【技术实现步骤摘要】
一种用于探究古代丝绸微生物劣化机理的老化丝绸样和老化样液的制备方法
[0001]本专利技术涉及文物保护领域，尤其涉及一种用于探究古代丝绸微生物劣化机理的老化丝绸样和老化样液的制备方法。
技术介绍
[0002]古代丝绸具有很高的历史意义和考古意义，是我国文物的重要组成部分。考古发掘出土的丝织品由于长时间埋藏于地下，由于受到体液、尸腐物及微生物的侵蚀，从而变硬、变脆，甚至矿化腐烂。据报道，细菌、霉菌、放线菌等微生物均对丝绸有腐蚀作用。研究微生物对丝织品的老化机理能为丝织品文物加固技术提供进一步的理论支持和实际的指导意义。目前对古代丝绸的劣化主要集中在光、热、酸碱、紫外老化等机理的探究，对微生物劣化机理的研究大多都是集中在劣化对丝织物结构的影响，例如氨基酸序列和含量、二级结构、肽链的构象变化等。而对劣化机理的全面探究不能只从微生物对丝织品结构的作用出发，更要从劣化对微生物机体发生的变化去探讨，而微生物机体发生的变化一般都会体现在劣化样液中物质的变化，例如劣化样液中产生的物质包括小分子代谢物和可溶性蛋白等。因此深入探讨某种菌对丝织品...
【技术保护点】
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.一种用于探究古代丝绸微生物劣化机理的老化丝绸样和老化样液的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）样品采集：选取丝绸文物遗址地劣化丝绸文物表层的土壤，并同时用无菌拭子在丝绸文物表面沿单一方向轻轻擦拭，将带菌试子和土壤两者装入灭菌容器中；在容器中加入无菌磷酸盐缓冲液，35
‑
40℃下恒温振荡，使微生物分散均匀，得到微生物菌液；（2）梯度稀释：用无菌吸管吸取步骤（1）所得微生物菌液加入盛有无菌水的试管中充分混匀，以此为10
‑1稀释液，以此类推分别制成10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5、10
‑6稀释度的菌液；（3）涂布培养：用无菌吸管从步骤（2）所得10
‑4、10
‑5、10
‑6三种稀释度的菌液中分别各准确吸取部分至细菌平板、真菌平板和放线菌平板中央，用无菌玻璃棒在平板表面涂布均匀后将细菌平板倒置于35
‑
40℃恒温培养箱培养1
‑
2d，真菌平板和放线菌平板倒置于25
‑
30℃恒温培养箱中5
‑
7d；（4）划线分离：挑选经涂布培养后平板上的优势单菌落若干个对应接种在三种平板的斜面上，分别置于25
‑
30℃和35
‑
40℃恒温培养箱中培养至菌苔长出后，检查其特征是否一致，同时将细胞涂片染色后用显微镜检查是否为单一的微生物细胞，若发现有杂菌，须再次进行分离纯化，得到若干个纯培养物；（5）降解丝绸微生物的筛选：取0.8
‑
1g现代丝织品并剪碎，并将剪碎所得丝绸碎片添加至细菌平板Ⅰ、真菌平板Ⅱ和放线菌平板Ⅲ中，将步骤（4）挑选的若干个纯培养物对应接种在含有丝绸碎片的三种平板中，观察各个纯培养物的生长情况；多次重复直到筛选出在以丝绸碎片为唯一碳源、氮源的三种平板中生长情况良好的细菌A、真菌B、放线菌C；（6）老化丝绸样和老化样液制备：将现代丝织品剪成丝绸条，经酒精浸泡后用去离子水冲洗多遍，再放入烘箱至烘干；将步骤（5）筛选得到的细菌A、真菌B和放线菌C接种至以丝绸条为唯一氮源、碳源的细菌液体培养基、真菌液体培养基和放线菌液体培养基中恒温静态培养或恒温振荡培养，即得微生物劣化的老化丝绸样和老化样液。2.如权利要求1所述的一种用于探究古代丝绸微生物劣化机理的老化丝绸样和老化样液的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述土壤为劣化丝绸文物表面1
‑
2cm的土壤，恒温振荡时间为20
‑
30min。3.如权利要求1所述的一种用于探究古代丝绸微生物劣化机理的老化丝绸样和老化样液的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述细菌平板制备方法为：1
‑
1.5%丝素蛋白、NaCl 5
‑
7g、柠檬酸钠5
‑
7g、琼脂1.5
‑
2%、Na2HPO4·
12H2O 2.5
‑
4g、水1000mL，pH=7.4
‑
7.6；121℃灭菌21min。4.如权利要求3所述的一种用于探究古代丝绸微生物劣化机理的老化丝绸样和老化样液的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述放线菌平板制备方法为：1
‑
1.5%丝素蛋白、NaCl 0.5
‑
0.7g、KNO
3 1g、K2HPO4·
3H2O 0.5
‑
0.7g，MgCl4·
技术研发人员：王秉，泮林丹，金小康，陈浩，彭志勤，万军民，
申请(专利权)人：浙江理工大学，
类型：发明
国别省市：
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