【技术实现步骤摘要】
一种用于疤痕修复的自体脂肪源干细胞的提取方法
[0001]本专利技术涉及疤痕修复
,具体为一种用于疤痕修复的自体脂肪源干细胞的提取方法。
技术介绍
[0002]自体干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种APSC多能细胞,是一类具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞。自体干细胞是一种未充分分化,尚不成熟的细胞,具有再生各种组织器官和人体的潜在功能,改变了人类疾病的应对方法,医学界称为“万用细胞”。自体干细胞是一种“种子细胞”,动物体就是通过自体干细胞的分裂来实现细胞的更新,从而保证动物体持续生长发育的。当遭遇疾病,某一器官罢工或受伤时,自体干细胞会第一时间作出反应,促进分化成身体所需的专属细胞,从而提供足够数量的专属细胞帮助修复和愈合。在神经系统疾病、免疫系统疾病等诸多疾病的治疗有着广泛的应用。
[0003]现阶段对于疤痕修复常采用修复膏、修复液、修复贴等方式,存在大多数的修复产品不同程度地存在着化学成分过多、见效慢、产品价格昂贵,且取得的成效并不一定很好的缺点。
专利技术 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于疤痕修复的自体脂肪源干细胞的提取方法,其特征在于:具体包括如下步骤:步骤S1:选择患者机体一处部位作为抽取脂肪的部位并进行标记,使用局麻肿胀液处理该部位,局麻肿胀处理完毕后,使用50mL注射器与4mm吸脂针沿着皮肤切口的方向插入皮下脂肪组织,吸取50mL脂肪组织液;步骤S2:将带有脂肪组织液的注射器置于4
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6℃条件下,置于500mL生理盐水中,静置10
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15min,排出最下层,然后将剩余液体转移至50mL离心管,置于冷冻高速离心机,在温度4℃,转速1000
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1200r/min条件下,离心5min,离心结束后取上层,得到脂肪颗粒;步骤S3:将步骤S2得到的脂肪颗粒置于50mL注射器,使用双通道乳糜器,分别经过3孔、5孔、9孔经过8次反复推送,乳糜破碎后,将破碎后的脂肪颗粒加入烧杯,然后加入生理盐水和正泰霉素,转速50r/min混合搅拌3
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5min,然后转移至50mL离心管中,置于高速离心机中,在温度4℃,转速2000
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2500r/min条件下,离心8
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10min,离心结束后,取最下层,得到初提液;步骤S4:将步骤S3得到的初提液加入PBS缓冲液与含有人自体血清的DMEM培养基中,置于二氧化碳培养箱,在30
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37℃条件下培养5
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7天,得到原代细胞;步骤S5:5
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7天后,融合度到达70%
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80%时,使用500mLPBS缓冲液冲洗2次,然后加入胰酶和EDTA消化液,加入含有人自体血清的DMEM培养基,将细胞密度稀释3
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4倍,置于二氧化碳培养箱在35
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37℃条件下,培养5
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7天,培养结束后加入生理盐水,转移至50mL离心管中,再置于高速冷冻离心机,在4℃,1500
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2...
【专利技术属性】
技术研发人员:占震锋,李庆静,
申请(专利权)人:上海南滨江细胞生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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