一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液制造技术

一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液，本发明专利技术提出了一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液，包括：Tris

【技术实现步骤摘要】
一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液


[0001]本专利技术涉及裂解液领域，尤其涉及一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液。

技术介绍

[0002]目前，在生物及医学
中使用传统的离心柱法或磁珠法进行核酸提取时，一般需要进行裂解、结合、漂洗、洗脱等步骤。首先使用蛋白酶K、表面活性剂等成分，通过热浴等途径破坏细胞结构，释放核酸进入溶液；然后加入高浓度的离液盐和乙醇、异丙醇等成分，使核酸与吸附膜或磁珠结合；再对吸附膜或磁珠进行漂洗，去除抑制物；最后将吸附膜或磁珠上的核酸洗脱，获得核酸样本。
[0003]这个流程的第一个关键步骤就是对细胞进行裂解，所用到的关键耗材就是裂解液。如果样本细胞裂解不充分，目标核酸就不能充分释放至溶液中，这样会降低可提取的核酸量、降低后续相关实验的效率。
[0004]另外，由于裂解、结合、漂洗步骤可能会在不同的离心管中进行，需要将含有核酸的溶液进行转移操作，在这个过程中，因为离心管壁和移液器的吸头壁的吸附，可能造成核酸的损失，如果操作不谨慎，还有液体飞出，可能会再次造成核酸损失。如果核酸提取不充分，就会与后续风险产生不良联动，导致实验失败风险增加。
[0005]此外，当前市场上的产品核酸提取时间较长，一般达到20
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45分钟以上，其中大量时间用于细胞的裂解过程，过长的等待时间降低了实验人员的工作效率。

技术实现思路

[0006](一)专利技术目的
[0007]为解决
技术介绍
中存在的技术问题，本专利技术提出一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液，工作效率高，使用方便。
[0008](二)技术方案
[0009]为解决上述问题，本专利技术提出了一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液，包括：Tris
‑
HCl、EDTA、NaAc和SDS；
[0010]其中，Tris
‑
HCl为1mM
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1M；EDTA为5
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25mM；NaAc为1
‑
10M；
[0011]SDS占总质量的1
‑
3％。
[0012]优选的，包括：Tris
‑
HCl：100mM；EDTA：20mM；NaAc：1.4M；
[0013]其中，SDS占总质量的2％。
[0014]优选的，其使用方法包括以下步骤：
[0015]S1：取液体样本500微升；10000RPM条件下，离心30s，取上清液；
[0016]S2：上清液中，加入快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液1000微升，混匀30秒；
[0017]S3：解步骤完成，进行后续操作。
[0018]本专利技术，通过化学原理可迅速破坏细胞膜结构，达到裂解细胞释放核酸的目的，同时使核酸溶解于试剂中并带一定电荷，便于下一步对核酸的吸附、提纯等操作步骤，提高核酸提取的效率；可同时优化提取步骤流程，减少中转管的使用，避免液体在离心管间移动和移液器吸头移液导致的微量核酸损失，进一步提高核酸提取效率。
[0019]本专利技术，可以有效地裂解各种类型检测材料尤其是针对痕量(如法医鉴定)样品的检测材料中的含核酸成分，充分释放细胞内核酸并保持核酸的可溶状态，减少了裂解工作所使用的时间，并可迅速进入下一步的吸附和纯化步骤，提高了核酸提取的工作效率。
具体实施方式
[0020]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面结合具体实施方式，对本专利技术进一步详细说明。应该理解，这些描述只是示例性的，而并非要限制本专利技术的范围。此外，在以下说明中，省略了对公知结构和技术的描述，以避免不必要地混淆本专利技术的概念。
[0021]本专利技术提出的一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液，包括：Tris
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HCl、EDTA、NaAc和SDS；
[0022]其中，Tris
‑
HCl为1mM
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1M；EDTA为5
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25mM；NaAc为1
‑
10M；
[0023]SDS占总质量的1
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3％。
[0024]在一个可选的实施例中，Tris
‑
HCl：100mM；EDTA：20mM；NaAc：1.4M；
[0025]其中，SDS占总质量的2％。
[0026]本专利技术，能够迅速高效地实现细胞的裂解，而且细胞裂解后核酸不会沉淀，可以迅速进入下一步的吸附和纯化步骤，不仅可以使样本核酸充分释放到溶液中，还可以大幅减少实验时间，提高实验人员的工作效率，使本专利技术及产品具备广阔的市场前景。
[0027]本专利技术，可以有效地裂解各种类型检测材料尤其是针对痕量(如法医鉴定)样品的检测材料中的含核酸成分，充分释放细胞内核酸并保持核酸的可溶状态，减少了裂解工作所使用的时间，并可迅速进入下一步的吸附和纯化步骤，提高了核酸提取的工作效率。
[0028]在一个可选的实施例中，快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液的使用方法包括以下步骤：
[0029]S1：取液体样本500微升；10000RPM条件下，离心30s，取上清液；
[0030]S2：上清液中，加入快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液1000微升，混匀30秒；
[0031]S3：解步骤完成，进行后续操作。
[0032]需要说明的是，本专利技术的裂解液具备快速裂解功能，省却了蛋白酶K的使用，省却了热浴的步骤。
[0033]综上，本专利技术，改进了核酸提取的相关试剂和方法，简化提取步骤，提高细胞的裂解效率和减少可能发生的核酸损失情况；改进了核酸提取装置的结构，尽量避免含有核酸的溶液成分的转移和离心柱、离心管等中转管使用情况的出现，以利于节约时间和减少核酸损失。
[0034]本专利技术，通过化学原理可迅速破坏细胞膜结构，达到裂解细胞释放核酸的目的，同时使核酸溶解于试剂中并带一定电荷，便于下一步对核酸的吸附、提纯等操作步骤，提高核酸提取的效率；可同时优化提取步骤流程，减少中转管的使用，避免液体在离心管间移动和
移液器吸头移液导致的微量核酸损失，进一步提高核酸提取效率。
[0035]应当理解的是，本专利技术的上述具体实施方式仅仅用于示例性说明或解释本专利技术的原理，而不构成对本专利技术的限制。因此，在不偏离本专利技术的精神和范围的情况下所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。此外，本专利技术所附权利要求旨在涵盖落入所附权利要求范围和边界、或者这种范围和边界的等同形式内的全部变化和修改例。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解液，其特征在于，包括：Tris
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HCl、EDTA、NaAc和SDS；其中，Tris
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HCl为1mM
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1M；EDTA为5
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25mM；NaAc为1
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10M；SDS占总质量的1
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3％。2.根据权利要求1所述的快速裂解细胞、病毒及细菌进行核酸提取的裂解...

【专利技术属性】
技术研发人员：李亮，樊福好，贺南航，刘新颖，
申请(专利权)人：广州博江生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：