用于脂质定量的系统和方法技术方案

本公开涉及用于筛选脂质的方法、系统和装置。该技术包括：选择一组标准品以鉴定至少一种期望类型的脂质，将标准品掺入生物样品中以形成样品基质，从样品基质中提取脂质，以及将样品基质引入色谱系统中以分离期望类型的脂质。一旦使用HILIC色谱法将脂质分离成不同的脂质类型，就将它们引导至检测器，并且基于所测量的检测器响应与用已知浓度的所选组标准品生成的校准曲线之间的比较来定量分离的脂质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于脂质定量的系统和方法相关申请的交叉引用本申请要求2018年9月21日提交的标题为“SYSTEMANDMETHODFORLIPIDQUANTIFICATION”的美国临时专利申请号62/734,410的权益和优先权，该美国临时专利申请的全部内容据此全文以引用方式并入本文。
本公开整体涉及用于鉴定和定量脂质的系统和方法。具体地讲，本公开涉及使用联接到质谱仪的色谱系统鉴定和定量脂质的系统和方法。
技术介绍
色谱法涉及流动相在固定相上方流动以实现分离，并且通常与检测器诸如质谱仪组合。MS的进步已允许更深入地分析脂质；然而，已证明明确的鉴定和定量是困难的，因为脂质表现出大量的同分异构和同量异位脂质物质。此外，MS谱通常包含来自多个化合物的峰和片段，使得特定分子物质的置信度鉴定和相对定量困难且耗时。因此，脂质数据在实验室之间的传输受到严重阻碍，从而使得利用多位点研究得出生物学解释成为问题。
技术实现思路
由于大量同分异构和同量异位脂质物质，对脂质的鉴定和定量提出了许多挑战。用于明确且有效地鉴定和定量脂质的技术将是有益的和高度期望的。在一个方面，本技术涉及用于筛选脂质的方法。该方法包括选择一组标准品以鉴定至少一类脂质；将所述标准品与生物样品组合以形成样品基质；将所述样品基质引入色谱系统中以分离所述至少一类脂质；将所述分离的脂质引导至检测器；以及基于检测器数据与用已知浓度的该组标准品生成的校准曲线之间的比较来定量分离的脂质。在一个示例性实施方案中，检测器被配置成使用多反应监测(MRM)转变执行分离的脂质的靶向定量。在另一个示例性实施方案中，MRM转变以正离子模式和负离子模式两者执行。在另一个示例性实施方案中，MRM转变可为脂肪酰链片段、头基片段、或中性丢失片段。在另一个示例性实施方案中，脂质的类型包括单取代基甘油糖脂(monoradylglycerolipids)(MG)、二取代基甘油糖脂(diradylglycerolipids)(DG)、三取代基甘油糖脂(triradylglycerolipids)(TG)、神经酰胺、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、磷脂酰胆碱(PC)、鞘磷脂(SM)、游离脂肪酸(FFA)、溶血磷脂酰肌醇(LPI)、磷脂酸(PA)、溶血磷脂酸(LPA)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、胆固醇、胆固醇酯、己异辛基神经酰胺、双己异辛基神经酰胺、脂蛋白(a)(LPA)、脂多糖(LPS)或赖氨酰-磷脂酰甘油(LPG)。在另一个示例性实施方案中，色谱系统是亲水相互作用色谱(HILIC)系统。在另一方面，本技术涉及一种用于鉴定潜在生物标志物的方法。该方法包括选择一组标准品以鉴定至少一类脂质；将该组标准品与多个与医学病症相关联的生物样品组合以形成样品基质；将所述样品基质引入色谱系统中以分离所述至少一类脂质；将所述分离的脂质引导至检测器；基于检测器数据与用已知浓度的该组标准品生成的校准曲线之间的比较来定量分离的脂质；以及确定所述分离的脂质与所述医学病症之间的关系。在一个示例性实施方案中，检测器被配置成使用多反应监测(MRM)转变执行分离的脂质的靶向定量。在另一个示例性实施方案中，MRM转变以正离子模式和负离子模式两者执行。在另一个示例性实施方案中，MRM转变可为脂肪酰链片段、头基片段、或中性丢失片段。在另一个示例性实施方案中，脂质的类型包括单取代基甘油糖脂(MG)、二取代基甘油糖脂(DG)、三取代基甘油糖脂(TG)、神经酰胺、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、磷脂酰胆碱(PC)、鞘磷脂(SM)、游离脂肪酸(FFA)、溶血磷脂酰肌醇(LPI)、磷脂酸(PA)、溶血磷脂酸(LPA)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、胆固醇、胆固醇酯、己异辛基神经酰胺、双己异辛基神经酰胺、脂蛋白(a)(LPA)、脂多糖(LPS)或赖氨酰-磷脂酰甘油(LPG)。在另一个示例性实施方案中，色谱系统是亲水相互作用色谱(HILIC)系统。在另一方面，本技术涉及用于诊断筛选的方法。该方法包括选择一组标准品以鉴定至少一类脂质，其中该至少一类脂质的增加或减少的存在指示医学病症。该方法还包括将该组标准品与生物样品组合以形成样品基质；将所述样品基质引入色谱系统中以分离所述至少一类脂质；以及将所述分离的脂质引导至检测器以确定来自所述生物样品的所述至少一类脂质的量。在一个示例性实施方案中，检测器被配置成使用多反应监测(MRM)转变执行分离的脂质的靶向定量。在另一个示例性实施方案中，MRM转变以正离子模式和负离子模式两者执行。在另一个示例性实施方案中，MRM转变可为脂肪酰链片段、头基片段、或中性丢失片段。在另一个示例性实施方案中，脂质的类型包括单取代基甘油糖脂(MG)、二取代基甘油糖脂(DG)、三取代基甘油糖脂(TG)、神经酰胺、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、磷脂酰胆碱(PC)、鞘磷脂(SM)、游离脂肪酸(FFA)、溶血磷脂酰肌醇(LPI)、磷脂酸(PA)、溶血磷脂酸(LPA)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、胆固醇、胆固醇酯、己异辛基神经酰胺、双己异辛基神经酰胺、脂蛋白(a)(LPA)、脂多糖(LPS)或赖氨酰-磷脂酰甘油(LPG)。在另一个示例性实施方案中，色谱系统是亲水相互作用色谱(HILIC)系统。本技术的上述方面提供了许多优点。具体地讲，本文所述技术的示例提供对血浆和血清中的106种含胆碱磷脂(61种PC、24种SM和21中LPC)、24种神经酰胺、23种己糖基神经酰胺、24种FFA和鞘氨醇的快速定量。本文所公开的示例性实施方案还提供了用于分析血浆中极性和非极性脂质类型的高通量(低至8分钟)、定量和全面的LC/MS/MS方法。示例性实施方案还可提供用于快速分离16种极性脂质类型和非极性脂质类型，以及从血浆样品定量504种脂质物质(250种正离子模式进样和254种负离子模式进样)的方法。本文所公开的示例性实施方案还可使用MRM转变来改善磷脂酰胆碱(PC)的鉴定和特异性。应当理解，以下更详细讨论的前述概念和附加概念的所有组合(前提条件是此类概念不相互矛盾)被设想为是本文所公开的专利技术主题的一部分。具体地，出现在本公开末尾的受权利要求保护的主题的所有组合被设想为本文所公开的专利技术主题的一部分。还应当理解，也可出现在以引用方式并入的任何公开中的本文明确采用的术语应被赋予与本文所公开的特定概念最一致的含义。附图说明本领域普通技术人员将理解，附图主要是出于说明性目的并且不旨在限制本文描述的专利技术主题的范围。附图未必按比例绘制；在一些情况下，本文公开的主题的各个方面可能在附图中被夸大或放大以便于理解不同的特征。在附图中，相同的附图标记通常表示相同的特征(例如功能相似和/或结构相似的元件)。图1示出了根据本公开的实施方案，与非靶向方法相比，基于示例性HILIC的全面且高通量非极性脂质类型和极本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于筛选脂质的方法，所述方法包括：/n选择一组标准品以鉴定至少一类脂质；/n将所述标准品与生物样品组合以形成样品基质；/n将所述样品基质引入色谱系统中以分离所述至少一类脂质；/n将所述分离的脂质引导至检测器；以及/n基于检测器数据与用已知浓度的所述组标准品生成的校准曲线之间的比较来定量所述分离的脂质。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180921 US 62/7344101.一种用于筛选脂质的方法，所述方法包括：
选择一组标准品以鉴定至少一类脂质；
将所述标准品与生物样品组合以形成样品基质；
将所述样品基质引入色谱系统中以分离所述至少一类脂质；
将所述分离的脂质引导至检测器；以及
基于检测器数据与用已知浓度的所述组标准品生成的校准曲线之间的比较来定量所述分离的脂质。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述检测器被配置成使用多反应监测(MRM)转变执行所述分离的脂质的靶向定量。


