【技术实现步骤摘要】
一种抗CD105特异性单克隆抗体及其应用
[0001]本专利技术涉及基因工程
,尤其是一种抗CD105特异性单克隆抗体及其应用。
技术介绍
[0002]CD105又名Endoglin,是一种存在于细胞表面的同源二聚体跨膜糖蛋白,能特异性结合转化生长因子β(TGF
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β),TGF
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β是促血管生成作用的多肽细胞因子,可通过调节血管生成、免疫反应和EMT促进肿瘤发生。肿瘤新生血管的生成,在肿瘤增殖与转移中具有重要的作用,CD105作为血管内皮细胞增殖的标志之一,可直接参与血管生成,在肿瘤血管生长过程中发挥重要作用。
[0003]经研究发现,CD105与肺腺癌、肾细胞癌、结直肠癌、乳腺癌、宫颈癌等肿瘤组织都具有密切的关系,CD105在不同来源的恶性肿瘤组织及其周围的血管内皮细胞上强表达,且主要表达于未成熟的血管,而在正常组织血管上不表达。因此,可用于各种恶性肿瘤组织中血管生成的研究,也可作为各种恶性肿瘤的生长、转移及预后的检测指标。
[0004]基于CD105的检测指标在各 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种抗CD105特异性单克隆抗体,其特征在于,其重链可变区具有如SEQ ID No:6所示的氨基酸序列,轻链可变区具有如SEQ ID No:7所示的氨基酸序列。2.一种抗CD105特异性单克隆抗体,其特征在于,编码所述抗CD105特异性单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID No:4所示,编码所述抗CD105特异性单克隆抗体的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ IDNo:5所示。3.根据权利要求1或2所述的抗CD105特异性单克隆抗体,其特征在于,所述抗CD105单克隆抗体为小鼠IgG1亚型单克隆抗体。4.一种抗CD105特异性单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括步骤:S1:免疫:分别用SEQ ID No:1
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3所示的氨基酸序列的合成多肽作为免疫原,经由KLH或OVA偶联后,免疫不同的Balb/c小鼠,免疫后取血测定血清抗体效价,选取与各所述合成多肽一一对应的抗体效价最高的小鼠分别进行细胞融合;S2:细胞融合:骨髓瘤细胞采用鼠来源的sp2/0鼠骨髓瘤样细胞;取小鼠脾淋巴细胞与sp2/0鼠骨髓瘤样细胞进行细胞融合,于HAT培养基中培养,得到杂交瘤细胞;S3:筛选:融合7
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10天内挑选细胞克隆,使用CD105抗原进行ELISA测试,使用CD105阳性组织进行免疫组织化学检测,对阳性细胞...
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