一种用于检测核酸的免标记银纳米簇分子信标的合成方法技术

一种免标记检测核酸的荧光生物传感器，它涉及荧光生物传感器的制备方法，用途及检测方法。本发明专利技术的目的是：构建并制备一种新型的可用于检测核酸的荧光生物传感器，通过对显著增高的荧光强度的检测实现对核酸的超高灵敏度检测。方法：一、合成DNA

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测核酸的免标记银纳米簇分子信标的合成方法


[0001]本专利技术属于荧光生物传感器
，具体涉及一种荧光生物传感器的制备及免标记检测核酸的应用。

技术介绍

[0002]分子信标(MB)是一种发夹状茎环结构的寡核苷酸探针，专利技术于1996年。分子信标在两个终端分别含有荧光基团和猝灭基团。靶标DNA存在时，环状区可以与靶DNA杂化，破坏发夹状结构，荧光基团和猝灭基团由于空间距离增加而发出荧光。与此相反的是靶标DNA不存在时，分子信标的茎干区碱基互补，荧光基团和猝灭基团相互靠近，发生荧光猝灭，基于荧光共振能量转移原理，分子信标被广泛应用于核酸检测分析，DNA
‑
蛋白质的相互作用，DNA芯片和DNA传感器。金属纳米簇分子信标可以优化传统分子信标法复杂的标记过程，昂贵的成本和长时间的检测。
[0003]在荧光金属纳米簇中，银纳米簇一直是研究的热点。银纳米簇是由几个或数十个原子构成的一种极小的粒子，处于银原子和纳米颗粒之间的一种过渡态，具有优良的光化学性质。化学法，光分解法，辐射分解法和声化学法等均可以合成银纳米簇本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免标记检测核酸的荧光生物传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(1)合成DNA
‑
Ag纳米簇：
①
将10uL单链DNA1浓度为(10
µ
M~100
µ
M)加入小管与50
µ
L的Tris缓冲溶液(pH=7.4)(100mmol/L~150mmol/L)混合，加入40uL水，在室温条件下震荡30min；
②
将100
µ
L的Tris缓冲溶液(pH=7.4)(100mmol/L~150mmol/L)和80uL水加入到上述混合液中；随后将10
µ
LAgNO3溶液(浓度为40
µ
M~200
µ
M)10
µ
LNaBH4(浓度为40
µ
M~200
µ
M)加入到混合溶液中，该混合溶液在25
O
C下水浴震荡6h，荧光Ag纳米簇形成；(2)根据上述步骤，进行核酸检测；(3)绘制标准曲线：首先将10
µ
LDNA1分别加入到编号为
①
到
⑦
的7个小管中，其中，
①
号不加HIV溶液，
②
号加入0.01
µ
M HIV溶液，
③
号加入0.05
µ
M HIV溶液，
④
号加入0.1
µ
M HIV溶液，
⑤
号加入0.5
µ
M HIV溶液，
⑥
号加入1
µ
M HIV溶液，
⑦
号加入未知浓度HIV溶液；分别向编号为
①
到
⑦
的混合溶液中分别依次加入10
µ

【专利技术属性】
技术研发人员：娄大伟，赵影，张浩，连丽丽，王希越，高文秀，祝波，
申请(专利权)人：吉林化工学院，
类型：发明
国别省市：