一种高效提取人大量粪便样本DNA提取方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种大量提取转化粪便DNA的方法。现有技术很繁琐而且耗时，且由于粪便样本中成分复杂，提取的DNA由于含量少，不稳定，对粪便DNA分子诊断的准确性造成干扰。本发明专利技术中的裂解液能够充分裂解粪便样本，并彻底去除粪便中的抑制下游PCR反应的成；并且操作简便快速，所得DNA纯度与浓度符合要求，磁珠的应用可大大提高实验通量，可用于粪便DNA提取的自动化应用，可以充分满足下游检测实验的要求，尤其是高灵敏度检测项目的需求，填补了商品化试剂盒和现有方法的空白。试剂盒和现有方法的空白。

【技术实现步骤摘要】
一种高效提取人大量粪便样本DNA提取方法及试剂盒


[0001]本专利技术属于生物
，涉及自非损伤性取样材料中提取DNA的方法，具体涉及一种大量人类粪便DNA高效提取方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]人类消化道肿瘤包括大肠癌，胃癌和食管癌。中国不仅是胃癌高发大国，还是胃癌死亡大国。这不是因为中国人的人种与外国人有区别，更多的是和饮食习惯以及筛查防控措施有关。根据世界卫生组织的报告，2018年全球有100万例新发胃癌，同时超过78万将会因胃癌而死亡，胃癌是发病率第五高、死亡率第三高的癌症。男性发病率是女性的两倍。在东亚（例如日本和韩国），胃癌发病率明显升高，中国胃癌发病人数占全球所有胃癌新发病例的40%以上。早期胃癌和晚期胃癌的治疗完全是天壤之别。美国癌症协会数据显示，最早期胃癌（一期第一阶段）的5年存活率可达71%，最晚期胃癌（四期）的5年存活率只有4%。由于胃壁和结肠壁分为五层，早期胃癌几乎不会发生转移，直接局部切除病灶部位就有很大希望痊愈。目前胃癌早筛技术是胃镜筛查。
[0003]食道癌这种疾病是一种高发的疾病，据有关数据显本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人类大量粪便样本DNA高效提取试剂盒，其特征在于：由以下四种溶液组成：(1) 粪便细胞裂解液：为醋酸钠、硫酸铵、CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)和NaCl的混合溶液，混合溶液中醋酸钠的浓度为50
‑
500mM之间，优选浓度为200 mM；CTAB的质量浓度为0.1
‑
1%之间，优选质量浓度为0.2
‑
0.5%之间； NaCl的浓度为20
‑
600mM之间，优选浓度为50
‑
200mM之间；硫酸铵的浓度为200
‑
950mM之间，优选浓度为350
‑
450mM之间；(2) 杂质沉淀剂：为曲拉通X
‑
100和硫酸氢铵的混合溶液，其中，曲拉通X
‑
100体积比浓度为0.5
‑
3%之间，优选体积比浓度为1
‑
2%之间；硫酸氢铵的浓度为500
‑
1500mM之间，优选浓度为800
‑
1000mM之间；(3) DNA结合液：为NaCl、乙酸钾和异丙醇的混合溶液，其中，NaCl的浓度为500mM
‑
2M之间，优选浓度为1
‑
2M之间；异丙醇体积浓度为10
‑
30%之间，优选浓度为15
‑
20%之间，乙酸钾的浓度为500mM
‑
2M之间，优选浓度为1
‑
1.5M之间，用醋酸调溶液的pH值为4
‑
5之间，优选PH为4.5；(4) 蛋白杂质去除液：为硫酸铵和盐酸胍的混合溶液，其中，硫酸铵的浓度为300mM
‑
2M之间，优选浓度为205
‑
450mM之间；盐酸胍的浓度为2M
‑
4M之间，优选浓度为2.5M；(5) DNA漂洗液：为NaCl和乙醇的混合物，其中，乙醇的浓度为65
‑
85 vt %之间，优选浓度为75

【专利技术属性】
技术研发人员：贾萌萌，潘韵芝，朱国强，
申请(专利权)人：苏州易迈吉生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：