猪伪狂犬病毒的PMA-qPCR检测方法技术

技术编号:28214827 阅读:30 留言:0更新日期:2021-04-24 14:56
本发明专利技术公开猪伪狂犬病毒的PMA

【技术实现步骤摘要】
猪伪狂犬病毒的PMA

qPCR检测方法


[0001]本专利技术涉及病毒核酸检测领域,具体涉及猪伪狂犬病毒的PMA

qPCR检测方法。

技术介绍

[0002]猪伪狂犬病(Pesedorabies,PR)是由猪伪狂犬病毒(Pesedorabies virus,PRV)引起的猪的急性、烈性和高度接触性传染病。PRV属于疱疹病毒、甲型疱疹病毒亚科的猪疱疹病毒I型,是双链DNA病毒。该病能造成发病公猪出现睾丸炎;妊娠母猪流产,产死胎、弱胎和木乃伊胎;育肥猪呼吸困难、生长停滞;新生仔猪腹泻、呕吐和精神症状并大量死亡。PRV已经给全球养猪业造成了巨大的经济损失。我国PRV仍呈流行趋势,严重制约着养殖业的健康发展。对PRV感染早期进行及时、快速、准确的诊断,是有效防制猪伪狂犬病的重要前提。
[0003]目前,世界各国广泛使用的PRV基因缺失疫苗多为gE、gI基因缺失表型或gE、TK双基因缺失表型,以及gE、gI和TK三基因缺失表型。PRV传统诊断方法包括病毒的分离、动物接种试验、ELISA、病毒中和试验、乳胶凝集本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪伪狂犬病毒的PMA

qPCR检测方法,其特征在于,qPCR扩增的引物是:上游引物:5
’‑
TTTGGATCCATGCGGCCCTTTCTG
‑3’
,下游引物:5
’‑
TTTGAATTCTTACGACACGGCGTCGCA
‑3’
。2.根据权利要求1所述的PMA

qPCR检测方法,其特征在于,PMA工作液的终浓度为50

100μM。3.根据权利要求1所述的PMA

qPCR检测方法,其特征在于,病毒液的稀释倍数为10

1000。4.根据权利要求1

3任一项所述的PMA

qPCR检测方法,其特征在于,所述PMA工作液与所述猪伪狂犬病毒液混合均匀,避光处理13

15min,间隔3

5min摇晃一次,再置于100W蓝光灯下照射18

20min,间隔3

5min摇晃一次。5.根据权利要求4所述的PMA

qPCR检测方法,其特征在于,所述PMA工作液是PMA染料溶解于二甲基亚砜中混合均匀得到的。6.根据权利要求5所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员:汤细彪黄超龙云志李倩倩宋文博黄英刘锦锦杨柳梁巩
申请(专利权)人:武汉科前生物股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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