一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物制造技术

本发明专利技术涉及一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物。该活性提取物是将鲜榨刺梨果渣或刺梨果经酒精回流提取、过滤、浓缩去乙醇，加水分散水不溶沉淀并过滤，依次用水和石油醚或正己烷洗涤沉淀，去除水溶性物质和油脂，干燥得到。该活性提取物富含三萜、黄酮成分，对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用，能够用于制备辅助保护急性酒精性肝损伤的药物、辅助药物或作为健康食品添加剂，具有较高的应用价值和市场前景。本发明专利技术既对刺梨产业高值化利用、可持续发展具有重要意义，又为辅助保护急性酒精性肝损伤的药品或保健食品提供了中间体或添加剂原料，制备方法简单易行，成本低，可产业化生产。可产业化生产。可产业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物


[0001]本专利技术涉及刺梨果或刺梨果渣的提取物，特别是一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物。

技术介绍

[0002]刺梨(Rosaroxbughii Tratt)为蔷薇科落叶灌木植物。刺梨果被誉“维C之王”、“中国登义果”以及“炎黄圣果”，是第三代水果(3G)代表的珍贵水果资源。刺梨已被列入卫健委批准的食品新资源名单品种，现为普通食品；1994和2003版《贵州省中药材、民族药材质量标准》均将刺梨收录其中，刺梨具有药用和食用的双重属性。刺梨作为一种食药用经济作物，主产于我国西南地区，已有大量栽培，鲜榨刺梨汁是刺梨果加工的主要方式，产生的刺梨果渣量大，不完全统计，每年果渣有几十万吨，除了少量用于袋泡茶、饲料添加等，大部分没有资源化利用。果渣中含有丰富的黄酮和刺梨三萜类化合物等活性物质，但一直以来对刺梨果渣活性化学成分缺乏系统性研究和开发，资源浪费严重。
[0003]急性酒精性肝损伤是由于一次过量饮酒导致血液中乙醇浓度过高，从而引起头晕、恶心呕吐、昏迷等症状，通过降低机体抗氧化能力，诱导肝脏发生脂质过氧化进而损伤肝细胞，酒精造成肝损伤的主要机制是氧化应激和脂质过氧化反应。梨的药理作用主要包括以下几个方面：抗氧化、延缓衰老、调节机体免疫功能、抗肿瘤、降血糖、解毒镇静、解酒护肝、治疗口腔溃疡、治疗胃溃疡及促消化、抗动脉粥样硬化、抗肾纤维化及辐射防护等(张春妮,周毓,汪俊军.刺梨药理研究的新进展[J].医学研究生学报,2005,18(11):1049
‑
1051；代甜甜,李齐激,南莹,杨小生.刺梨抗氧化活性部位的化学成分[J].中国实验方剂学杂志,2015,21:62
‑
65；戴支凯,余丽梅,杨小生.刺梨提取物(CL)抗肿瘤作用[J].中国中药杂志,2007,14:1453
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1457；秦晶晶,李齐激,薛琰,马琳,杨小生.刺梨总三萜提取方法及其alpha
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葡萄糖苷酶抑制活性研究.食品工业科技,2014,10:186
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189)。刺梨在辅助保护酒精性肝损伤方面，现有技术公开的有刺梨汁或者刺梨多酚对急性酒精中毒大鼠的解酒护肝作用，主要是利用刺梨的抗氧化活性来实现解酒护肝的作用，关于刺梨中总三萜和总黄酮护肝的机理研究较少。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于，提供一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物。一方面为刺梨的高值化利用提供新的途径，另一方面解决刺梨果渣的综合利用问题，助推刺梨产业的可持续发展，同时提供的刺梨活性提取物在急性酒精性肝损伤保护方面效果显著，可以应用开发成药品或者保健食品用于治疗或者预防酒精对肝脏的损伤病症中。
[0005]为实现上述目的，所采取的技术方案为：一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物含有总三萜和总黄酮，其中总三萜的含量为5％～25％；总黄酮的含
量为3％～10％。
[0006]所述的刺梨活性提取物中总三萜包括蔷薇酸、2
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氧代坡模醇酸、Kajiichigoside F1和刺梨酸；所述总黄酮包括槲皮素、儿茶素、二氢杨梅素和芦丁。
[0007]其中所述总三萜的含量为蔷薇酸、2
‑
氧代坡模醇酸、Kajiichigoside F1和刺梨酸的含量总和，总黄酮的含量为槲皮素、儿茶素、二氢杨梅素和芦丁的含量总和。
[0008]上述总三萜的含量是以熊果酸为对照品，利用香草醛
‑
冰醋酸
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高氯酸显色比色法测定得到；所述总黄酮的含量是以槲皮素、儿茶素、二氢杨梅素和芦丁为对照品，利用高效液相色谱法测定得到。
[0009]上述刺梨活性提取物制备方法包括以下步骤：取刺梨果或刺梨果渣，用重量为刺梨果或刺梨果渣重量的5
‑
10倍的50
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95％乙醇水溶液回流提取2
‑
4次，每次1
‑
2小时，过滤，合并滤液，回收乙醇，在滤液中加体积为滤液体积的0.5
