其进行浸泡；/n6)后处理：在较低温度范围-50℃至8℃的下采用范围为10kGy至20kGy较低的辐照剂量进行灭菌处理。/n

【技术特征摘要】
1.一种制备罗非鱼皮脱细胞真皮基质的方法，具体包括如下步骤：
1)前处理：刮除罗非鱼皮表面的鱼鳞、残肉及脂肪等杂质；
2)刮除鳞衣：化学溶胀后采用片皮机刮除鳞衣层，然后用缓冲液浸泡；
3)脱细胞：先后采用表面活性剂和核酸酶溶液振荡洗涤；
4)漂白处理：采用化学漂白剂对鱼皮进行漂白与消毒；
5)保存液置换：采用含有抗氧化剂与高浓度盐的保存液对其进行浸泡；
6)后处理：在较低温度范围-50℃至8℃的下采用范围为10kGy至20kGy较低的辐照剂量进行灭菌处理。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中，所述化学溶胀处理即将鱼皮浸泡于甘油溶液中，于4-20℃处理2-24小时；然后将鱼皮用酸性溶液或碱性溶液喷洒在鱼皮外侧，充分接触5-30分钟后，再用片皮机刮除鱼皮表面的黑色鳞衣层。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述酸性溶液是0.1％-3％浓度的醋酸溶液、柠檬酸溶液或盐酸溶液，所述碱性溶液是0.05M-0.2M的NaOH、KOH或氨水溶液。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中，刮除鳞衣之后将鱼皮置于酸碱度为pH6.0-pH8.0的缓冲液中，使之恢复到溶胀前的致密状态；或步骤3)中，所述核酸酶溶液为浓度20-200U/mL的核酸酶溶液，核酸酶处理的料液比为...

【专利技术属性】
技术研发人员：李东升，谢则平，邵月华，张淑敏，李诚博，宫世周，曲承蕾，申胜标，宋国梁，韩梦禹，
申请(专利权)人：烟台蓝创生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37