氯胺酮半抗原、人工抗原、抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及氯胺酮检测技术领域，具体而言，涉及一种氯胺酮半抗原、人工抗原、抗体及其应用。氯胺酮半抗原，其为式I所示的化合物。本发明专利技术针对氯胺酮，制备通过氯胺酮分子苯环上衍生丁酸手臂的羧基型半抗原KET‑1作为免疫原和酶标抗原，制备的针对氯胺酮的多克隆抗体，对常见毒品甲基苯丙胺、吗啡、可卡因、四氢大麻酚无明显交叉反应，建立的酶联免疫检测方法可以实现对氯胺酮的特异性检测，方便快捷，为检测毛发中氯胺酮提供了快速高效的检测手段。

【技术实现步骤摘要】
氯胺酮半抗原、人工抗原、抗体及其应用
本专利技术涉及氯胺酮检测
，具体而言，涉及一种氯胺酮半抗原、人工抗原、抗体及其应用。
技术介绍
氯胺酮(C13H16ClNO,Ketamine)呈白色粉末状，在医学临床上一般作为麻醉剂使用。因其服食后会产生意识与感觉分离状态，引起精神错乱、过度兴奋后抑郁等精神病性症状，国家将其列入麻醉药品管理并予以管制，明令禁止非法使用。以氯胺酮为主要成分的毒品俗称K粉，过量吸食易导致膀胱萎缩，甚至可引起呼吸停止。吸食氯胺酮后，药物残留会在毛发中长期蓄积，一般认为贴近头皮的3cm发根即可反映6个月的吸毒史，因此毛发检材司法鉴定中理想的生物检材。建立毛发中氯胺酮的快速高通量筛查方法，对于打击犯罪、缉毒禁毒具有重要意义，同时满足了特种高危职业涉毒安全体检的需求。目前对氯胺酮进行检测的方法主要是液相-色谱联用质谱法，该方法准确可靠，常作为确证方法，但存在设备昂贵、需要专业人员、耗时长等不足，不适合应用于大规模筛查。免疫检测技术是基于抗原抗体特异性反应的分析方法，具有灵敏、快速、速高通量等特点，可与仪器确证技术搭配应对毒品快速筛查需求。研究毛发中氯胺酮酶联免疫检测方法(ELISA)，对于毒品规模化样品快筛和检测具有非常重要的经济和社会意义。
技术实现思路
本专利技术涉及式I所示的化合物：根据本专利技术的第二方面，涉及氯胺酮人工抗原，其为如上所述的化合物与免疫原性载体的偶联物。可选的，如上所述的氯胺酮人工抗原，其具有式II所示的化学式：r>可选的，如上所述的氯胺酮人工抗原，所述免疫原性载体选自钥孔血蓝蛋白、牛血清白蛋白、人血清白蛋白、乳铁蛋白、辣根过氧化物酶、甲状腺球蛋白、免疫球蛋白、激素以及卵清蛋白中的至少一种。根据本专利技术的第三方面，涉及一种抗体，其由如上所述的氯胺酮人工抗原免疫得到。根据本专利技术的第四方面，涉及含有如上所述抗体的氯胺酮检测试剂盒或试纸条。可选的，如上所述的试剂盒，其还含有偶联有信号物质的氯胺酮或式I所示的化合物、固相载体、反应缓冲液、封闭液、洗涤液、氯胺酮标准品以及阴性对照中的一种或多种。可选的，如上所述的试剂盒，所述抗体固定包被于所述固相载体上。可选的，如上所述的试剂盒，所述固相载体选自试管、EP管、多孔板、微量反应板凹孔或微球。可选的，如上所述的试剂盒，所述信号物质选自发色团、地高辛标记探针、电子致密物质、胶体金和酶中的任一种或多种。根据本专利技术的第五方面，还涉及如上所述的抗体或如上所述的试剂盒或试纸条在检测氯胺酮中的应用。可选的，如上所述的应用，待检测的样本为血液、尿液或毛发。本专利技术的有益效果为：本专利技术针对氯胺酮，制备氯胺酮分子苯环上衍生丁酸手臂的羧基型半抗原KET-1并偶联不同免疫原性载体作为免疫原和酶标抗原，制备的针对氯胺酮的多克隆抗体，对常见毒品甲基苯丙胺、吗啡、可卡因、四氢大麻酚无明显交叉反应，建立的酶联免疫检测方法可以实现对氯胺酮的特异性检测，方便快捷，为检测毛发中氯胺酮提供了快速高效的检测手段。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术一个实施例中KET-1质谱鉴定图；图2为本专利技术一个实施例中对载体蛋白特征吸收峰的检测结果；图3为本专利技术一个实施例中氯胺酮酶联免疫检测标准曲线。具体实施方式现将详细地提供本专利技术实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本专利技术。