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1倍的水进行分散，抽滤，水洗沉淀2
‑
4次，然后用石油醚或正己烷洗沉淀2
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4次，干燥沉淀得提取物。
[0010]其中制备方法中所述干燥为冷冻干燥或真空减压干燥。
[0011]上述述提取物对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用。
[0012]上述提取物通过降低肝脏中转氨酶活性、增强抗氧化活性、调控肝脏组织中Nrf2/Keap1相关蛋白的表达发挥保护肝损伤的作用。
[0013]上述提取物用于制备辅助保护急性酒精性肝损伤的药物、药物中间体或者食品添加剂。
[0014]上述提取物制备药物或功能食品时，直接使用或者以组合物的形式使用；所述组合物包括1
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99％的提取物，其余为载体或赋形剂；所述药物或功能食品的剂型为硬胶囊、片剂、口服液、颗粒剂、软胶囊或滴丸剂。
[0015]其中，刺梨活性提取物鉴定方法为：向提取物样品中加入1mL 70％的甲醇内标提取液，斡旋5min混匀，离心(1200r/min,4℃)10min，取上清液用微孔滤膜(0.22μm)过滤，保存于进样瓶中，用于LC
‑
MS/MS检测。
[0016]色谱质谱采集条件：使用Thermo Fisher Scientific公司生产的Dionex Ultimate 3000 RSLC(HPG)液相色谱仪与Thermo Scientific Q Exactive Focus质谱仪进行检测，HESI
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II离子源，Thermo Fisher Hypersil GOLD a Q(100*2.1mm,1.9μm)色谱柱。离子源参数设置为Spray Voltage(3.0kV(+)/2.5kV(
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))；Capillary Temperature(320℃)；Sheath Gas(35arb)；AUX Gas(10arb)；Sweep Gas(0arb)；Probe Heater Temperature(350℃)；S
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Lens(60)。流动相中A相为乙腈(0.1％甲酸)、B相为0.1％甲酸水，梯度洗脱0～50min A为5％～95％，流速为0.3mL/min，柱温为40℃。质谱扫描参数设置Scan mode(Full MS
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ddms2)，Full MS scan range(100to 1500m/z)，Spectrum data type(Profile)，Resolution(Full MS:70,000，MS/MS:17,500)，AGC target(Full MS:1e6，MS/MS:2e5)，Maximum IT(Full MS:100ms，MS/MS:50ms)，Isolation width(1.5m/z)，Dynamic excl本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物，其特征在于：所述提取物含有总三萜和总黄酮，其中总三萜的含量为5％～25％；总黄酮的含量为3％～10％。2.根据权利要求1所述的一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物，其特征在于：所述总三萜包括蔷薇酸、2
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氧代坡模醇酸、Kajiichigoside F1和刺梨酸；所述总黄酮包括槲皮素、儿茶素、二氢杨梅素和芦丁。3.根据权利要求2所述的一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物，其特征在于：所述总三萜的含量为蔷薇酸、2
‑
氧代坡模醇酸、Kajiichigoside F1和刺梨酸的含量总和，总黄酮的含量为槲皮素、儿茶素、二氢杨梅素和芦丁的含量总和。4.根据权利要求1所述的一种对急性酒精性肝损伤具有辅助保护作用的刺梨活性提取物，其特征在于：所述总三萜的含量是以熊果酸为对照品，利用香草醛
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冰醋酸
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高氯酸显色比色法测定得到；所述总黄酮的含量是以槲皮素、儿茶素、二氢杨梅素和芦丁为对照品，利用高效液相色谱法测定得到。5.根据权利要求1
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4任意一项所述的提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：取刺梨果或刺梨果渣，用重量为刺梨果或刺梨果渣重量的5
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：陈发菊，杨小生，李良群，官志忠，高明，王瑜，李齐激，李立郎，廖秀，葛丽娟，杨艳，杨娟，严艳芳，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：