一种血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂及其制备方法技术

本发明专利技术属于凝血检测技术领域，具体涉及一种血小板聚集功能二磷酸腺苷检测试剂及其制备方法。该二磷酸腺苷检测试剂包括二磷酸腺苷二钠和冻干保护剂，所述冻干保护剂包括糖类冻干保护剂和聚合物类冻干保护剂。该检测试剂充分考虑诊断试剂对抗血小板药物的不同反应性，对目前临床上常用的氯吡格雷、替格瑞洛和普拉格雷等均有较好的灵敏度。本发明专利技术的二磷酸腺苷杯检测试剂用于服药后肝素钠抗凝血液检验，其检验结果准确性好，批内和批间精密度高。

【技术实现步骤摘要】
一种血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂及其制备方法
本专利技术属于凝血功能
，具体涉及一种血小板聚集功能检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
血栓弹力图（TEG）是一种对血小板聚集、凝血、纤溶等整个过程实施实时、动态、连续监测的凝血功能分析仪，对病人凝血状况做出定性或定量分析。血栓弹力图仪于1948年由德国人Harter专利技术，应用于指导临床术中输血，目前已成为检测凝血功能最重要的手段之一。血栓弹力图检测血液凝血功能的原理是将传感器探头浸入血液标本中，血液标本与传感器探头间存在粘滞力，该粘滞力随着血小板聚集、凝血、纤溶等变化而改变，传感器的悬垂丝在这种粘滞力的作用下发生扭转形变，这种扭转形变被检测单元检测到并转化为电信号反馈给控制系统，控制系统接收到变化的信号后进行运算，并将运算结果以曲线图形和实时数据的形式显示在计算机屏幕上。血栓弹力图（TEG）使用经抗凝处理的全血，从内外源性凝血途径激活凝血、纤溶系统系统，从而更全面、更真实地反映人体凝血因子、血小板、纤维蛋白及纤维蛋白溶解的整个过程。血小板的主要功能是凝血、止血、修补破损的血管。血小板表面与凝血功能相关的受体ADP受体、α及β-肾上腺受体、凝血酶（原）受体、胶原受体（GPⅠa/Ⅱa、GPⅣ、GP-Ⅵ）、TXA2/PGH2受体、PGI2/PGE1受体、5-羟基色胺受体、肝素受体、PFA（血小板激活因子）受体、纤维蛋白原受体、Ca2+受体纤维连接蛋白受体、血小板因子4受体、血管紧张素Ⅱ受体、LDL受体、HDL受体、vWF受体（GPⅠb/Ⅸ）和GPⅡb/Ⅲa（纤维蛋白原受体）等。血小板GPⅡb/Ⅲa膜受体是位于血小板表面的的粘附性糖蛋白，是血小板表面数量最多的一种整合素，血小板表面约有5×104~8×104个GPⅡb/Ⅲa膜受体。ADP、AA、凝血酶等可以激活血小板，使其表面的GPⅡb/Ⅲa膜受体构象发生变化，从而使GPⅡb/Ⅲa膜受体对可溶性纤维蛋白原、vWF等亲和力增加，最终使血小板聚集在桥联纤维蛋白、vWF上，形成血小板血栓。ADP是人体内最重要的诱导血小板聚集的物质。一方面，ADP与血小板膜受体P2Y1受体结合后，与Gq蛋白耦联激活磷酯酶C，使Ca2+从细胞外流入细胞内，细胞内Ca2+浓度的升高激活了蛋白激酶C，引起血小板变形和聚集；另一方面，ADP与血小板P2Y12膜受体结合，与Gi蛋白耦联，抑制腺苷酸环化酶AC的活化，降低了血小板中cAMP的水平，诱发血小板的聚集。氯吡格雷经肝脏细胞色素P450酶代谢形成活性物质，不可逆地与血小板P2Y12膜受体结合，阻断ADP对腺苷酸环化酶AC的抑制作用，促进舒血管物质磷酸蛋白VASP（依赖于环磷酸腺苷、并被前列腺素E1所刺激）的磷酸化，抑制GPⅡb/Ⅲa膜受体的活化，从而抑制血小板聚集。氯吡格雷作为一种常见的抗血小板聚集药物，广泛用于急性冠脉综合征、缺血性脑血栓、动脉硬化及血栓栓塞等引起的并发症。目前血栓弹力图（TEG）在检测血小板聚集功能时缺乏足够的灵敏度，即对服用氯吡格雷类药物的患者标本不能有效检出，或者虽能有效检出，但和其他方法相比不能比较真实的反映血小板被抑制的程度。
技术实现思路
针对目前的检测试剂对服用氯吡格雷类药物的患者标本不能有效检出，即使能有效检出，但和其他方法相比不能比较真实的反映血小板被抑制的程度的缺陷和问题，本专利技术提供一种血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂。本专利技术解决其技术问题所采用的方案是：一种血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，包括二磷酸腺苷二钠和冻干保护剂。上述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，所述二磷酸腺苷的添加量为0.012%。上述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，所述冻干保护剂包括糖类冻干保护剂和聚合物类冻干保护剂。上述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，所述糖类冻干保护剂为海藻糖、蔗糖、葡聚糖、葡萄糖中的一种或几种。上述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，所述糖类保护剂为海藻糖，海藻糖的添加量为1%。