用于改进活细胞中编辑序列的检测的仪器、模块和方法技术

本公开内容提供了用于在核酸引导的核酸酶基因组编辑之后改善对经编辑的细胞的检测的仪器、模块和方法。本公开内容提供了改进的自动化仪器，该自动化仪器进行用于筛选已经经受编辑的细胞并鉴定经正确编辑的细胞的方法，包括高通量方法在内。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于改进活细胞中编辑序列的检测的仪器、模块和方法相关申请此国际PCT申请要求2018年8月14日提交的第62/718,449号、2018年9月24日提交的第62/735,365号、2018年12月18日提交的第62/781,112号和2018年12月13日提交的第62/779,119号美国临时申请以及2019年4月9日发布的第10,253,316号美国专利的优先权。专利
本专利技术涉及用于筛选、选择活细胞中的基因组编辑并因此优化基因组编辑的检测的改进的仪器、模块和方法。专利技术背景在下面的讨论中，出于背景和介绍目的，将会描述到某些文章和方法。本文中包含的任何内容均不得解释为对现有技术的“承认”。本申请人明确地保留在适当的情况下证明本文所引用的方法在适用法律条文下不构成现有技术的权利。对活细胞基因组进行精确、靶向性改变的能力一直是生物医学研究和开发中的长期目标。最近，已鉴定出多种核酸酶，它们允许操纵基因序列，从而操纵基因功能。核酸酶包括核酸引导的核酸酶，使研究人员能够在活细胞中产生永久性编辑。当前采用核酸引导的核酸酶系本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于实体壁单一化或基本上单一化、生长、诱导编辑以及归一化或择优挑选(SWIIN)模块的单一化组件，包括：/n包括上表面和下表面的截留物构件，其中，所述截留物构件包括至少一个截留物分配通道，所述截留物分配通道从所述截留物构件的上表面到所述截留物构件的下表面穿越所述截留物构件并穿越截留物构件的长度的70％至95％；其中，所述截留物构件的所述下表面包括截留物脊，截留物流动导向器位于所述截留物脊之间；其中，所述截留物构件进一步包括一个或更多个截留物构件端口，所述截留物构件端口被配置为向所述截留物构件供应细胞和流体以及从所述截留物构件去除细胞和流体；并且其中，所述截留物构件端口流体地连接至所述截...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180630 US 16/024,816;20180814 US 62/718,449;20181.一种用于实体壁单一化或基本上单一化、生长、诱导编辑以及归一化或择优挑选(SWIIN)模块的单一化组件，包括：
包括上表面和下表面的截留物构件，其中，所述截留物构件包括至少一个截留物分配通道，所述截留物分配通道从所述截留物构件的上表面到所述截留物构件的下表面穿越所述截留物构件并穿越截留物构件的长度的70％至95％；其中，所述截留物构件的所述下表面包括截留物脊，截留物流动导向器位于所述截留物脊之间；其中，所述截留物构件进一步包括一个或更多个截留物构件端口，所述截留物构件端口被配置为向所述截留物构件供应细胞和流体以及从所述截留物构件去除细胞和流体；并且其中，所述截留物构件端口流体地连接至所述截留物分配通道和所述截留物流动导向器；
具有上表面和下表面的穿孔构件，其中，所述穿孔构件的所述上表面位于所述截留物构件的所述下表面的下方并邻近所述截留物构件的所述下表面，并且其中，所述穿孔构件包括至少25,000个穿孔；
具有上表面和下表面的过滤器，其中，所述过滤器的所述上表面位于所述穿孔构件的下表面的下方并邻近所述穿孔构件的下表面，并且其中，所述过滤器的所述下表面位于渗透物构件的上表面上方并邻近渗透物构件的上表面；
环绕所述穿孔构件和所述过滤器的垫圈；以及
所述渗透物构件，所述渗透物构件包括所述渗透物构件的所述上表面和下表面，其中，所述渗透物构件包括至少一个渗透物分配通道，所述渗透物分配通道从所述渗透物构件的下表面到所述渗透物构件的上表面穿越所述渗透物构件并穿越渗透物构件的长度的70％至95％；其中，所述渗透物构件的所述上表面包括渗透物脊，渗透物流动导向器位于所述渗透物脊之间；其中，所述渗透物构件进一步包括一个或更多个渗透物构件端口，所述渗透物构件端口被配置为向所述渗透物构件供应流体以及从所述渗透物构件去除流体；并且其中，所述渗透物构件端口流体地连接至所述渗透物分配通道和所述渗透物流动导向器；以及
联接所述截留物构件、所述穿孔构件、所述过滤器、所述垫圈和所述渗透物构件的装置。


2.一种包括根据权利要求1所述的单一化组件的SWIIN模块，进一步包括：
储器组件，其包括至少两个储器，其中：
第一储器1)流体地联接到至少一个储器端口，从所述SWIIN模块外部进入所述储器端口中的流体和/或细胞流入所述第一储器中；2)流体地联接到储器/通道端口，流体和/或细胞从所述储器/通道端口流入所述一个或更多个截留物构件端口中；以及3)气动地联接至压力源；
第二储器1)流体地联接到至少一个储器端口，从所述SWIIN模块外部进入所述储器端口中的流体流入所述第二储器中；2)流体地联接到储器/通道端口，流体从所述储器/通道端口流入所述一个或更多个渗透物构件端口中；以及3)气动地联接至压力源；以及SWIIN盖。


3.根据权利要求2所述的SWIIN模块，进一步包括：
两个另外的储器，其中：
第一储器和第三储器1)流体地联接到至少两个储器端口，从所述SWIIN模块外部进入所述至少两个储器端口中的流体和/或细胞流入所述第一储器和所述第三储器中；2)流体地联接至储器/通道端口，流体和/或细胞从所述储器/通道端口流入所述至少两个截留物构件端口中；以及3)气动地联接至压力源；以及
第二储器和第四储器1)流体地联接到至少两个储器端口，从所述SWIIN模块外部进入所述至少两个储器端口中的流体流入所述第二储器和所述第四储器中；2)流体地联接至储器/通道端口，流体从所述储器/通道端口流入所述至少两个渗透物构件端口中；以及3)气动地联接至压力源。


4.根据权利要求2所述的SWIIN，其中，所述SWIIN盖包括所述SWIIN盖的储器盖部分，并且其中，所述储器盖部分包括：1)至少两个储器进入孔口，其中，所述储器进入孔口提供通向所述储器端口的通路；以及2)至少两个气动进入孔口，其中，所述气动进入孔口提供通向所述至少两个储器的通路，并且为所述至少两个储器提供负压和正压。


5.根据权利要求1所述的单一化组件，其中，联接所述截留物构件、所述穿孔构件、所述过滤器、所述垫圈和所述渗透物构件的所述装置包括超声焊接。


6.根据权利要求1所述的单一化组件，其中，所述穿孔构件包括至少100,000个穿孔。

【专利技术属性】
技术研发人员：菲利普·贝尔格莱德，唐·马斯魁勒，布鲁斯·查班斯基，豪尔赫·贝尔纳特，安德鲁·加斯特，理查德·福克斯，
申请(专利权)人：因思科瑞普特公司，
类型：发明
国别省市：美国;US