3.根据权利要求2所述的方法，其中所述MRM转变以正离子模式和负离子模式两者执行。


4.根据权利要求3所述的方法，其中所述MRM转变可为脂肪酰链片段、头基片段、或中性丢失片段。


5.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一类脂质包括单取代基甘油糖脂(MG)、二取代基甘油糖脂(DG)、三取代基甘油糖脂(TG)、神经酰胺、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、磷脂酰胆碱(PC)、鞘磷脂(SM)、游离脂肪酸(FFA)、溶血磷脂酰肌醇(LPI)、磷脂酸(PA)、溶血磷脂酸(LPA)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、胆固醇、胆固醇酯、己异辛基神经酰胺、双己异辛基神经酰胺、脂蛋白(a)(LPA)、脂多糖(LPS)或赖氨酰-磷脂酰甘油(LPG)。


6.根据权利要求1所述的方法，其中所述色谱系统是亲水相互作用色谱(HILIC)系统。


7.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括：从所述样品基质中提取所述脂质包括使用利用预冷异丙醇的蛋白质沉淀。


8.一种用于鉴定潜在生物标志物的方法，所述方法包括：
选择一组标准品以鉴定至少一类脂质；
将所述组标准品与多个与医学病症相关联的生物样品组合以形成样品基质；
将所述样品基质引入色谱系统中以分离所述至少一类脂质；
将所述分离的脂质引导至检测器；
基于检测器数据与用已知浓度的所述组标准品生成的校准曲线之间的比较来定量所述分离的脂质；以及
确定所述分离的脂质与所述医学病症之间的关系。


9.根据权利要求8所述的方法，其中所述检测器被配置成使用多反应监测(MRM)转变执行所述分离的脂质的靶向定量。


10.根据权利要求9所述的方法，其中所述MRM转变以正离子模式和负离子模式两者执行。


11.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·格兴斯，G·M·伊萨克，N·C·孟乔马，R·S·普伦布，P·雷恩维尔，
申请(专利权)人：沃特世科技公司，
类型：发明
国别省市：美国;US