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本专利技术进行多种修改和变化而不背离本专利技术的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。本专利技术涉及式I所示的化合物：上述化合物可作为氯胺酮的半抗原使用，该半抗原最大程度保留了氯胺酮的官能团的结构特征，经此半抗原制备得到的氯胺酮人工抗原能够发挥出最佳的构效优势，从而得到特异性强、灵敏度更高的抗体。术语“半抗原”是指部分或不完全抗原。半抗原是不能刺激抗体形成但与抗体反应的无蛋白质的物质。本专利技术还涉及一种氯胺酮人工抗原，其为如上所述的化合物与免疫原性载体的偶联物。在一些实施方式中，所述的氯胺酮人工抗原具有式II所示的化学式：本文使用的“免疫原性载体”是免疫原性物质，通常为蛋白质，其能够在一个或多个位置处与半抗原接合，从而使得能够产生可与这些半抗原结合的抗体。免疫原性载体物质的示例包括但不限于被认定为是外来的并从而引发宿主免疫应答的蛋白质、糖蛋白、复合聚氨基多糖、颗粒以及核酸。聚氨基多糖可使用已知用于此制备的任何常规方法由多糖进行制备。各种蛋白质类型可以用作免疫原性载体，在一些优选的实施方式中，所述载体蛋白选自钥孔血蓝蛋白、牛血清白蛋白、人血清白蛋白、乳铁蛋白、辣根过氧化物酶、甲状腺球蛋白、免疫球蛋白、激素(例如胰岛素)以及卵清蛋白中的至少一种。免疫原性载体还可包括聚氨基多糖，这些聚氨基多糖是通过单糖的重复缩合而构建成的高分子量聚合物。多糖的示例为淀粉、糖原、纤维素、碳水化合物、树胶诸如阿拉伯树胶、琼脂等。多糖还包含聚(氨基酸)残基和/或脂质残基。免疫原性载体还可以为单独的或缀合至上述聚(氨基酸)或多糖中的一个的聚(核酸)。免疫原性载体还可包括固体颗粒。颗粒的直径通常为至少约0.02微米(μm)且不超过约100μm，并且通常为约0.05μm至10μm。颗粒可以为有机或无机的、溶胀性的或非溶胀性的、多孔的或无孔的，最佳为接近于水的密度，一般为约0.7至1.5g/mL，并且由可为透明的、部分透明的或不透明的材料构成。颗粒可以为生物材料，诸如细胞和微生物，包括非限制性的示例诸如红细胞、白细胞、淋巴细胞、杂交瘤、链球菌(Streptococcus)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大肠杆菌(E.coli)和病毒。颗粒也可包含有机和无机聚合物、脂质体、胶乳、磷脂囊泡或脂蛋白。本专利技术还提供抗体，其由如上所述的氯胺酮人工抗原免疫得到。术语“抗体”是指能够结合抗原或其部分(根据本专利技术，能够结合至抗精神病药物或其代谢物)的特异性蛋白质。抗体是响应于通过注射被引入到宿主，例如动物或人体内的免疫原而产生的。抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体，也可以是他们的抗体片段。“抗体”是指完整的抗体或本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.式I所示的化合物：/n

【技术特征摘要】
1.式I所示的化合物：





2.氯胺酮人工抗原，其为权利要求1所述的化合物与免疫原性载体的偶联物。


3.根据权利要求2所述的氯胺酮人工抗原，其具有式II所示的化学式：





4.根据权利要求2或3所述的氯胺酮人工抗原，所述免疫原性载体选自钥孔血蓝蛋白、牛血清白蛋白、人血清白蛋白、乳铁蛋白、辣根过氧化物酶、甲状腺球蛋白、免疫球蛋白、激素以及卵清蛋白中的至少一种。


5.抗体，其由权利要求2～4任一项所述的氯胺酮人工抗原免疫得到。


6.含有权利要求5所述抗体的氯胺酮检测试剂盒或试纸条。


7.根据权利要求6所述的试剂盒，其还...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓云，黄健欣，袁强，
申请(专利权)人：广州正孚检测技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44