一种EGF高表达的干细胞温敏凝胶的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种EGF高表达的干细胞温敏凝胶的制备方法及其应用，间充质干细胞具有自我更新和多向分化能力和优异的治疗皮肤组织创伤的功效。EGF可刺激表皮细胞、内皮细胞的增殖，对治疗创面的修复和愈合具有良好的疗效。将EGF基因修饰的脐带间充质干细胞制备为液态的温敏凝胶涂抹剂，涂敷在创伤局部后，在皮肤温度的作用下形成凝胶状固态，使凝胶中的干细胞能长时间固定在创面，并且凝胶支架有利于维持干细胞的干性及多向分化潜能，大大提高干细胞定向迁移至创面并覆盖局部表皮缺损部位并分化成皮肤组织细胞的机率；定植成功的于细胞表达EGF，并持续性地分泌至创面局部以局部表皮细胞及内皮细胞增殖，在三种因素的共同作用下最终加速创面完全愈合。下最终加速创面完全愈合。下最终加速创面完全愈合。

【技术实现步骤摘要】
一种EGF高表达的干细胞温敏凝胶的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及细胞生物学领域，特别是涉及一种EGF高表达的干细胞温敏凝胶的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]皮肤是人体最大的器官，位于人体的表面，是人体的第一道防线。皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成，除此以外还有丰富的血管、淋巴管、神经、肌肉和皮肤附属器(包括毛发、毛囊、皮脂腺、汗腺、甲)。表皮由外胚层分化而来，属于复层鳞状上皮，主要由角质形成细胞和树突状细胞两大类细胞组成；根据角质形成细胞的分化阶段和特点，表皮在光镜下由内向外依次分为基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。基底层细胞不断地增殖产生新的角质形成细胞，又称为生发层。
[0003]皮肤创伤为日常生活中普遍的意外伤害。当受伤面积过大、伤及真皮层时，除了易于发生感染、甚至发生可能危及生命的败血症等并发症外，由于大面积皮肤缺损导致大量基底细胞的缺失、造成表皮缺损愈合困难，甚至大面积皮肤经久不愈。当前临床上用于大面积皮肤缺损的治疗主要是以皮肤软组织扩张术、自体皮肤组织移植或人工皮肤为主，然而治疗价格昂贵且耗时费工，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种EGF高表达的干细胞温敏凝胶的制备方法及其应用，其特征在于：将EGF的核苷酸序列合成后，构建重组慢病毒载体pCDH
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CMV
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EGF质粒，将所述pCDH
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CMV
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EGF质粒用于包装成携带有EGF编码基因的慢病毒，将所述携带EGF编码基因的慢病毒感染P3代的脐带间充质干细胞，得到EGF高表达的脐带间充质干细胞。2.如权利要求1所述的一种EGF高表达的干细胞温敏凝胶的制备方法及其应用，其特征在于：所述的编码EGF的基因片段为序列表SEQ.ID.NO.1所示的核苷酸序列。3.如权利要求1所述的一种EGF高表达的干细胞温敏凝胶的制备方法及其应用，其特征在于：所述P3代的脐带间充质干细胞如下制备：取新生儿的脐带，分离出其中的华氏胶组织，剪碎至0.5mm2大小的组织块贴壁培养，用UltraCUL TURE培养基培养传代，传至P3代时用于此实验。4.如权利要求1所述的一种EGF高表达的干细胞温敏凝胶的制备方法及其应用，其特征在于：将所述携带EGF编码基因的慢病毒感染P3代的间充质干细胞如下操...

【专利技术属性】
技术研发人员：王冰，李治寰，李艳群，卢佳豪，张伟涛，
申请(专利权)人：东莞清实生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：