上述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，所述聚合物类冻干保护剂为牛血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇中的一种或几种。上述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，所述聚合物类冻干保护剂为牛血清白蛋白，牛血清白蛋白的添加量为2%。本专利技术还提供一种血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂的制备方法，包括以下步骤：（1）按配方量量取冻干保护剂，加入蒸馏水或纯化水充分溶解得到冻干保护剂溶液；（2）按配方量称取二磷酸腺苷二钠，将其倒入冻干保护剂溶液中，混合均匀得到二磷酸腺苷检测试剂母液；（3）将二磷酸腺苷检测试剂按照每瓶20-60微升分装至西林瓶中得到成品二磷酸腺苷检测试剂；（4）将二磷酸腺苷检测试剂真空冷冻干燥得到二磷酸腺苷试剂冻干品。上述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂的制备方法，二磷酸腺苷检测试剂按照每瓶40微升分装至西林瓶中。本专利技术的有益效果：本专利技术充分考虑诊断试剂对抗血小板药物的不同反应性，对目前临床上常用的氯吡格雷、替格瑞洛和普拉格雷等均有较好的灵敏度。本专利技术二磷酸腺苷杯检测试剂用于服药后肝素钠抗凝血液检验，其检验结果准确性好，批内和批间精密度高。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进一步说明。实施例1：本实施例提供一种血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，该检测试剂包括二磷酸腺苷二钠和冻干保护剂，其中冻干保护剂包括糖类冻干保护剂和聚合物类冻干保护剂，糖类冻干保护剂可以为海藻糖、蔗糖、葡聚糖、葡萄糖中的任一种或任几种；聚合物类冻干保护剂可以为牛血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇中的任一种或任几种。本实施选择海藻糖和牛血清白蛋白作为冻干保护剂。本实施例的二磷酸腺苷杯检测试剂总量为40微升，按体积比各原料的用量分别为：二磷酸腺苷二钠0.012%、牛血清白蛋白2.0%、海藻糖1.0%，余量为蒸馏水。制备方法：（1）按配方量量取牛血清白蛋白和海藻糖，加入蒸馏水或纯化水充分溶解得到冻干保护剂溶液；（2）按配方量称取二磷酸腺苷二钠，将其倒入冻干保护剂溶液中，混合均匀得到二磷酸腺苷检测试剂母液；（3）将二磷酸腺苷检测试剂按照每瓶40微升分装至西林瓶中得到成品二磷酸腺苷检测试剂；（4）将二磷酸腺苷检测试剂真空冷冻干燥得到二磷酸腺苷试剂冻干品。实施例2：本实施例的二磷酸腺苷杯检测试剂总量为60微升，按体积比各原料的用量分别为：二磷酸腺苷二钠0.02%、牛血清白蛋白3.0%、海藻糖2.0%，余量为蒸馏水。制备方法：（1）按配方量量取牛血清白蛋白和海藻糖，加入蒸馏水或纯化水充分溶解得到冻干保护剂溶液；（2）按配方量称取二磷酸腺苷二钠，将其倒入冻干保护剂溶液中，混合均匀得到二磷酸腺苷检测试剂母液；（3）将二磷酸腺苷检测试剂按照每瓶60微升分装至西林瓶中得到成品二磷酸腺苷检测试剂；（4）将二磷酸腺苷检测试剂真空冷冻干燥得到二磷酸腺苷试剂冻干本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，其特征在于：包括二磷酸腺苷二钠和冻干保护剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，其特征在于：包括二磷酸腺苷二钠和冻干保护剂。


2.根据权利要求1所述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，其特征在于：所述二磷酸腺苷的添加量为0.012%。


3.根据权利要求1所述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，其特征在于：所述冻干保护剂包括糖类冻干保护剂和聚合物类冻干保护剂。


4.根据权利要求3所述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，其特征在于：所述糖类冻干保护剂为海藻糖、蔗糖、葡聚糖、葡萄糖中的一种或几种。


5.根据权利要求4所述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，其特征在于：所述糖类保护剂为海藻糖，海藻糖的添加量为1%。


6.根据权利要求3所述的血小板聚集功能二磷酸腺苷杯检测试剂，其特征在于：所述聚合物类冻干保护剂为牛血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晓培，张娟丽，于婷，李伟甲，杨会，孟兵涛，
申请(专利权)人：郑州普湾医疗技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41